【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本文尤其提供了用于在液体培养基中培养细胞的改进方法。
技术介绍
1、在被接种到基于益生菌的产品(如食品、动物饲料或膳食补充剂)中之前，将微生物在液体培养基中培养以提供含有大量微生物的悬浮液。然后通常使用离心、过滤、蒸馏、沉降或絮凝来浓缩这种悬浮液。此浓缩步骤之后通常是冷冻或冷冻-干燥或干燥或储存微生物浓缩物为冷冻产品，以保存和/或储存微生物。
2、生产此类基于益生菌的产品的限制步骤是能够在液体培养物中生产的微生物的数量和生存力。因此，且考虑到对此类产品不断增长的需求，仍然需要提高用于在液体培养物中生产含微生物悬浮液的方法的效率，以获得生物活性损失有限以及在生产和随后的加工和储存过程中活微生物损失有限的高度浓缩的微生物悬浮液。这些方法需要在任何规模下但尤其是在工业规模下都是可行的，在工业规模下，大量的悬浮液被浓缩。
3、本文公开的主题解决了这个需求，并且还提供了另外的益处。
技术实现思路
1、本文尤其提供了用于改善在液体培养基中培养的细胞生长的方法。这些方法需要在包含...
【技术保护点】
1.一种用于改善在液体培养基中培养的细胞生长的方法，所述方法包括在包含一种或多种水解至少一种核苷三磷酸的酶的培养基中培养所述细胞，其中与在不包含一种或多种水解至少一种核苷三磷酸的酶的培养基中培养的细胞相比，所述细胞表现出改善的生长。
2.如权利要求1所述的方法，其中改善的生长包括以下中的一种或多种：更大的光密度(OD)、更高的菌落形成单位(cfu)/mL、减少的细胞裂解、更高的增殖速率、增加的细胞质量、更高的细胞数量或更高的培养后生存力。
3.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述核苷三磷酸包含ATP、GTP、CTP、TTP和/或UTP中
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种用于改善在液体培养基中培养的细胞生长的方法，所述方法包括在包含一种或多种水解至少一种核苷三磷酸的酶的培养基中培养所述细胞，其中与在不包含一种或多种水解至少一种核苷三磷酸的酶的培养基中培养的细胞相比，所述细胞表现出改善的生长。
2.如权利要求1所述的方法，其中改善的生长包括以下中的一种或多种：更大的光密度(od)、更高的菌落形成单位(cfu)/ml、减少的细胞裂解、更高的增殖速率、增加的细胞质量、更高的细胞数量或更高的培养后生存力。
3.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述核苷三磷酸包含atp、gtp、ctp、ttp和/或utp中的一种或多种。
4.如权利要求3所述的方法，其中所述核苷三磷酸包含atp。
5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述酶是一种或多种磷酸酶。
6.如权利要求5所述的方法，其中所述磷酸酶是酸性磷酸酶、碱性磷酸酶或腺三磷双磷酸酶中的一种或多种。
7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述培养的细胞是细菌、真菌、古细菌、植物、昆虫或哺乳动物细胞。
8.如权利要求7所述的方法，其中所述细胞是重组细胞。
9.如权利要求7或权利要求8所述的方法，其中所述细菌细胞是革兰氏阳性或革兰氏阴性的。
10.如权利要求9所述的方法，其中所述细菌细胞是需氧菌或厌氧菌。
11.如权利要求8-10中任一项所述的方法，其中所述细菌细胞是益生菌。
12.如权利要求7或权利要求8所述的方法，其中所述真菌细胞是丝状真菌细胞。
13.如权利要求7或权利要求8所述的方法，其中所述真菌细胞是酵母细胞。
14.如权利要求7或权利要求8所述的方法，其中所述哺乳动物细胞是原代细胞、中国仓鼠卵巢(cho)细胞或人胚肾(hek)细胞。
15.如权利要求8-14中任一项所述的方法，其中所述重组细胞产生酶。
16.如权利要求8-14中任一项所述的方法，其中所述重组细胞产生抗体。
17.如权利要求14-16中任一项所述的方法，其中所述原代细胞是干细胞或免疫细胞。
18.如权利要求17所述的方法，其中所述免疫细胞选自由以下组成的组：自然杀伤(nk)细胞、淋巴细胞、白细胞和单核细胞。
19.如权利要求1-18中任一项所述的方法，其中将所述一种或多种水解至少一种核苷三磷酸的酶外源性添加到所述培养基中。
20.如权利要求1-19中任一项所述的方法，其中所述一种或多种水解至少一种核苷三磷酸的酶不是由细胞在所述液体培养基中重组或天然产生的。
21.如权利要求1-20中任一项所述的方法，其中所述一种或多种水解至少一种核苷三磷酸的酶包括与seq id no:1、2、3、4、5和/或6的氨基酸序列至少约60％同一的一种或多种酶。
22.一种用于培养供受试者食用的益生菌的方法，所述方法包括在包含一种或多种水解至少一种核苷三磷酸的酶的液体培养基中培养益生菌细胞，其中与在不包含一种或多种水解至少一种核苷三磷酸的酶的培养基中培养的益生菌细胞相比，所述益生菌细胞表现出改善的生长。
23.如权利要求22所述的方法，其中改善的生长包括以下中的一种或多种：更大的光密度(od)、更高的菌落形成单位(cfu)/ml、减少的细胞裂解、更高的增殖速率、增加的细胞质量、更高的细胞数量或更高的培养后生存力。
24.如权利要求22或权利要求23所述的方法，其中所述核苷三磷酸包含atp、gtp、ctp、ttp和/或utp中的一种或多种。
25.如权利要求24所述的方法，其中所述核苷三磷酸包含atp。
26.如权利要求22-25中任一项所述的方法，其中所述酶是一种或多种磷酸酶。
27.如权利要求26所述的方法，其中所述磷酸酶是酸性磷酸酶、碱性磷酸酶或腺三磷双磷酸酶中的一种或多种。
28.如权利要求22-27中任一项所述的方法，其中所述益生菌细胞是细菌或真菌细胞。
29.如权利要求28所述的方法，其中所述细胞是重组细胞。
30.如权利要求28或权利要求29所述的方法，其中所述细菌细胞是革兰氏阳性或革兰氏阴性的。
31.如权利要求30所述的方法，其中所述细菌细胞是需氧菌或厌氧菌。
32.如权利要求28或权利要求29所述的方法，其中所述真菌细胞是酵母细胞。
33.如权利要求29-32中任一项所述的方法，其中所述重组细胞产生酶。
34.如权利要求33-33中任一项所述的方法，所述方法进一步包括收获所述益生菌细胞。
35.如权利要求22-34中任一项所述的方法，所述方法进一步包括冷冻干燥或冻干所述益生菌细胞。
36.如权利要求22-35中任一项所述的方法，其中所述受试者是人、伴侣动物或家畜。
37.如权利要求36所述的方法，其中所述家畜是家禽、猪或反刍动物。
38.如权利要求36或权利要求37所述的方法，所述方法进一步包括将所述益生菌细胞配制成适用于肠内施用的剂型。
39.如权利要求36或权利要求37所述的方法，所述方法进一步包括将所述益生菌细胞与动物饲料组合。
40.如权利要求36或权利要求37所述的方法，所述方法进一步包括经由水管向所述受试者施用所述益生菌细胞。
41.如权利要求22-40中任一项所述的方法，其中将所述一种或多种水解至少一种核苷三磷酸的酶外源性添加到所述培养基中。
42.如权利要求22-41中任一项所述的方法，其中所述一种或多种水解至少一种核苷三磷酸的酶不是由所述益生菌细胞在所述液体培养基中重组或天然产生的。
43.如权利要求22-42中任一项所述的方法，其中所述一种或多种水解至少一种核苷三磷酸的酶包括与seq id no:1、2、3、4、5和/或6的氨基酸序列至少约60％同一的一种或多种酶。
44.一种用于生产在发酵乳制品的生产中使用的细菌细胞的方法，所述方法包括在包含一种或多种水解至少一种核苷三磷酸的酶的液体培养基中培养所述细菌细胞，其中与在不包含一种或多种水解至少一种核苷三磷酸的酶的培养基中培养的细菌细胞相比，所述细菌细胞表现出改善的生长。
45.如权利要求44所述的方法，其中改善的生长包括以下中的一种或多种：更大的光密度(od)、更高的菌落形成单位(cfu)/ml、减少的细胞裂解、更高的增殖速率、增加的细胞质量、更高的细胞数量或更高的培养后生存力。
46.如权利要求44或权利要求45所述的方法，其中所述核苷三磷酸包含atp、gtp、ctp、ttp和/或utp中的一种或多种。
47.如权利要求4464所述的方法，其中所述核苷三磷酸包含atp。
48.如权利要求44-47中任一项所述的方法，其中所述酶是一种或多种磷酸酶。
49.如权利要求48所述的方法，其中所述磷酸酶是酸性磷酸酶、碱性磷酸酶或腺三磷双磷酸酶中的一种或多种。
50.如权利要求45-49中任一项所述的方法，其中所述细菌细胞是革兰氏阳性或革兰氏阴性的。
51.如权利要求50所述的方法，其中所述细菌细胞是嗜热的。
52.如权利要求50或权利要求51所述的方法，其中所述细菌细胞选自由乳酸杆菌属(lactobacillusspp.)、链球菌属(streptococcus spp.)和乳球菌属(lactococcusspp)...
【专利技术属性】
技术研发人员：R·库马尔，H·凯恩，C·布迪诺夫，
申请(专利权)人：国际营养与健康丹麦私人有限公司，
类型：发明
国别省市：
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