一种汉坦病毒HTNV型和SEOV型的检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种汉坦病毒HTNV型和SEOV型的检测试剂盒，属于分子生物学技术领域。本发明专利技术提供了一种汉坦病毒HTNV型和SEOV型的检测试剂盒，包括靶向HTNV特征序列的crRNA、靶向SEOV特征序列的crRNA、Cas12a蛋白和荧光标记探针，Cas12a蛋白能够和crRNA结合形成靶向HTNV特征序列或SEOV特征序列的二元复合物，荧光标记探针能够在Cas12a蛋白的反式切割活性下发生剪切，释放荧光信号。使用此检测试剂盒对待测样本中的汉坦病毒HTNV型和SEOV型进行检测具有可与荧光定量PCR检测方法比拟的检测灵敏度，HTNV的检测灵敏度为10<supgt;‑17</supgt;M，SEOV的检测灵敏度为10<supgt;‑16</supgt;M。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种汉坦病毒htnv型和seov型的检测试剂盒，属于分子生物学。

技术介绍

1、汉坦病毒归属布尼亚病毒科，是一种有包膜分节段的负链rna病毒。汉坦病毒感染的主要临床表现为，在4日左右的发热、头痛等前驱期症状后，出现以非心源性肺水肿和高病死率（52.4~78.0%）为特征的急性呼吸衰竭，重症患者3~7日左右死亡，生存者则很快恢复，无后遗症。其发病机制主要是病毒的直接致病作用，肾脏是早期原发性损伤器官，病毒是肾损伤的直接因素。

2、汉坦病毒可分两种，一种是引起肾综合征出血热（hfrs）的汉滩病毒（htnv）、汉城病毒（seov）和普马拉病毒（puuv）等，另一种是引起汉坦病毒肺综合征（hps）的无名病毒（snv）、纽约病毒（nyv）、污黑小河沟病毒（bccnv）和牛轭湖病毒（bayv）等。其中，国内流行的汉坦病毒以htnv型和seov型为主，因此，对汉坦病毒，尤其是对htnv型和seov型汉坦病毒进行精准和快速的检测十分关键。

3、目前，汉坦病毒的检测方法主要集中于酶联免疫吸附试验（elisa）和免疫荧光试验（ifa）等的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种汉坦病毒HTNV型和SEOV型的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包括靶向HTNV特征序列的crRNA、靶向SEOV特征序列的crRNA、Cas12a蛋白和荧光标记探针；所述Cas12a蛋白能够和crRNA结合形成靶向HTNV特征序列或SEOV特征序列的二元复合物；所述荧光标记探针能够在Cas12a蛋白的反式切割活性下发生剪切，释放荧光信号；所述HTNV特征序列包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的HTNV靶向序列和/或核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示的HTNV靶向序列；所述SEOV特征序列包括核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的SEOV靶向序列、核苷酸序列如S...

【技术特征摘要】

1.一种汉坦病毒htnv型和seov型的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包括靶向htnv特征序列的crrna、靶向seov特征序列的crrna、cas12a蛋白和荧光标记探针；所述cas12a蛋白能够和crrna结合形成靶向htnv特征序列或seov特征序列的二元复合物；所述荧光标记探针能够在cas12a蛋白的反式切割活性下发生剪切，释放荧光信号；所述htnv特征序列包括核苷酸序列如seq id no.1所示的htnv靶向序列和/或核苷酸序列如seq idno.3所示的htnv靶向序列；所述seov特征序列包括核苷酸序列如seq id no.5所示的seov靶向序列、核苷酸序列如seq id no.6所示的seov靶向序列和/或核苷酸序列如seq idno.7所示的seov靶向序列；

2.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述htnv特征序列为核苷酸序列如seq id no.1所示的htnv靶向序列；所述seov特征序列为核苷酸序列如seq id no.6所示的seov靶向序列。

3.如权利要求1或2所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括靶向htnv的逆转录pcr引物组和靶向seov的逆转录pcr引物组。

4.如权利要求3所述的检测试剂盒，其特征在于，所述靶向htnv的逆转录pcr引物组包含核苷酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：弓莉，何昌生，黄黎珍，谭杰兴，向志光，李柏生，芜为，黄冬超，
申请(专利权)人：南方医科大学南方医院，
类型：发明
国别省市：