重组表达载体、重组微生物及其在制备四氢嘧啶中的应用制造技术

技术编号:41879937 阅读:42 留言:0更新日期:2024-07-02 00:33
本申请公开了一种重组表达载体、重组微生物及其在制备四氢嘧啶中的应用,所述重组表达载体的外源核酸片段包括串联的第一核苷酸序列至第五核苷酸序列,第一核苷酸序列用于编码天冬氨酸激酶,第二核苷酸序列用于编码ectB蛋白,第三核苷酸序列用于编码ectA蛋白,第四核苷酸序列用于编码ectB蛋白,第五核苷酸序列用于编码ectC蛋白,将所述重组表达载体导入至受体微生物中能够获得高产四氢嘧啶的重组微生物,重组微生物在发酵培养过程中,ectB蛋白和天冬氨酸激酶过表达,从而提高四氢嘧啶的产量。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及生物工程,具体涉及一种重组表达载体、重组微生物及其在制备四氢嘧啶中的应用


技术介绍

1、四氢嘧啶又名依克多因(cas号为96702-03-3),其是一种存在于微生物中的氨基酸衍生物,能够作为渗透压调节物质以平衡细胞的渗透压,在高盐、高温、干燥和冷冻等多种极端环境下对蛋白质、核酸、细胞膜乃至整个细胞提供保护作用,从而增强微生物在多种极端环境下的耐受性能。四氢嘧啶的化学性质稳定,具有高度水溶性以及生理酸碱度范围内不携带电荷的特点,研究表明:四氢嘧啶是一种细胞全能防护剂,保湿性能理想,能够防止细胞老化、修复并使老化或受损的皮肤新生,从而在生物制剂、化妆品、护肤品、制药等领域具有广泛的应用前景。

2、由于四氢嘧啶分子中仅具有一个手性碳原子,所以很难用化学方法合成,现有的生产方法主要为微生物发酵合成法。传统的微生物发酵合成法主要是:利用不同浓度的盐培养液刺激模式菌株的渗透压,以使模式菌株瞬间对外释放出大量累积于细胞内的四氢嘧啶,再通过层层过滤、结晶等技术纯化获得四氢嘧啶,即“细菌挤奶(bacterial milking)”工艺,广泛应用于四氢本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体包括载体以及外源核酸片段,所述外源核酸片段包括串联的第一核苷酸序列、第二核苷酸序列、第三核苷酸序列、第四核苷酸序列和第五核苷酸序列,其中,所述第一核苷酸序列用于编码天冬氨酸激酶,所述第二核苷酸序列用于编码ectB蛋白,所述第三核苷酸序列用于编码ectA蛋白,所述第四核苷酸序列用于编码ectB蛋白,所述第五核苷酸序列用于编码ectC蛋白。

2.根据权利要求1所述的重组表达载体,其特征在于,所述第一核苷酸序列、所述第二核苷酸序列、所述第三核苷酸序列、所述第四核苷酸序列和所述第五核苷酸序列依次串联;

3.根据权利要求1所...

【技术特征摘要】

1.一种重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体包括载体以及外源核酸片段,所述外源核酸片段包括串联的第一核苷酸序列、第二核苷酸序列、第三核苷酸序列、第四核苷酸序列和第五核苷酸序列,其中,所述第一核苷酸序列用于编码天冬氨酸激酶,所述第二核苷酸序列用于编码ectb蛋白,所述第三核苷酸序列用于编码ecta蛋白,所述第四核苷酸序列用于编码ectb蛋白,所述第五核苷酸序列用于编码ectc蛋白。

2.根据权利要求1所述的重组表达载体,其特征在于,所述第一核苷酸序列、所述第二核苷酸序列、所述第三核苷酸序列、所述第四核苷酸序列和所述第五核苷酸序列依次串联;

3.根据权利要求1所述的重组表达载体,其特征在于,所述第一核苷酸序列如seq idno.1所示,或者所述第一核苷酸序列为与seq id no.1所示的核苷酸序列具有至少80%相似性的核苷酸序列;

4.根据权利要求1所述的重组表达载体,其特征在于,所述外源核酸片段的核苷酸序列如seq idno.5所示,或者所述外源核酸片段的核苷酸序列...

【专利技术属性】
技术研发人员:陆姝欢李翔宇付娟刘洋余超
申请(专利权)人:嘉必优生物技术武汉股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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