【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于化学分析检测，具体涉及一种基于吡喃喹啉和苯并咪唑杂化的荧光染料，及其在荧光染色中的应用。
技术介绍
1、荧光探针由于其具有无损性、高灵敏度、实时成像等特点，在光动力治疗、荧光传感、医疗诊断等生命科学领域有着广泛的应用。线粒体是一种存在于大多数真核细胞中的细胞器，有“细胞动力工厂”之称，是细胞内氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷(atp)的主要场所，主要为细胞活动提供能量；此外，研究表明，脂滴并非细胞内一个简单的能量贮存器，而是多功能细胞器，与其它细胞器相互作用，在脂类代谢与存储、膜转运、蛋白降解，以及信号传导过程中起着重要的作用；线粒体和脂滴等细胞器的生物荧光成像对揭示很多生理和病理过程有着重要的意义，然而，由于目前市售的细胞荧光染料大多只能针对单一的细胞结构进行染色，使用起来及其不方便，效率低下，因此开发针对细胞内不同部位进行标记的荧光染料具有重要的意义和良好的应用前景。
技术实现思路
1、为克服现有技术的不足，本专利技术采用将吡喃喹啉和苯并咪唑两种荧光团杂化的新策略提供一种能够同时标记线粒体和脂滴的荧光染料。
2、本专利技术解决的技术方案是，一种基于吡喃喹啉和苯并咪唑杂化的荧光染料，其结构为：其中，r为其合成制备方法包括以下步骤：
3、1、化合物2a/2b的合成：
4、将化合物1a或化合物1b置于圆底烧瓶中，加入丙酮溶解，再加入3-溴丙炔和碳酸钾，将混合物在55℃下回流10小时，反应结束后，过滤除去不溶物，再减压除去溶剂，将所得粗产物通
5、所述化合物1a/1b、丙酮、3-溴丙炔、碳酸钾的摩尔体积比为10:30:2:20；其中，摩尔体积比是指固体以mmol计，液体以ml计；
6、所述1a或1b为其中，r为
7、2、化合物3a/3b的合成：
8、将2a或2b置于烧瓶中，加入4-氨基苄醇，用三氟甲磺酸镧和碘化亚铜作为催化剂，加入乙腈，在氮气保护下，将混合物在70℃下反应5小时，反应结束后，减压除去溶剂，将所得粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到橙红色固体化合物3a或橙红色固体化合物3b；
9、所述2a/2b、4-氨基苄醇、三氟甲磺酸镧、碘化亚铜、乙腈的摩尔体积比为：2.8：4：2.8：0.3：20；
10、3、化合物4a/4b的合成：
11、将化合物3a或化合物3b溶于二氯甲烷，并加入二氧化锰，在氩气保护下，室温搅拌反应4小时，然后将混合物用硅藻土过滤，减压除去溶剂，将所得粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到橙红色固体化合物4a或红色固体化合物4b；
12、所述3a/3b、二氯甲烷、二氧化锰的摩尔体积比为：0.74：15：10.3；
13、4、化合物5a/5b的合成：
14、将化合物4a或化合物4b溶于n,n-二甲基甲酰胺，然后加入邻苯二胺和焦亚硫酸钠，在氩气保护下将混合物加热至110℃，反应4小时，反应结束后，将混合物通过硅胶柱层析纯化，得到紫色固体化合物5a或紫色固体化合物5b；
15、所述4a/4b、n,n-二甲基甲酰胺、邻苯二胺、焦亚硫酸钠的摩尔体积比为：0.64：10：0.7：0.7；
16、5、化合物5a-me/5b-me的合成：
17、将化合物5a或化合物5b溶于二氯甲烷，转移到厚壁反应瓶中，加入碘甲烷，在48℃下反应12小时，反应结束后，将反应液倒入石油醚中，抽滤，收集不溶物，用石油醚洗涤不溶物，得到紫色固体化合物5a-me或深紫色固体化合物5b-me；
18、所述5a/5b、二氯甲烷、碘甲烷、石油醚的摩尔体积比为：0.24：15：0.06：100。
19、所述步骤1-4中的硅胶柱为100-500目。
20、所述步骤1中洗脱剂为二氯甲烷/乙酸乙酯(体积比：10/1)。
21、所述步骤2、3中洗脱剂为二氯甲烷/乙酸乙酯(体积比：100/1)。
22、所述步骤4中先用二氯甲烷洗脱，再用二氯甲烷/乙酸乙酯(体积比：20/1)洗脱。
23、本专利技术科学合理，原料丰富易得，易生产制备，使用便捷，细胞毒性低，具有细胞膜穿透性，对线粒体和脂滴均有较好的染色效果，而且在线粒体和脂滴中的荧光颜色不同，可以分别应用于不同环境的染色，使用效果好，为分析检验技术提供了较好的发展，经济和社会效益显著。
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1.一种基于吡喃喹啉和苯并咪唑杂化的荧光染料，其特征是：
2.根据权利要求1所述的一种基于吡喃喹啉和苯并咪唑杂化的荧光染料，其特征是：所述步骤1-4中的硅胶柱为100-500目。
3.根据权利要求1所述的一种基于吡喃喹啉和苯并咪唑杂化的荧光染料，其特征是：所述步骤1中洗脱剂为二氯甲烷/乙酸乙酯(体积比：10/1)。
4.根据权利要求1所述的一种基于吡喃喹啉和苯并咪唑杂化的荧光染料，其特征是：所述步骤2、3中洗脱剂为二氯甲烷/乙酸乙酯(体积比：100/1)。
5.根据权利要求1所述的一种基于吡喃喹啉和苯并咪唑杂化的荧光染料，其特征是：所述步骤4中先用二氯甲烷洗脱，再用二氯甲烷/乙酸乙酯(体积比：20/1)洗脱。
6.根据权利要求1所述的一种基于吡喃喹啉和苯并咪唑杂化的荧光染料，其特征是：其合成制备方法包括以下步骤：
【技术特征摘要】
1.一种基于吡喃喹啉和苯并咪唑杂化的荧光染料，其特征是：
2.根据权利要求1所述的一种基于吡喃喹啉和苯并咪唑杂化的荧光染料，其特征是：所述步骤1-4中的硅胶柱为100-500目。
3.根据权利要求1所述的一种基于吡喃喹啉和苯并咪唑杂化的荧光染料，其特征是：所述步骤1中洗脱剂为二氯甲烷/乙酸乙酯(体积比：10/1)。
4.根据权利要求1所述的一种基于吡喃喹...
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