用于检测核酸的对象碱基序列中的变异的方法、选择性地抑制核酸的扩增的方法、及用于实施这些的试剂盒技术

本发明专利技术旨在提供可以比由夹‑PCR法的变异型基因的检测界限低的变异基因含有率检测变异基因的简便的方法及实施其的试剂盒。另外，旨在提供可在核酸扩增反应中选择性地抑制作为对象的碱基序列的扩增的简便的方法及实施其的试剂盒。在核酸扩增反应中，以含以下构成单元的二烯丙基胺类·二氧化硫共聚物作为由夹核酸的核酸扩增抑制的增强剂使用：具有通式(I‑a)或通式(I‑b)所表示的结构或作为其酸加成盐的结构的构成单元(A)：【化1】式中，R<supgt;1</supgt;表示任选具有羟基的碳原子数1～10的烷基、碳原子数5～10的环烷基或碳原子数7～10的芳烷基，和具有通式(I‑c)所表示的结构的构成单元(B)：【化2】

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

【】本专利技术涉及用于检测试样中的核酸的对象碱基序列中的相对于标准碱基序列的变异的方法、及在核酸扩增反应中，选择性地抑制具有对象碱基序列的核酸的扩增的方法、以及用于实施这些的试剂盒。更具体而言，涉及通过在使用夹核酸(有时也称为阻断剂核酸)的核酸扩增反应中，在特定的二烯丙基胺类·二氧化硫共聚物的存在下进行核酸扩增，检测对象碱基序列中的相对于标准碱基序列的变异的方法及选择性地抑制具有对象碱基序列的核酸的扩增的方法、以及用于实施这些的试剂盒。

技术介绍

0、
技术介绍

1、基因的突变有成为癌的起因时，期待通过早期发现这样的基因的突变，与癌的早期治疗关联。另外得知，某特定的基因的变异与与某种疾病的易罹患、药的治疗效果、副作用的强弱等大相关。例如知晓，作为上皮生长因子受体(egfr)的酪氨酸激酶抑制剂的吉非替尼(商品名：易瑞沙)在具有特定的基因变异的一部分的肺癌患者中显示大的功效，但在约0.5％左右的患者中引起重度的间质性肺炎(非专利文献1)。另外知晓，在大肠癌中，kras基因有变异，则分子目标药西妥昔单抗(商品名：爱必妥)的奏效率低，无变异，则奏效率本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.检测试样中的核酸的对象碱基序列中的相对于标准碱基序列的变异的方法，其中，使用下列物质进行以所述试样中的核酸作为模板的核酸扩增反应：

2.权利要求1所述的检测方法，其中所述二烯丙基胺类·二氧化硫共聚物是二烯丙基甲基胺·二氧化硫共聚物、二烯丙基甲基胺酸加成盐·二氧化硫共聚物、二烯丙基乙基胺·二氧化硫共聚物、或者二烯丙基乙基胺酸加成盐·二氧化硫共聚物。

3.权利要求1所述的检测方法，其中所述二烯丙基胺类·二氧化硫共聚物是二烯丙基甲基胺·二氧化硫共聚物或二烯丙基甲基胺酸加成盐·二氧化硫共聚物。

4.权利要求1～3之任一项所述的检测方法，其中所述非天然型核苷...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.检测试样中的核酸的对象碱基序列中的相对于标准碱基序列的变异的方法，其中，使用下列物质进行以所述试样中的核酸作为模板的核酸扩增反应：

2.权利要求1所述的检测方法，其中所述二烯丙基胺类·二氧化硫共聚物是二烯丙基甲基胺·二氧化硫共聚物、二烯丙基甲基胺酸加成盐·二氧化硫共聚物、二烯丙基乙基胺·二氧化硫共聚物、或者二烯丙基乙基胺酸加成盐·二氧化硫共聚物。

3.权利要求1所述的检测方法，其中所述二烯丙基胺类·二氧化硫共聚物是二烯丙基甲基胺·二氧化硫共聚物或二烯丙基甲基胺酸加成盐·二氧化硫共聚物。

4.权利要求1～3之任一项所述的检测方法，其中所述非天然型核苷酸是bna。

5.权利要求1～4之任一项所述的检测方法，其中将所述核酸扩增用实时pcr进行。

6.权利要求1～5之任一项所述的检测方法，其中所述试样中的核酸是基因组dna。

7.权利要求1～6之任一项所述的检测方法，其中在进行所述核酸扩增反应时，还进行以具有所述标准碱基序列的核酸作为模板的核酸扩增反应，

8.用于检测试样中的核酸的对象碱基序列中的相对于标准碱基序列的变异的试剂盒，其含：

9.权利要求8所述的试剂盒，其中所述二烯丙基胺类·二氧化硫共聚物是二烯丙基甲基胺·二氧化硫共聚物、二烯丙基甲基胺酸加成盐·二氧化硫共聚物、二烯丙基乙基胺·二氧化硫共聚物或二烯丙基乙基胺酸加成盐·二氧化硫共聚物。

10.权利要求9所述的试剂盒，其中所述二烯丙基胺类·二氧化硫共聚物是二烯丙基甲基胺·二氧化硫共聚物或二烯丙基甲基胺酸加成盐·二氧化硫共聚物。

11.权利要求8～10之任一项所述的试剂盒，其中所述非天然型核苷酸是bna。

12.在核酸扩增反应中抑制具有指定的对象碱基序列的试样中的核酸的扩增的方法，其中，使用下列物质进行以所述核酸作...

【专利技术属性】
技术研发人员：藤村尚宏，橘亚美，内木智朗，竹内实，照内洋子，渡边晃司，
申请(专利权)人：日东纺绩株式会社，
类型：发明
国别省市：