微管相关蛋白Tau（MAPT）iRNA药剂组合物和其使用方法技术

本公开涉及靶向微管相关蛋白tau(MAPT)基因的双链核糖核酸干扰(dsRNAi)药剂和组合物，以及抑制MAPT基因的表达的方法，以及使用此类dsRNAi药剂和组合物治疗患有MAPT相关疾病或病症，例如阿尔茨海默氏病、额颞叶痴呆、进行性核上性麻痹或其它tau蛋白病的受试者的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

技术介绍

1、微管相关蛋白tau(mapt)基因，编码作为微管相关蛋白家族的成员的微管相关蛋白tau(mapt)的蛋白质，定位于染色体区17q21.31(染色体17上的碱基对45,894,382至46,028,334)。mapt基因由16个外显子组成。在中枢神经系统(cns)内，替代性mrna剪接产生六种mapt同种型，总共352-441个氨基酸。在六种mapt同种型中的三种中，mapt的微管结合结构域含有三个重复区段，而在其它三种mapt同种型中，对应的结构域含有四个重复区段。

2、mapt转录物在全身，主要在中枢和外周神经系统中差异表达。野生型tau参与稳定神经元轴突中的微管，从而维持树状棘，并调节轴突运输、微管动力学和细胞分裂。在大约10％的患有原发性tau蛋白病的患者中发现了mapt的致病性变体。变体主要是错义突变，并且定位于外显子9-13(微管结合结构域)，其中许多变体影响外显子10的替代性剪接。

3、tau蛋白病是一类异质性的进行性神经退行性病症，其病理特征在于脑中存在tau聚集体。在表型上，tau蛋白病表现出运动、认本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于抑制MAPT的表达的双链核糖核酸(dsRNA)药剂，其中所述dsRNA药剂包括形成双链区的有义链和反义链，

2.根据权利要求1所述的dsRNA药剂，其中所述有义链包括与以下的核苷酸序列中的任一个核苷酸序列相差不超过三个核苷酸的至少15个连续核苷酸：SEQ ID NO：1的核苷酸506-526，507-527，508-528，509-529，510-530，511-531，512-532，513-533，514-534，515-535，516-536，517-537，518-538，519-539，520-540，521-541，522-542，523-543，52...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种用于抑制mapt的表达的双链核糖核酸(dsrna)药剂，其中所述dsrna药剂包括形成双链区的有义链和反义链，

2.根据权利要求1所述的dsrna药剂，其中所述有义链包括与以下的核苷酸序列中的任一个核苷酸序列相差不超过三个核苷酸的至少15个连续核苷酸：seq id no：1的核苷酸506-526，507-527，508-528，509-529，510-530，511-531，512-532，513-533，514-534，515-535，516-536，517-537，518-538，519-539，520-540，521-541，522-542，523-543，524-544，525-545，526-544，526-546，527-547，528-548，529-549，530-550，531-551，532-552，533-553，969-989，970-990，971-991，972-992，973-993，974-994，975-995，976-996，977-997，978-997，978-998，979-997，979-999，980-1000，981-1001，982-1002，983-1003，984-1004，985-1003，985-1005，986-1006，987-1007，988-1008，989-1009，990-1010，1069-1089，1070-1090，1071-1091，1072-1092，1073-1093，1074-1094，1075-1095，1076-1096，1077-1095，1077-1097，1078-1098，1079-1099，1080-1100，1081-1101，5511-5531，5512-5532，5513-5533，5514-5534，5515-5535，5516-5536，5517-5537，5518-5538，5519-5539，5520-5540，5521-5541，5522-5542和5523-5543，并且所述反义链包括来自seq id no：2的对应核苷酸序列的至少15个连续核苷酸。

3.根据权利要求1所述的dsrna药剂，其中所述有义链包括与以下的核苷酸序列中的任一个核苷酸序列相差不超过三个核苷酸的至少15个连续核苷酸：seq id no：3的核苷酸1072-1092、1067-1087或514-534，并且所述反义链包括来自seq id no：4的对应核苷酸序列的至少15个连续核苷酸。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的dsrna药剂，其中所述反义链包括与选自由以下组成的组的双链体的反义链核苷酸序列中的任一个反义链核苷酸序列相差不超过三个核苷酸的至少15个连续核苷酸：ad-1397070，ad-1397072，ad-1397073，ad-1397075，ad-1397081，ad-1397083，ad-1397088，ad-1397249，ad-1397252，ad-1397253，ad-1397258，ad-1397261，ad-1397262，ad-1397263，ad-1397291，ad-1397293，ad-1397294，ad-1397295，ad-1397298，ad-1397299，ad-1637732，ad-1637733，ad-1637734，ad-1637735，ad-1637736，ad-1637737，ad-1637739，ad-1637744，ad-1637745，ad-1637746，ad-1637747，ad-1637748，ad-1637749，ad-1637750，ad-1637751，ad-1637752，ad-1637753，ad-1637754，ad-1637755，ad-1637756，ad-1637757，ad-1637758，ad-1637759，ad-1637760，ad-1637761，ad-1637762，ad-1637763，ad-1637764，ad-1637765，ad-1637766，ad-1637767，ad-1637768，ad-1637769，ad-1637770，ad-1637771，ad-1637772，ad-1637773，ad-1637774，ad-1637775，ad-1637776，ad-1637777，ad-1637778，ad-1637779，ad-1637780，ad-1637781，ad-1637782，ad-1637783，ad-1637784，ad-1637785，ad-1637786，ad-1637787，ad-1637788，ad-1637789，ad-1637790，ad-1637791，ad-1637792，ad-1637793，ad-1637794，ad-1637795，ad-1637796，ad-1637797，ad-1637798，ad-1637799，ad-1637800，ad-1637801，ad-1637802，ad-1637803，ad-1637804，ad。1637805，ad-1637806，ad-1637807，ad-1637808，ad-1637809，ad-1637810，ad-1637811，ad-1637812，ad-1637813，ad-1637814，ad-1637815，ad-1637816，ad-1637817，ad-1637818，ad-1637819，ad-1637820，ad-1637821，ad-1637822，ad-1637823，ad-1637824，ad-1637825，ad-1637826，ad-1637827，ad-1637828，ad-1637829，ad-1637830，ad-1637831，ad-1637832，ad-1637833，ad-1637834，ad-1637835，ad-1637836，ad-1637837，ad-1637838，ad-1637839，ad-1637840，ad-1637841，ad-1637842，ad-1637843，ad-1637844，ad-1637845，ad-1637846，ad-1637847，ad-1637848，ad-1637849，ad-1637850，ad-1637851，ad-1637852，ad-1637853，ad-1637854，ad-1637855，ad-1637856，ad-1637857，ad-1637858，ad-1637859，ad-1637860，ad-1637861，ad-1637862，ad-1637863，ad-1637864，ad-1637865，ad-1637866，ad-1637867，ad-1637868，ad-1637869，ad-1637870，ad-1637871，ad-1637872，ad-1637873，ad-1637874，ad-1637875，ad-1637876，ad-1637877，ad-1637878，ad-1637879，ad-1637880，ad-1637881，ad-1637882，ad-1637883，ad-1637884，ad-1637885，ad-1637886，ad-1637887，ad-1637888，ad-1637889，ad-1637890，ad-1637891，ad-1637892，ad-1637893，ad-1637894，ad-1637895，ad-1637896，ad-1637897，ad-1637898，ad-1637899，ad-1637900，ad-1637901，ad-1637902，ad-1637903，ad-1637904，ad-1637905，ad-1637906，ad-1637907，ad-1637908，ad-1637909，ad-1637910，ad-1637911，ad-1637912，ad-1637913，ad-1637914，ad-1637915，ad-1637916，ad-1637917，ad-1637918，ad-1637919，ad-1637920，ad-1637921，ad-1637922，ad-1637923，ad-1637924，ad-1637925，ad-1637926，ad-1637927，ad-1637928，ad-1637929，ad-1637930，ad-1637931，ad-1637932，ad-1637933，ad-1637934，ad-1637935，ad-1637936，ad-1637937，ad-1637938，ad-1637939，ad-1637940，ad-1637941，ad-1637942，ad-1637943，ad-1637944，ad-1637945，ad-1637946，ad-1637947，ad-1637948，ad-1637949，ad-1637950，ad-1637951，ad-1637952，ad-1637953，ad-1637954，ad-1637955，ad-1637956，ad-1637957，ad-1637958，ad-1637959，ad-1637960，ad-397167，ad-523565，ad-1623140，ad-1637701，ad-1786708和ad-1786708v2。

5.根据权利要求4所述的dsrna药剂，其中所述双链体选自由以下组成的组：ad-1637922，ad-1637806，ad-1637762，ad-1637777，ad-1637779，ad-1397081，ad-1637793，ad-1637798，ad-1637807，ad-1637829，ad-1637831，ad-1637840，ad-1637841，ad-1637855，ad-1637883和ad-1637884。

6.根据权利要求4所述的dsrna药剂，其中所述双链体选自由以下组成的组：ad-1623140、ad-1637701和ad-1786708。

7.根据权利要求6所述的dsrna药剂，其中所述双链体是ad-1786708。

8.一种用于抑制mapt的表达的双链核糖核酸(dsrna)药剂，其中所述dsrna药剂包括形成双链区的有义链和反义链，

9.根据权利要求8所述的dsrna药剂，其中n是i、a、c、t或u。

10.根据权利要求8所述的dsrna药剂，其中所述反义序列是

11.根据权利要求8所述的dsrna药剂，其中所述反义序列是

12.根据权利要求8至11中任一项所述的dsrna药剂，其中所述互补区包括所述反义序列的至少18个、19个、20个或21个连续核苷酸。

13.根据权利要求8至11中任一项所述的dsrna药剂，其中所述互补区由所述反义序列组成。

14.根据权利要求8至11中任一项所述的dsrna药剂，其中所述互补区包括所述反义序列的从所述反义序列的5′端开始计数的至少1-17个、1-18个、1-19个、1-20个或1-21个核苷酸。

15.根据权利要求8至11中任一项所述的dsrna药剂，其中所述互补区包括所述反义序列的从所述反义序列的5′端开始计数的至少2-18个、2-19个、2-20个、2-21个或2-22个核苷酸。

16.根据权利要求1至15中任一项所述的dsrna药剂，其中所述有义链和所述反义链的所述核苷酸序列包括表3-6中的任一个表中的有义链核苷酸序列和反义链核苷酸序列中的任一个。

17.根据权利要求1至7中任一项所述的dsrna药剂，其中所述有义链的所述核苷酸序列包括对应于seq id no：992中所示的mapt基因外显子10有义链序列的至少15个连续核苷酸，并且反义链包括与其互补的序列。

18.根据权利要求1至17中任一项所述的dsrna药剂，其中所述有义链、所述反义链或所述有义链和所述反义链两者与一个或多个亲脂性部分缀合。

19.根据权利要求18所述的dsrna药剂，其中所述一个或多个亲脂性部分与至少一条链上的一个或多个内部位置缀合。

20.根据权利要求19所述的dsrna药剂，其中所述一个或多个亲脂性部分与所述dsrna药剂的所述双链区中的一个或多个内部位置缀合。

21.根据权利要求18至20中任一项所述的dsrna药剂，其中所述一个或多个亲脂性部分通过接头或载剂缀合。

22.根据权利要求18至21中任一项所述的dsrna药剂，其中所述一个或多个亲脂性部分的通过logkow测量的亲脂性超过0。

23.根据权利要求1至22中任一项所述的dsrna药剂，其中所述双链rna药剂的通过所述双链rna药剂的血浆蛋白结合测定中的未结合分数测量的疏水性超过0.2。

24.根据权利要求23所述的dsrna药剂，其中所述血浆蛋白结合测定是使用人血清白蛋白的电泳迁移率偏移测定。

25.根据权利要求1至24中任一项所述的dsrna药剂，其中所述dsrna药剂包括至少一个经修饰的核苷酸。

26.根据权利要求25所述的dsrna药剂，其中有义链核苷酸中的不超过五个有义链核苷酸和所述反义链的核苷酸中的不超过五个核苷酸是未经修饰的核苷酸。

27.根据权利要求25或26所述的dsrna药剂，其中所述有义链的所有核苷酸和所述反义链的所有核苷酸都是经修饰的核苷酸。

28.根据权利要求25至27中任一项所述的dsrna药剂，其中所述经修饰的核苷酸中的至少一个经修饰的核苷酸选自由以下组成的组：脱氧核苷酸、3′末端脱氧胸苷(dt)核苷酸、2′-o-甲基修饰的核苷酸、2′-氟修饰的核苷酸、2′-脱氧修饰的核苷酸、锁定核苷酸、解锁核苷酸、构象限制性核苷酸、约束乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2′-氨基修饰的核苷酸、2′-o-烯丙基修饰的核苷酸、2′-c-烷基修饰的核苷酸、2′-羟基修饰的核苷酸、2′-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2′-o-烷基修饰的核苷酸、吗啉代核苷酸、氨基磷酸酯、包括非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1，5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包括5′-硫代磷酸酯基的核苷酸、包括5′-甲基膦酸酯基的核苷酸、包括5′磷酸酯或5′磷酸酯模拟物的核苷酸、包括乙烯基膦酸酯的核苷酸、乙二醇核酸(gna)、乙二醇核酸s-异构体(s-gna)、2′-5′-连接的核糖核苷酸(“3′-rna”)、包括2-羟甲基-四氢呋喃-5-磷酸酯的核苷酸、包括2′-脱氧胸苷-3′磷酸酯的核苷酸、包括2′-脱氧鸟苷-3′-磷酸酯的核苷酸和与胆甾醇基衍生物和十二烷酸双癸酰胺基团连接的末端核苷酸；以及其组合。

29.根据权利要求28所述的dsrna药剂，其中所述经修饰的核苷酸选自由以下组成的组：2′-脱氧-2′-氟修饰的核苷酸、2′-脱氧修饰的核苷酸、3′末端脱氧胸苷核苷酸(dt)、锁定核苷酸、无碱基核苷酸、2′-氨基修饰的核苷酸、2′-烷基修饰的核苷酸、吗啉代核苷酸、氨基磷酸酯和包括非天然碱基的核苷酸。

30.根据权利要求28或29所述的dsrna药剂，其中所述经修饰的核苷酸包括3′末端脱氧胸苷核苷酸(dt)的短序列。

31.根据权利要求28所述的dsrna药剂，其中所述核苷酸上的所述修饰独立地选自由以下组成的组：2′-脱氧修饰、2′-o-甲基修饰、3′-rna修饰、gna修饰、s-gna修饰和2′-脱氧-2′-氟修饰。

32.根据权利要求1至31中任一项所述的dsrna药剂，其进一步包括至少一个硫代磷酸酯核苷酸间键。

33.根据权利要求32所述的dsrna药剂，其中所述dsrna药剂包括6-8个硫代磷酸酯核苷酸间键。

34.根据权利要求1至33中任一项所述的dsrna药剂，其中每条链的长度不超过30个核苷酸。

35.根据权利要求1至34中任一项所述的dsrna药剂，其中至少一条链包括至少1个核苷酸的3′突出端。

36.根据权利要求1至35中任一项所述的dsrna药剂，其中至少一条链包括至少2个核苷酸的3′突出端。

37.根据权利要求1至36中任一项所述的dsrna药剂，其中所述双链区的长度为15-30个核苷酸对。

38.根据权利要求37所述的dsrna药剂，其中所述双链区的长度为16-20个核苷酸对。

39.根据权利要求1至36中任一项所述的dsrna药剂，其中所述双链区的长度为10-18个核苷酸对。

40.根据权利要求39所述的dsrna药剂，其中所述双链区的长度为10-16个核苷酸对。

41.根据权利要求40所述的dsrna药剂，其中所述双链区的长度为12-14个核苷酸对。

42.根据权利要求40所述的dsrna药剂，其中所述双链区的长度为14-16个核苷酸对。

43.根据权利要求1至42中任一项所述的dsrna药剂，其中每条链具有12-23个核苷酸。

44.根据权利要求43所述的dsrna药剂，其中每条链具有12-16个核苷酸。

45.根据权利要求43所述的dsrna药剂，其中每条链具有14-16个核苷酸。

46.根据权利要求18至45中任一项所述的dsrna药剂，其中所述一个或多个亲脂性部分通过接头或载剂与至少一条链上的一个或多个内部位置缀合。

47.根据权利要求46所述的dsrna药剂，其中所述内部位置包含除了从所述至少一条链的每一端开始的末端两个位置以外的所有位置。

48.根据权利要求46所述的dsrna药剂，其中所述内部位置包含除了从所述至少一条链的每一端开始的末端三个位置以外的所有位置。

49.根据权利要求46至48中任一项所述的dsrna药剂，其中所述内部位置不包括所述有义链的切割位点区。

50.根据权利要求49所述的dsrna药剂，其中所述内部位置包含除了从所述有义链的5′端开始计数的位置9至12以外的所有位置。

51.根据权利要求49所述的dsrna药剂，其中所述内部位置包含除了从所述有义链的3′端开始计数的位置11至13以外的所有位置。

52.根据权利要求46至48中任一项所述的dsrna药剂，其中所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·E·法利，M·K·施莱格尔，J·D·麦金因克，J·祖贝，A·卡斯托雷诺，S·阿伯特，J·巴里，
申请(专利权)人：阿尔尼拉姆医药品有限公司，
类型：发明
国别省市：