突变体孔制造技术

本发明专利技术涉及胞溶素的突变形式。本发明专利技术还涉及使用胞溶素的所述突变形式进行分析物表征。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及胞溶素(lysenin)的突变形式。本专利技术还涉及使用胞溶素的所述突变形式进行分析物表征。

技术介绍

1、纳米孔感测是一种依赖于对分析物分子与受体之间的单独结合或相互作用事件的观察的感测方法。可以通过在绝缘膜中放置纳米尺寸的单孔和测量在存在分析物分子的情况下通过所述孔的电压驱动的离子转运来产生纳米孔传感器。分析物的同一性通过其独特的电流特征揭露，尤其是电流块的持续时间和程度以及电流电平的变化。这种纳米孔传感器是可商购的，例如，由牛津纳米孔科技有限公司(oxford nanopore technologiesltd)销售的miniontm装置，其包括集成在电子芯片内的纳米孔阵列。

2、当前在广泛的应用范围内需要快速且便宜的核酸(例如，dna或rna)测序技术。现有技术缓慢且昂贵，这主要是因为其依赖于扩增技术以产生大量核酸并且需要大量专业荧光化学品以进行信号检测。纳米孔感测有可能通过降低所需核苷酸和试剂的量来提供快速且便宜的核酸测序。

3、使用纳米孔感测对核酸进行测序的基本要素之一是控制核酸移动穿过孔。另一个要素是在核酸本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种表征靶分析物的方法，其包括：

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述孔存在于将腔室分成两个隔室的膜中，每个隔室含有水溶液。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤(a)包括：在一个隔室中提供所述分析物。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤(b)包括：跨所述膜施加电势差。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤(b)包括：测量跨所述膜的电流。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，所述靶分析物是聚合物、氨基酸、肽、多肽、蛋白质、核苷酸、寡核苷酸、多核苷酸。

7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述靶分...

【技术特征摘要】

1.一种表征靶分析物的方法，其包括：

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述孔存在于将腔室分成两个隔室的膜中，每个隔室含有水溶液。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤(a)包括：在一个隔室中提供所述分析物。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤(b)包括：跨所述膜施加电势差。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤(b)包括：测量跨所述膜的电流。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，所述靶分析物是聚合物、氨基酸、肽、多肽、蛋白质、核苷酸、寡核苷酸、多核苷酸。

7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述靶分析物是靶多核苷酸。

8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述靶多核苷酸的一个或多个特性选自：(i)所述靶多核苷酸的长度；(ii)所述靶多核苷酸的同一性；(iii)所述靶多核苷酸的序列；(iv)所述靶多核苷酸的二级结构；以及(v)所述靶多核苷酸是否被修饰。

9.根据权利要求7所述的方法，其中，通过甲基化、氧化、损坏，用一种或多种蛋白质或用一种或多种标记、标签或间隔子修饰靶多核苷酸。

10.根据权利要求7所述的方法，其中，通过电学测量和/或光学测量来测量所述靶多核苷酸的一个或多个特性。

11.根据权利要求10所述的方法，其中，所述电学测量是电流测量、阻抗测量、隧道测量或场效应晶体管(fet)测量。

12.根据权利要求7所述的方法，其中，步骤(a)包括：使所述靶多核苷酸与所述孔和多核苷酸结合蛋白接触，并且所述蛋白控制所述靶多核苷酸移动穿过所述孔。

13.根据权利要求7所述的方法，其中，表征所述靶多核苷酸包括：估计所述靶多核苷酸的序列或对其进行测序。

14.根据权利要求1所述的方法，其中，所述突变胞溶素单体还包括在位置t106处的修饰。

15.根据权利要求1所述的方法，其中，所述突变胞溶素单体还包括在位置e...

【专利技术属性】
技术研发人员：拉科马·贾亚辛格，马克·布鲁斯，卢克·麦克尼尔，拉米兹·伊克巴尔·纳撒尼，普拉提克·拉吉·辛格，尼尔·罗杰·伍德，斯蒂芬·罗伯特·杨，
申请(专利权)人：牛津纳米孔科技公开有限公司，
类型：发明
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