【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及能够激活启动子的碱基序列、和包含该启动子激活序列的表达载体、和包含该表达载体的哺乳动物细胞。进而本专利技术涉及以使用该哺乳动物细胞的表达为目的的蛋白质的有效的制造方法。
技术介绍
1、随着近年的生物技术的发达,利用了哺乳动物细胞的生物药品的制造技术、基因治疗的技术大幅进展。为了将这样的技术实用化,以表达为目的的基因(以下称为目的基因)稳定地高表达是非常重要的。
2、然而,在通过导入目的基因使其表达来生产外源性蛋白质时,已知由于通过甲基化等表观遗传学修饰、异染色质化等宿主染色体的结构变化发生,会发生所导入的目的基因钝化或受到表达抑制的基因沉默的现象。并且由于这样的现象,产生所导入的目的基因的表达调控变得困难这样的问题。
3、为了应对这样的问题,作为使目的基因表达时的启动子,使用在大量的组织、细胞中共同一定量表达而参与细胞功能的维持的持家基因的启动子序列。然而,即使使用持家基因的启动子序列也有时得不到目的基因的充分表达。因此,期望鉴定具有激活启动子的功能、能够实现导入了哺乳动物细胞的目的基因的稳定高表达
...【技术保护点】
1.启动子激活序列,包含:序列号1所示的碱基序列或与其具有85%以上的序列同一性的碱基序列中的、碱基数为850个以上的碱基序列。
2.包含权利要求1所述的启动子激活序列、启动子和目的DNA的表达载体。
3.权利要求2所述的表达载体,所述启动子是组成型表达启动子。
4.权利要求3所述的表达载体,所述组成型表达启动子从EF1α启动子、PGK启动子和UBC启动子中选择。
5.根据权利要求2~4的任一项所述的表达载体,在所述启动子的5’侧上游包含权利要求1所述的启动子激活序列。
6.根据权利要求2~5的任一项所述的表
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.启动子激活序列,包含:序列号1所示的碱基序列或与其具有85%以上的序列同一性的碱基序列中的、碱基数为850个以上的碱基序列。
2.包含权利要求1所述的启动子激活序列、启动子和目的dna的表达载体。
3.权利要求2所述的表达载体,所述启动子是组成型表达启动子。
4.权利要求3所述的表达载体,所述组成型表达启动子从ef1α启动子、pgk启动子和ubc启动子中选择。
5.根据权利要求2~4的任一项所述的表达载体,在所述启动子的5’侧上游包含权利要求1所述的启动子激活序列。
6.根据权利要求2~5的任一项所述的表达载体,是哺乳动物的人工染色体载体。
7.根据权利要求6所述的表达载体...
【专利技术属性】
技术研发人员:富冢一磨,宇野爱海,香月康宏,
申请(专利权)人:学校法人东京药科大学,
类型:发明
国别省市:
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