改良的文库制备方法技术

提供高效地制备文库的方法。公开了包括以下工序(a)、(b)及(c)的文库制备方法：(a)由10pg以上的模板RNA合成单链cDNA的工序；(b)由上述单链cDNA合成双链cDNA的工序；及(c)使用非纯化的上述双链cDNA制备文库的工序。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术涉及文库制备方法。

技术介绍

1、在dna、rna等核酸的序列分析中，能够在短时间内得到庞大的碱基序列信息的下一代测序(ngs：next-generation sequencing)技术正在飞速发展。下一代测序能够进行可对多个个体同时测序的高度且高速的处理，是有助于临床诊断、药物开发等医疗技术、农业技术、基础研究等生命科学领域的强有力的分析技术。

2、下一代测序中通常需要制备由核酸片段构成的文库，所述核酸片段在末端添加有可发挥作为与层流流动腔(flow cell)的结合位点、引物结合位点等功能的衔接子(adapter)序列。

3、以rna为模板进行文库制备时实施如下方法：对生成的双链cdna溶液进行纯化后，进行文库制备。例如，rt-ramda法为扩增逆转录法，其通过对含有模板rna、引物、dna链特异性rna：dna杂交链分解酶、rnase h负型逆转录酶及基质的混合物进行孵育的工序，从而以rna为模板来扩增cdna，在文库化时实施如下方法：由单链cdna生成双链cdna，对溶液进行纯化后开始进行文库制备(专利文献1、非专本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种文库的制备方法，其包括以下的工序(a)、(b)及(c)：

2.根据权利要求1所述的方法，其中，

3.根据权利要求1所述的方法，其中，

4.根据权利要求1所述的方法，其中，

5.根据权利要求3所述的方法，其中，

6.根据权利要求3所述的方法，其中，

7.根据权利要求3所述的方法，其中，

8.根据权利要求1～7中任一项所述的方法，其中，

9.根据权利要求1～7中任一项所述的方法，其中，

10.根据权利要求1～7中任一项所述的方法，其中，

11.根据权利要求1～7中任...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种文库的制备方法，其包括以下的工序(a)、(b)及(c)：

2.根据权利要求1所述的方法，其中，

3.根据权利要求1所述的方法，其中，

4.根据权利要求1所述的方法，其中，

5.根据权利要求3所述的方法，其中，

6.根据权利要求3所述的方法，其中，

7.根据权利要求3所述的方法，其中，

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【专利技术属性】
技术研发人员：山越奈奈，武田贵成，渡边圣实，林哲太郎，二阶堂爱，
申请(专利权)人：东洋纺株式会社，
类型：发明
国别省市：