海南金钗石斛不同时期的蛋白指纹图谱建立及功能蛋白的鉴定方法技术

本发明专利技术涉及一种海南金钗石斛不同时期的蛋白指纹图谱建立及功能蛋白的鉴定方法，包括如下步骤：(1)将经预处理的石斛茎用BPP+酚抽提法提取蛋白；(2)用Bradford法进行蛋白定量；(3)蛋白质水化及第一向等电聚焦；(4)胶条平衡；(5)第二向SDS‑PAGE电泳；(6)凝胶染色和脱色；(7)凝胶扫描和图像分析；(8)蛋白质的胶内酶解及质谱鉴定。蛋白鉴定结果见表1、表3、图2、图3；主要功能蛋白分析结果见表2、表4。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物蛋白组学领域，具体涉及一种海南金钗石斛不同时期的蛋白指纹图谱建立及功能蛋白的鉴定方法。

技术介绍

1、作为中国传统药材，石斛在我国已经有超过两千年的药用历史(王治丹；代云飞；罗尚娟；李玉文；铁皮石斛化学成分及药理作用的研究进展[j].华西药学杂志,2022(04 vo37):472–476)，始载与《山海经》。石斛具有滋阴清热、生津益胃(杨柳；滕李濛；黄内力；景浩瑞；黄秋芳；鲍勇财；王美轩；余邦良；杨文；海南石斛与昌江石斛体外抗菌活性实验研究[j].热带农业科学,2018(08 vo 38):56–63)、润肺止咳等功效(he l,su q,bai l,等.recent research progress on natural small molecule bibenzyls and itsderivatives in dendrobium species[j].european journal of medicinal chemistry,2020,204:112530)。我国石斛属植物的品种非常多，共有74种、2个变种，目前石斛中发现本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种石斛茎蛋白指纹图谱的建立方法，其特征在于包括以下步骤：

2.权利要求1所述的方法，其特征在于石斛茎主要功能蛋白分析结果见表2、表4。

3.权利要求1-2任一项所述的方法，其特征在于步骤(1)所述预处理为将石斛茎清洗干净，切成小块，加入PVPP和二氧化硅，置于提前液氮预冷的研钵中，于研钵中倒入液氮，将其研磨成粉末状。

4.权利要求3所述的方法，其特征在于PVPP和二氧化硅的用量为每克石斛茎使用0.01gPVPP和0.01g二氧化硅。

5.权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于步骤(1)所述石斛茎选自2-3年和7-8年生长期的石斛的...

【技术特征摘要】

1.一种石斛茎蛋白指纹图谱的建立方法，其特征在于包括以下步骤：

2.权利要求1所述的方法，其特征在于石斛茎主要功能蛋白分析结果见表2、表4。

3.权利要求1-2任一项所述的方法，其特征在于步骤(1)所述预处理为将石斛茎清洗干净，切成小块，加入pvpp和二氧化硅，置于提前液氮预冷的研钵中，于研钵中倒入液氮，将其研磨成粉末状。

4.权利要求3所述的方法，其特征在于pvpp和二氧化硅的用量为每克石斛茎使用0.01gpvpp和0.01g...

【专利技术属性】
技术研发人员：何文英，陈婉慧，王帅，赵振东，陈光英，
申请(专利权)人：海南师范大学，
类型：发明
国别省市：