方法技术

技术编号:45346502 阅读:44 留言:0更新日期:2025-05-27 19:01
本文提供了在靶多肽相对于纳米孔移动时表征所述靶多肽的方法。还提供了用于执行此类方法的相关试剂盒、系统和设备。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本公开涉及通过形成包含包括靶多肽的第一链和第二链(如多核苷酸链)的构建体,在使得构建体的第一链和第二链移动穿过纳米孔的条件下相对于纳米孔移动构建体并且在这种移动期间进行多肽所特有的测量来表征靶多肽的方法。本公开还涉及用于执行此类方法的试剂盒、系统和设备。


技术介绍

1、生物分子的表征在生物医学和生物技术应用中越来越重要。例如,核酸的测序允许研究基因组和其编码的蛋白质,并且例如允许核酸突变与可观察到的现象(如疾病适应症)之间的相关性。核酸测序可以用于进化生物学来研究生物体之间的关系。宏基因组学涉及鉴定样品中存在的生物体,例如微生物组中的微生物,其中核酸测序允许鉴定此类生物体。虽然表征多核苷酸(例如,对多核苷酸进行测序)的技术已经得到广泛开发,但是表征多肽的技术还不太先进,尽管具有非常显著的生物技术重要性。例如,了解蛋白质序列可以允许建立构效关系,并且对用于开发特异性受体的配体的合理药物开发策略具有影响。翻译后修饰的鉴定也是了解许多蛋白质的功能性质的关键。例如,在真核生物中,通常有30-50%的蛋白质物种被磷酸化。一些蛋白质可能具有多个磷酸化位点,从而用来激活本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种表征靶多肽的方法,所述方法包含

2.根据权利要求1所述的方法,其中所述一个或多个多核苷酸侧翼链各自独立地与所述多核苷酸载体链的区互补。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法,其中所述一个或多个多核苷酸侧翼链各自独立地至少部分地与所述多核苷酸载体链杂交。

4.一种表征靶多肽的方法,所述方法包含

5.根据权利要求4所述的方法,其中在所述方法之前,所述多核苷酸侧翼链至少部分地与多核苷酸载体链杂交,由此形成多核苷酸-多肽构建体。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述多核苷酸-多肽缀合物链包含多个靶多肽。

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【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种表征靶多肽的方法,所述方法包含

2.根据权利要求1所述的方法,其中所述一个或多个多核苷酸侧翼链各自独立地与所述多核苷酸载体链的区互补。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法,其中所述一个或多个多核苷酸侧翼链各自独立地至少部分地与所述多核苷酸载体链杂交。

4.一种表征靶多肽的方法,所述方法包含

5.根据权利要求4所述的方法,其中在所述方法之前,所述多核苷酸侧翼链至少部分地与多核苷酸载体链杂交,由此形成多核苷酸-多肽构建体。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述多核苷酸-多肽缀合物链包含多个靶多肽。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中在所述方法期间,所述多肽或每个多肽独立地保持呈线性化形式。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述靶多肽或每个靶多肽的长度独立地为约5个肽单位至约1000个肽单位。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其包含机械地操纵所述构建体、所述多核苷酸-多肽缀合物链和/或所述多核苷酸载体链,由此相对于所述纳米孔移动所述构建体、所述多核苷酸-多肽缀合物链和/或所述多核苷酸载体链。

10.根据权利要求9所述的方法,其中所述构建体、所述多核苷酸-多肽缀合物链和/或所述多核苷酸载体链通过机械操纵在与跨所述纳米孔施加的电位相反的方向上移动。

11.根据权利要求10所述的方法,其中所述电位是跨所述纳米孔施加的电压电位。

12.根据权利要求1至3或5至11中任一项所述的方法,其包含使所述构建体与能够控制所述一个或多个多核苷酸侧翼链和/或所述多核苷酸载体链的移动的多核苷酸处理蛋白接触,并且其中所述多核苷酸处理蛋白控制所述构建体相对于所述纳米孔的移动。

13.根据权利要求12所述的方法,其包含使所述构建体的多核苷酸-多肽缀合物链和所述多核苷酸载体链两者与能够控制所述多核苷酸-多肽缀合物链和/或所述多核苷酸载体链的移动的多核苷酸处理蛋白接触,并且其中所述多核苷酸处理蛋白控制所述构建体相对于所述纳米孔的移动。

14.根据权利要求1至11中任一项所述的方法,其包含使所述多核苷酸-多肽缀合物链与能够控制所述多核苷酸-多肽缀合物链的移动的多核苷酸处理蛋白接触,并且其中所述多核苷酸处理蛋白控制所述构建体相对于所述纳米孔的移动。

15.根据权利要求1至3或5至11中任一项所述的方法,其包含使所述多核苷酸载体链与能够控制所述多核苷酸载体链的移动的多核苷酸处理蛋白接触,并且其中所述多核苷酸处理蛋白控制所述构建体相对于所述纳米孔的移动。

16.根据权利要求12至15中任一项所述的方法,其中:

17.根据权利要求6所述的方法,其中所述多核苷酸处理蛋白位于所述纳米孔的所述顺式侧上,并且所述多核苷酸处理蛋白控制所述多核苷酸载体链从所述纳米孔的所述顺式侧至所述纳米孔的所述反式侧的移动,由此控制所述靶多肽穿过所述纳米孔的移动。

18.根据权利要求16所述的方法,其中所述多核苷酸处理蛋白位于所述纳米孔的所述反式侧上,并且所述多核苷酸处理蛋白控制所述多核苷酸载体链从所述纳米孔的所述反式侧至所述纳米孔的所述顺式侧的移动,由此控制所述靶多肽穿过所述纳米孔的移动。<...

【专利技术属性】
技术研发人员:C·G·布朗J·E·格雷厄姆R·A·古铁雷斯J·S·萨巴瓦尔J·怀特
申请(专利权)人:牛津纳米孔科技公开有限公司
类型:发明
国别省市:

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