【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物检测，尤其涉及一种低浓度酶标记g蛋白的稳定保护剂。
技术介绍
1、酶联免疫吸附试验(elisa)是利用酶标记复合物作为二抗建立的一种免疫诊断技术，具有操作简单、反应快速、可高通量检测多个样品等特点，在生物学、医学等多个领域广泛应用。酶标记复合物作为elisa试剂盒中的关键组分之一，其稳定性也是衡量试剂盒产品质量的一个关键指标。酶标记复合物作为一种蛋白，需要在低温条件下保存，因此通常情况下，酶标记复合物原液需要在-20℃及以下温度保存，但在elisa试剂盒中，酶标记复合物需要稀释数千倍以上使用，且同elisa试剂盒一起置于2℃-8℃保存，此时，低浓度的酶标记复合物往往不稳定，容易降解而失去生物活性，因此迫切需要对低浓度的酶标记复合物提供一种稳定保护剂，使其可以在2℃-8℃保存时，性质稳定，生物学活性没有明显降低。
2、链球菌蛋白g(简称g蛋白)是一种能与多种哺乳动物抗体igg结合的链球菌细胞壁蛋白，因其结合力强、结合谱广，常代替二抗被应用到多种属哺乳动物抗体检测领域。目前已有专利技术专利cn115993460a涉及到碱性磷酸酶标记肌红蛋白抗体稀释液、cn109900900a涉及到碱性磷酸酶标记降钙素原抗原或抗体的稀释液等研究，但到目前为止，尚没有涉及到酶标记g蛋白稳定保护剂的专利报道，鉴于酶标记g蛋白独特的生物学特性以及在检测试剂盒的广泛应用前景，需要进一步改进和提升低浓度下酶标记g蛋白的稳定性。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是为了解决现有技术中存
2、为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
3、一种低浓度酶标记g蛋白的稳定保护剂，包括以下原料：0.1-0.5％的鱼明胶、0.1％-0.5％的鸡卵清白蛋白、0.5％的聚乙烯吡咯烷酮、0.5％的三乙醇胺、0.2％的甘油、0.02％的吐温20、0.1％的proclin300。
4、作为本专利技术的进一步技术方案，包括以下原料：0.3-0.5％的鱼明胶、0.3％-0.5％的鸡卵清白蛋白、0.5％的聚乙烯吡咯烷酮、0.5％的三乙醇胺、0.2％的甘油、0.02％的吐温20、0.1％的proclin300。
5、作为本专利技术的进一步技术方案，包括以下原料：0.5％的鱼明胶、0.5％的鸡卵清白蛋白、0.5％的聚乙烯吡咯烷酮、0.5％的三乙醇胺、0.2％的甘油、0.02％的吐温20、0.1％的proclin300。
6、采用特定比例的聚乙烯吡咯烷酮、三乙醇胺、甘油、吐温20、proclin300协同复配，使得酶标记g蛋白在低浓度下仍保持较高的活性和稳定性。
7、鱼明胶、鸡卵清白蛋白均为惰性蛋白，可替代免疫学检测中常用的胎牛血清、牛血清白蛋白等，作为低浓度蛋白补充保护剂，且不会与目标保护蛋白发生特异性反应。
8、聚乙烯吡咯烷酮作为一种非离子型高分子化合物，其可作为液体制剂的分散剂，提高酶和g蛋白在液体环境中的稳定性。
9、三乙醇胺为抗氧化剂，可以防止酶标记g蛋白被氧化降解，提高酶标记g蛋白的稳定性。
10、甘油作为多羟基化合物，可与酶标记g蛋白形成氢键，并在酶标记g蛋白周围形成水膜，防止酶标记g蛋白水解变性，且能阻止变性剂接近酶的活性中心。
11、吐温20作为非离子表面活性剂，可与酶标记g蛋白表面疏水基团作用，降低酶标记g蛋白局部聚集沉淀风险，减少酶标记g蛋白在容器中的吸附损失。
12、proclin300作为一种杂环杀菌防腐剂，可有效抑制酶标稀释保护液体系中微生物滋生，以延长制剂的使用效期。
13、作为本专利技术的进一步技术方案，原料的百分比均为w/v、即质量体积百分比。
14、作为本专利技术的进一步技术方案，稳定保护剂所用缓冲液为含有0.2mol/l氯化钠的0.02mol/l三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液，缓冲液的ph为7.2±0.2。
15、作为本专利技术的进一步技术方案，所述三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液的制备步骤为：
16、s1：称取三羟甲基氨基甲烷、氯化钠于适量纯水中，搅拌溶解；
17、s2：用盐酸调节ph至7.2±0.2，补充纯化水，至三羟甲基氨基甲烷终浓度为0.02mol/l、氯化钠终浓度为0.2mol/l；
18、s3：搅拌混匀，用0.22μm滤膜过滤除菌，即得三羟甲基氨基甲烷-盐酸盐缓冲液。
19、本专利技术的有益效果为：
20、1、采用惰性蛋白与高分子聚合物、多羟基化合物，三者按照一定的比例联用，可以长时间维持酶标记g蛋白在低浓度液体状态下的结构和活性稳定。
21、2、采用新型杀菌防腐剂抑制体系，不仅与酶标记g蛋白不发生生物化学反应，且可以有效防止微生物滋生，安全环保，有效延长保存期。
22、3、充分考虑酶标记g蛋白的高亲和力和广谱性，避开使用可能会与蛋白g发生特异反应的胎牛血清、bsa、酪蛋白等保护蛋白，取而代之的是非哺乳动物体系的鱼明胶、鸡卵清白蛋白等惰性保护蛋白，避免对酶标记g蛋白的干扰。
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1.一种低浓度酶标记G蛋白的稳定保护剂，其特征在于，包括以下原料：0.1-0.5％的鱼明胶、0.1％-0.5％的鸡卵清白蛋白、0.5％的聚乙烯吡咯烷酮、0.5％的三乙醇胺、0.2％的甘油、0.02％的吐温20、0.1％的Proclin300。
2.根据权利要求1所述的一种低浓度酶标记G蛋白的稳定保护剂，其特征在于，包括以下原料：0.3-0.5％的鱼明胶、0.3％-0.5％的鸡卵清白蛋白、0.5％的聚乙烯吡咯烷酮、0.5％的三乙醇胺、0.2％的甘油、0.02％的吐温20、0.1％的Proclin300。
3.根据权利要求1所述的一种低浓度酶标记G蛋白的稳定保护剂，其特征在于，包括以下原料：0.5％的鱼明胶、0.5％的鸡卵清白蛋白、0.5％的聚乙烯吡咯烷酮、0.5％的三乙醇胺、0.2％的甘油、0.02％的吐温20、0.1％的Proclin300。
4.根据权利要求1所述的一种低浓度酶标记G蛋白的稳定保护剂，其特征在于，原料的百分比均为W/V、即质量体积百分比。
5.根据权利要求1所述的一种低浓度酶标记G蛋白的稳定保护剂，其特征在于，稳定
6.根据权利要求5所述的一种低浓度酶标记G蛋白的稳定保护剂，其特征在于，所述三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液的制备步骤为：
...【技术特征摘要】
1.一种低浓度酶标记g蛋白的稳定保护剂，其特征在于，包括以下原料：0.1-0.5％的鱼明胶、0.1％-0.5％的鸡卵清白蛋白、0.5％的聚乙烯吡咯烷酮、0.5％的三乙醇胺、0.2％的甘油、0.02％的吐温20、0.1％的proclin300。
2.根据权利要求1所述的一种低浓度酶标记g蛋白的稳定保护剂，其特征在于，包括以下原料：0.3-0.5％的鱼明胶、0.3％-0.5％的鸡卵清白蛋白、0.5％的聚乙烯吡咯烷酮、0.5％的三乙醇胺、0.2％的甘油、0.02％的吐温20、0.1％的proclin300。
3.根据权利要求1所述的一种低浓度酶标记g蛋白的稳定保护剂，其特征在于，包括以下原料：0.5％...
【专利技术属性】
技术研发人员：张琛卿，甄岳，官丽娟，安玲玲，张志，孙学强，
申请(专利权)人：青岛立见生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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