【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
公开了涉及对甘露糖修饰的蛋白质具有特异性的蛋白酶的组合物和方法。这些组合物和方法特别适用于在通过酵母和真菌细胞产生的蛋白质中进行接头特异性裂解。这些组合物和方法的一个用途是用于附聚发酵产品中的酵母和酵母组分。组合物的另一个用途是用于产生碳水化合物含量减少的蛋白质的级分。
技术介绍
1、蛋白质糖基化是对多肽链的常见天然修饰。糖基化是指碳水化合物附接到蛋白质的官能团,以调节折叠、稳定性、溶解度和蛋白质-蛋白质相互作用。已知不同类型的蛋白质糖基化,通常可归类为将碳水化合物附接到天冬酰胺或精氨酸残基的氨基基团的n-连接糖基化,以及将碳水化合物附接到丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基的羟基基团的o-连接糖基化。
2、在特定的o-连接糖基化形式中,甘露糖直接附接到丝氨酸和苏氨酸残基,通常在模块蛋白质的接头结构域中。这样的修饰主要发生在酵母和真菌细胞中,但很少发生在细菌细胞中。虽然以前已经描述过这种o-连接糖基化形式,但是尚未描述过将其开发用于商业目的的能力。
技术实现思路
1、本专利技术的组合物和
...【技术保护点】
1.一种用于修饰在靶蛋白中存在的甘露糖修饰的氨基酸序列的方法,所述方法包括使所述蛋白质与具有甘露糖特异性糖蛋白酶活性的重组多肽接触,其中所述接触发生在非天然发生的环境中。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述修饰是蛋白水解。
3.如权利要求1或2所述的方法,其中所述甘露糖修饰的氨基酸序列在靶蛋白的接头区中。
4.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述靶蛋白存在于酵母或真菌细胞、细胞体或细胞组分的疏水性表面。
5.如权利要求4所述的方法,其中所述接触导致所述细胞、细胞体或细胞组分的聚集。
6.如前述权利要求
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种用于修饰在靶蛋白中存在的甘露糖修饰的氨基酸序列的方法,所述方法包括使所述蛋白质与具有甘露糖特异性糖蛋白酶活性的重组多肽接触,其中所述接触发生在非天然发生的环境中。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述修饰是蛋白水解。
3.如权利要求1或2所述的方法,其中所述甘露糖修饰的氨基酸序列在靶蛋白的接头区中。
4.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述靶蛋白存在于酵母或真菌细胞、细胞体或细胞组分的疏水性表面。
5.如权利要求4所述的方法,其中所述接触导致所述细胞、细胞体或细胞组分的聚集。
6.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述接触发生在工业或药物反应容器中。
7.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述靶蛋白和具有甘露糖特异性糖蛋白酶活性的重组多肽来自不同的生物。
8.一种用于附聚在其表面上展示甘露糖修饰的氨基酸序列的生物的方法,所述方法包括使所述生物与具有甘露糖特异性糖蛋白酶活性的重组多肽接触。
9.如权利要求8所述的方法,其中所述生物是酵母或真菌。
10.如权利要求9所述的方法,其中所述生物是酵母属物种(saccharomyces sp)。
11.一种用于修饰由酵母细胞产生的并包含酵母细胞、细胞体和/或细胞组分的发酵产物的方法,所述方法包括使所述发酵产物与具有甘露糖特异性糖蛋白酶活性的重组多肽接触,以产生具有降低的光密度的溶解固体和/或富集蛋白质的不溶性级分的经修饰的发酵产物。
12.如权利要求11所述的方法,其中所述降低的光密度由所述酵母细胞、细胞体和/或细胞组分的聚集引起。
13.如权利要求11或12所述的方法,其中所述发酵产物是来自乙醇发酵工艺的釜馏物。
14.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述具有甘露糖特异性糖蛋白酶活性的重组多肽符合隐马尔可夫模型tresub-21374_nrblast_hss-id35-qc70_t2k。
15.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述具有甘露糖特异性糖蛋白酶活性的重组多肽与选自由以下组成的组中的氨基酸序列具有至少90%的氨基酸序列同一性:seq id no:1(iff05497)、seq ...
【专利技术属性】
技术研发人员:B·R·克莱门,M·周,K·Y·诺斯克鲁蒂,T·P·格雷卡,J·V·米勒,R·拉宾诺维奇,S·C·罗斯曼,T·斯塔尔,唐忠美,A·R·托波扎达,M·L·谢,J·雅格,张正红,
申请(专利权)人:丹尼斯科美国公司,
类型:发明
国别省市:
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