【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及γ-聚谷氨酸，具体为一种利用淀粉异步糖化发酵生产γ-聚谷氨酸的方法。
技术介绍
1、生物基聚合物具有原料可再生、减少碳排放、节约能源、生物可降解性等特性，成为新材料产业发展的重要方向(huang et al.，2019)。在多种多样的生物聚合物中，聚γ-谷氨酸(γ-pga)是一种具有广泛用途的生物高分子聚合物，在骨和软骨再生、伤口愈合和药物输送、肥料增效、土壤改良、食品增稠、护肤保湿、废水处理等领域均具有良好的应用前景(sun et al.，2021)。γ-pga主要通过多种芽孢杆菌发酵产生。其生产菌株可分为l-谷氨酸依赖型和l-谷氨酸非依赖型。l-谷氨酸非依赖型菌株虽然不用额外添加谷氨酸，可以降低生产成本，该类菌株产量较低，目前很难达到工业化生产的产量水平。相比之下，谷氨酸依赖性菌株具有产量高的优势，成为主要的γ-pga生产菌株。
2、工业生产中，葡萄糖、蔗糖、甘油等为发酵时最常用的碳源，由于常见的碳源价格较贵，增加了生产成本，导致γ-pga的价格相对较高，这是限制γ-pga应用范围的主要瓶颈(ji et a...
【技术保护点】
1.一种利用淀粉异步糖化发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于：所述利用生玉米淀粉异步糖化发酵生产γ-聚谷氨酸的方法为：以淀粉糖化液或液化液为碳源，以产γ-聚谷氨酸的菌株进行发酵，基于聚谷氨酸的产量优化淀粉液化及糖化条件，最终获得有利于提高发酵产生聚谷氨酸的糖化条件；
2.根据权利要求1所述的一种利用淀粉异步糖化发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于：所述步骤1中淀粉的液化及糖化是将淀粉与蒸馏水混合，调制成浓度为30％的料液，淀粉乳的pH调至6.5，按75U/g加酶量加入耐高温α-淀粉酶后，在剧烈搅拌下先加热至72℃，保温15min后再加热至95℃，保温3...
【技术特征摘要】
1.一种利用淀粉异步糖化发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于：所述利用生玉米淀粉异步糖化发酵生产γ-聚谷氨酸的方法为：以淀粉糖化液或液化液为碳源，以产γ-聚谷氨酸的菌株进行发酵，基于聚谷氨酸的产量优化淀粉液化及糖化条件，最终获得有利于提高发酵产生聚谷氨酸的糖化条件；
2.根据权利要求1所述的一种利用淀粉异步糖化发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于：所述步骤1中淀粉的液化及糖化是将淀粉与蒸馏水混合，调制成浓度为30％的料液，淀粉乳的ph调至6.5，按75u/g加酶量加入耐高温α-淀粉酶后，在剧烈搅拌下先加热至72℃，保温15min后再加热至95℃，保温30min，升温灭酶并离心后取的上清液，即为液化液。使用糖化酶将液化液进行酶解的过程为糖化。糖化时，糖化酶加酶量设定为120u/g，糖化时ph设置为5，糖化温度为60℃，糖化时间为51.5h，待反应结束后升温灭酶并离心取上清液，所得即为糖化液。
3.根据权利要求1所述的一种利用淀粉异步糖化发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于：所述步骤3中的发酵培养基配方为蔗糖97.5g/l、酵母粉10g/l、味精50g/l、nh4cl 5g/l、尿素6g/l、k2hpo4 1.5g/l、k2hpo4·h2o 0.5g/l、mgso4 0.208g/l和cacl2 0.01％，ph 7，以液化液或糖化液为碳源发酵时，取同等量淀粉糖(以淀粉乳液中淀粉量来计)替代蔗糖。
4.根据权利要求1所述的一种利用淀粉异步糖化发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于：所述步骤4中的鉴定方法为：分别将10kda的γ-pga标准品与按上述方法提取的发酵产物溶解于ddh2o中，定容至5ml。加入5ml的盐酸后，于110℃下沙浴18h；依次将处理过的γ-pga标准品与发酵液，点在事先画好点的层析板上，所画的线距层析板底部0.5cm左右；将层析板稍倾斜放置于有展开剂的层析缸内。注意展开剂应在所画的线以下，不能直接没过所点的样品；待展开剂扩散至层析板三分之一处时取出层析板，55℃烘干；烘干后向层析板均匀喷上茚三酮显色剂，再次55℃烘干后观察各个斑点所在位置。
5.根据权利要求1所述的一种利用淀粉异步糖化发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于：所述步骤5的提取为取一定体积发酵液，用50％三氯乙酸将其ph调至3左右，于10000rpm下离心10min后收集上清液，弃去沉淀，用3mol/l的naoh将上清液ph调至...
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