一种提高AAV病毒产量的方法技术

技术编号:41864558 阅读:92 留言:0更新日期:2024-06-27 18:36
本公开涉及细胞工程领域,尤其涉及一种提高AAV病毒产量方法。该方法包括:在具体化合物或化合物组合的存在下培养细胞的步骤。本公开的方法能够显著提高AAV病毒的产量和包装效率。

【技术实现步骤摘要】

本公开属于细胞工程领域,尤其涉及提高病毒产量的化合物。更具体地说,本专利技术涉及提高aav病毒产量的化合物和使用所述化合物的方法。


技术介绍

1、aav载体是目前应用最为广泛的基因治疗载体。aav基因治疗载体目前生产通常使用转染的方式,通过转染试剂将含有目的基因片段、aav rep-cap基因及辅助病毒腺病毒基因的各质粒转染进入真核细胞内。

2、pkr信号通路是细胞免疫的重要通路之一,质粒瞬转病毒包装过程中转录生成的dsrna片段会激活pkr的磷酸化,p-pkr进而激活下游转录因子eif2a的磷酸化,降低蛋白水平的表达,影响病毒载体的产量。有文献报道,在慢病毒包装过程中添加pkr磷酸化抑制剂2-氨基嘌呤(2-ap)可提升慢病毒包装滴度(pernod g, fish r, liu jw, kruithof ek.biotechniques. 2004 apr;36(4):576-580.)。此外,在aav病毒包装中使用的辅助质粒通常含有腺病毒va rna片段,va rna可以结合pkr的rna结合域,竞争性抑制pkr信号通路的磷酸化(nayak 本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.式(I)化合物、其盐、其立体化学异构体形式、或包含以上任一种的组合物在提高细胞中病毒产量的用途,

2.根据权利要求1所述的用途,其中,所述组合物中进一步含有组蛋白去乙酰化酶抑制剂。

3.根据权利要求2所述的用途,其中,所述组蛋白去乙酰化酶抑制剂为丙酸盐、丁酸盐、丙戊酸盐中的一种或多种。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的用途,其中,所述病毒选自AAV病毒。

5.根据权利要求1-3中任一项所述的用途,其中,所述细胞为贴壁或悬浮培养的HEK293或由HEK293进行基因编辑、改造、驯化、筛选得到的细胞株。

6.一种用于提高细胞...

【技术特征摘要】

1.式(i)化合物、其盐、其立体化学异构体形式、或包含以上任一种的组合物在提高细胞中病毒产量的用途,

2.根据权利要求1所述的用途,其中,所述组合物中进一步含有组蛋白去乙酰化酶抑制剂。

3.根据权利要求2所述的用途,其中,所述组蛋白去乙酰化酶抑制剂为丙酸盐、丁酸盐、丙戊酸盐中的一种或多种。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的用途,其中,所述病毒选自aav病毒。

5.根据权利要求1-3中任一项所述的用途,其中,所述细胞为贴壁或悬浮培养的hek293或由hek293进行基因编辑、改造、驯化、筛选得到的细胞株。

6.一种用于提高细胞中病毒产量的试剂盒,其特...

【专利技术属性】
技术研发人员:林卿陈意雄蒋天祺
申请(专利权)人:上海凌医生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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