一种用于视网膜靶向与表达的AAV-8型血清型改造型的构建方法及应用技术

本发明专利技术属于基因工程和生物技术领域，涉及一种用于视网膜靶向与表达的AAV‑8型血清型的改造型，还涉及该改造型的构建及应用。在如SEQ ID NO.2所对应的AAV‑8型血清型衣壳蛋白的第590位氨基酸与第591位氨基酸之间插入如SEQ ID NO.3所示的10个氨基酸序列,其中第1、第2和第10位的氨基酸为保护氨基酸，第3至第9位氨基酸为筛选获得的氨基酸序列。本发明专利技术的改造型血清型感染后的荧光效果更强，能够明显且直观的观察，外源基因能够在靶向组织视网膜中进行高效的表达，在使用相同病毒量的情况下，比野生型血清型有更好的靶向组织表达以及更少非靶向组织表达。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程和生物，涉及一种用于视网膜靶向与表达的aav-8型血清型的改造型，还涉及该改造型的构建及应用。

技术介绍

1、aav是一种有dna缺陷的非致病性细小病毒，重组腺相关病毒载体(raav)源于非致病的野生型腺相关病毒，具有免疫原性弱、安全性好、宿主范围广、感染效率高且组织特异性强，是理想的基因表达载体，已经被fda批准用于临床实验。

2、目前aav病毒包装系统中使用aav病毒衣壳蛋白，较多使用的是传统的野生型的aav1、2、5、8和9型衣壳蛋白，并且具有不同的组织或细胞的特异性。这类天然野生型aav病毒衣壳，虽然能够将aav有效地靶向目的组织进行外源基因的表达，如aav1可以高效感染骨骼肌细胞，aav2能够感染视网膜细胞，aav8型可将外源基因高效传递至肝细胞，aav9具有跨血脑屏障的能力并将外源基因在中枢神经系统以及脑部表达等等。病毒的天然亲嗜性决定了靶向传递治疗的基础，另一方面也为我们改造这些病毒衣壳，使其具有更高的渗透能力，更持久的表达时间以及更低的免疫原性提供了平台。

3、鉴于aav已被广泛运用于各类疾病的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种多肽，其特征在于，在如SEQ ID NO.2所对应的蛋白的第590位氨基酸与第591位氨基酸之间插入由10个氨基酸构成的多肽，由10个氨基酸构成的多肽含有氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示所述的多肽。

2.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于，其第1-590位氨基酸序列如SEQ ID NO.2所对应的AAV-8型血清型衣壳蛋白的第1-590位氨基酸序列所示，第591-600位氨基酸中第593-599位氨基酸序列是权利要求1中序列如SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列，第601位及其之后的氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示的AAV-8型血清型衣壳蛋白的第591...

【技术特征摘要】

1.一种多肽，其特征在于，在如seq id no.2所对应的蛋白的第590位氨基酸与第591位氨基酸之间插入由10个氨基酸构成的多肽，由10个氨基酸构成的多肽含有氨基酸序列如seq id no.7所示所述的多肽。

2.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于，其第1-590位氨基酸序列如seq id no.2所对应的aav-8型血清型衣壳蛋白的第1-590位氨基酸序列所示，第591-600位氨基酸中第593-599位氨基酸序列是权利要求1中序列如seq id no.7所示的氨基酸序列，第601位及其之后的氨基酸序列为seq id no.2所示的aav-8型血清型衣壳蛋白的第591位及其之后的氨基酸序列。

3.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于，所述的由10个氨基酸构成的多肽，其氨基酸序列如seq id no.3所示。

4.一种核酸，其特征在于，所述核酸的序列是下列中的任意一种：

5.一种aav衣壳...

【专利技术属性】
技术研发人员：马璐，吴小江，顾莉萍，张仕卿，余虹，
申请(专利权)人：上海目镜生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：