一种基于实时荧光定量PCR技术检测阿龙山病毒的引物探针组、试剂盒和应用制造技术

本发明专利技术提供了一种基于实时荧光定量PCR技术检测阿龙山病毒的引物探针组、试剂盒和应用，属于病毒检测技术领域。本发明专利技术提供了一种基于实时荧光定量PCR技术检测阿龙山病毒的引物探针组及其检测方法，仅针对阿龙山病毒能够实现阳性检测，具有良好的检测特异性；同时所述引物探针组具有较高的检测灵敏度，较普通PCR灵敏度提高了10<supgt;3</supgt;倍，还具有良好的重复性，其CT值的变异系数低于2％。因此，采用本发明专利技术提供的所述引物探针组及其检测方法对阿龙山病毒检测具有良好的检测效果，适合用于未知原因发热性疾病的筛查。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于病毒检测，具体涉及一种基于实时荧光定量pcr技术检测阿龙山病毒的引物探针组、试剂盒和应用。

技术介绍

1、阿龙山病毒(alongshanvirus，alsv)属黄病毒科，荆门病毒属，具有分节段性rna基因，是全球范围内发现的第一个感染人的分节段黄病毒，大多数确诊的alsv病例都有明确的蜱叮咬病史。通过蜱叮咬感染哺乳动物，并在此间循环传播。alsv引起新发传染病阿龙山热，主要临床症状有发热(体温38.5～39.2℃)、持续性中度头痛、乏力、恶心并伴有咳嗽、咽部不适、右侧颈淋巴结肿大疼痛、精神沉郁、肌痛、关节痛、皮疹等，目前无专门针对alsv感染后的特效治疗药物，只能进行对症治疗。

2、对新发现的潜在病原建立特异、灵敏的检测方法，是开展该病原相关科研工作的基础，也是在一旦发生疫情的情况下实现早期诊断的技术储备。分子检测是病毒检测方法中常用的方法。

3、普通pcr对目标核酸的含量有最低拷贝数要求，低于该拷贝数则不能检测到核酸存在，容易造成假阴性。此外，在样本保存、运输及核酸提取等过程中，不可避免会造成部分核酸片段的降解与损失本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于实时荧光定量PCR技术检测阿龙山病毒的引物探针组，包括正向引物、反向引物和TaqMan探针，其特征在于，所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；所述反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；所述TaqMan探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。

2.一种基于实时荧光定量PCR技术检测阿龙山病毒的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述引物探针组和实时荧光定量PCR检测缓冲液。

3.根据权利要求2所述试剂盒，其特征在于，所述实时荧光定量PCR检测缓冲液为AceQUniversal U+Probe MasterMix V2。...

【技术特征摘要】

1.一种基于实时荧光定量pcr技术检测阿龙山病毒的引物探针组，包括正向引物、反向引物和taqman探针，其特征在于，所述正向引物的核苷酸序列如seq id no:1所示；所述反向引物的核苷酸序列如seq id no:2所示；所述taqman探针的核苷酸序列如seq id no:3所示。

2.一种基于实时荧光定量pcr技术检测阿龙山病毒的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述引物探针组和实时荧光定量pcr检测缓冲液。

3.根据权利要求2所述试剂盒，其特征在于，所述实时荧光定量pcr检测缓冲液为acequniversal u+probe mastermix v2。

4.权利要求1所述引物探针组或权利要求2或3所述试剂盒在检测阿龙山病毒中的应用。

5.根据权利要求4所述应用，其特征在于，所述检测阿龙山病毒为检测阿龙山病毒的ns3基...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩小虎，曹雪，陈泽良，姜峰，金鑫，徐昭艳，郝雅婷，郭美麟，方瑶琦，陈娜，
申请(专利权)人：沈阳农业大学，
类型：发明
国别省市：