一种MD疫苗及其制备方法技术

本申请属于生物制药技术领域，公开了一种MD疫苗的制备方法，该方法先挑选鸡胚、消毒、取鸡胚细胞并培养，得到鸡胚成纤维细胞；再将病毒毒株接种至鸡胚成纤维细胞培养并收获感染细胞，随后将收获得到的感染细胞配苗、分装、冻存，其中冻存时使用程序降温仪冻存，所述程序降温仪的程序为：将箱体预冻至4℃，放入安瓿瓶预冷30min，以0.8～1.2℃/min的速率将苗温降至‑40℃；再以8～12℃/min的速率将苗温降至‑100℃，移入液氮保存，本申请通过上述设计得到了一种MD疫苗的制备方法，该方法具有制备速度快，疫苗数量大等优点，更加适合MD疫苗的大规模制备，此外，本申请还公开了一种MD疫苗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物制药，尤其涉及一种md疫苗及其制备方法。

技术介绍

1、鸡马立克病是由细胞结合性疱疹病毒(mdv)引起的鸡的一种高度传染的淋巴组织增生性疾病，鸡群感染马立克病毒后危害较大，对养禽业造成严重的危害。随着疫苗的广泛应用和鸡品系的不断选育，mdv在自然选择和免疫压力的双重作用下，其毒力不断增强，一次次地突破了疫苗所能提供的保护力。

2、20世纪70年代所分离到的以强毒为主(vmdv)，70年代末到80年代mdv发生了很大变化，毒力增强，成为超强毒(vvmdv)；90年代出现了毒力更强的特超强毒(vv+mdv)。而hvt冻干苗对md超强毒和特超强毒免疫效果差。

3、目前，普遍使用的能够抵御超强毒的疫苗毒株主要有814株和cvi988，其中814株是我国哈尔滨兽医生物药品研究所的童昆周先生从没有免疫过马立克疫苗的健康鸡群分离出的一株没有致瘤性的马立克病毒，与cvi988同属于血清i型毒株。但814株属于自然弱毒株，无致瘤性，因此，不存在毒力返强的问题。肇庆大华农生物药品有限公司自主研发的鸡马立克氏病活疫苗(cvtr株)于20本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种MD疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的MD疫苗的制备方法，其特征在于，步骤1中，鸡胚为9～11日龄鸡胚。

3.根据权利要求1所述的MD疫苗的制备方法，其特征在于，步骤1中，使用第一细胞培养液对鸡胚细胞进行培养，所述第一细胞培养液为M-199培养液且M-199培养液中还添加有0.5～3mmol/L的氨基酸、1.0～1.2μg/L的FGF；

4.根据权利要求1所述的MD疫苗的制备方法，其特征在于，所述缓冲液含有质量分数为2％的Hepes、质量分数为1.4％的NaHCO3、质量分数为0.02～0.5％的碱性氨基酸；所...

【技术特征摘要】

1.一种md疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的md疫苗的制备方法，其特征在于，步骤1中，鸡胚为9～11日龄鸡胚。

3.根据权利要求1所述的md疫苗的制备方法，其特征在于，步骤1中，使用第一细胞培养液对鸡胚细胞进行培养，所述第一细胞培养液为m-199培养液且m-199培养液中还添加有0.5～3mmol/l的氨基酸、1.0～1.2μg/l的fgf；

4.根据权利要求1所述的md疫苗的制备方法，其特征在于，所述缓冲液含有质量分数为2％的hepes、质量分数为1.4％的nahco3、质量分数为0.02～0.5％的碱性氨基酸；所述碱性氨基酸选自精氨酸、赖氨酸、组氨酸中的至少一种。

5.根据权利要求1所述的md疫苗的制备方法，其特征在于，步骤1中，鸡胚细胞的培养方法为细胞工厂培养法，且细胞工厂培养法培养过程的细胞悬液中细胞的密度为200万细胞每毫升，所述细胞工厂培养法中细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗琼，陈瑞爱，冯金牛，陈振伟，温良海，熊挺，黄水洪，莫秋女，李小静，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：