11-氧-β-香树脂醇氧化酶CYP72A63突变体、基因及应用制造技术

本发明专利技术提供一种11‑氧‑β‑香树脂醇氧化酶CYP72A63突变体、基因及应用。本发明专利技术第一方面提供一种11‑氧‑β‑香树脂醇氧化酶CYP72A63突变体，所述突变体具有CYP72A63所不具有的11‑氧‑β‑香树脂醇C29的连续氧化和C29氧化的基础上选择性迭代氧化C24的活性；所述11‑氧‑β‑香树脂醇氧化酶CYP72A63的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明专利技术提供的11‑氧‑β‑香树脂醇氧化酶CYP72A63突变体可实现异甘草次酸与24‑羟基异甘草次酸的异源合成。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及11-氧-β-香树脂醇氧化酶cyp72a63突变体、基因及应用，涉及生物工程。

技术介绍

1、甘草为多年生草本植物，是一种常用中药材。三萜类化合物是甘草中一类重要组成成分，是以6分子异戊二烯为单位的聚合体，具有生理活性强及药用价值高的特点。目前已经报道的甘草三萜类化合物的生产方式主要为植物提取法。由于三萜类化合物在甘草中积累量较低且仅在根部积累，因此需要大量采挖甘草根茎，对固沙固土植被造成严重的破坏，使生态环境急剧恶化；并且提取过程使用大量的酸与碱，步骤繁琐、提取效率低、成本高和有机试剂使用量大，不利于绿色可持续发展。人工种植的甘草需要经过三年甚至更长时间的栽培才能获得适合工业生产的甘草酸含量，但稀有三萜类化合物的含量仍然很低以至于难以提取。此外，甘草种植除需要占用大量耕地外，还面临不可控的气候因素的威胁。这些因素都严重限制了甘草次酸及其它稀有三萜类化合物的生产。仅仅依靠甘草根提取已远远不能满足医药、保健和食品等领域对甘草次酸及其衍生物的需求。因此，寻求获取甘草三萜类化合物的新方法，替代与弥补当前甘草资源紧缺的现状，实现可持续发展具有非常重要本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种11-氧-β-香树脂醇氧化酶CYP72A63突变体，其特征在于，所述突变体具有CYP72A63所不具有的11-氧-β-香树脂醇C29的连续氧化和C29氧化的基础上选择性迭代氧化C24的活性；

2.根据权利要求1所述的突变体，其特征在于，所述突变体是将所述11-氧-β-香树脂醇氧化酶CYP72A63的第149位氨基酸由亮氨酸突变为苏氨酸，第398位氨基酸由亮氨酸突变为缬氨酸，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

3.根据权利要求1所述的突变体，其特征在于，所述突变体是将所述11-氧-β-香树脂醇氧化酶CYP72A63的第149位氨基酸由亮氨酸...

【技术特征摘要】

1.一种11-氧-β-香树脂醇氧化酶cyp72a63突变体，其特征在于，所述突变体具有cyp72a63所不具有的11-氧-β-香树脂醇c29的连续氧化和c29氧化的基础上选择性迭代氧化c24的活性；

2.根据权利要求1所述的突变体，其特征在于，所述突变体是将所述11-氧-β-香树脂醇氧化酶cyp72a63的第149位氨基酸由亮氨酸突变为苏氨酸，第398位氨基酸由亮氨酸突变为缬氨酸，所述突变体的氨基酸序列如seq id no:2所示。

3.根据权利要求1所述的突变体，其特征在于，所述突变体是将所述11-氧-β-香树脂醇氧化酶cyp72a63的第149位氨基酸由亮氨酸突变为异亮氨酸，第398位氨基酸由亮氨酸突变为缬氨酸，所述突变体的氨基酸序列如seq id no:3所示。

4.根据权利要求1所述的突变体，其特征在于，所述突变体是将所述11-氧-β-香树脂醇氧化酶cyp72a63的第149位氨基酸由亮氨酸突变为异亮氨酸，第338位氨基酸由苏氨酸突变为丝氨酸，第398...

【专利技术属性】
技术研发人员：李春，孙文涛，秦磊，
申请(专利权)人：清华大学，
类型：发明
国别省市：