黄颡鱼SUMO化修饰体系及其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种黄颡鱼SUMO化修饰体系及其构建方法和在锌吸收转运中的应用。本发明专利技术首次构建了黄颡鱼SUMO化修饰体系所需的融合蛋白表达质粒，能够根据实验需求在目标细胞中单独或联合稳定表达黄颡鱼SUMO化修饰中各个关键蛋白，并优化了细胞SUMO化修饰裂解缓冲液，维持了原有的蛋白质之间相互作用，显著提高了SUMO化修饰相关蛋白的丰度和SUMO化修饰水平的检测灵敏度，实现了黄颡鱼体外SUMO化修饰的高效鉴定和研究，有利于大规模的筛选研究黄颡鱼SUMO化修饰靶蛋白和SUMO化抑制剂及激活剂，同时也为提高鱼类对锌的利用能力、降低饲料成本和保障鱼类生长性能具有重大意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及鱼类生物，涉及蛋白质的翻译后修饰，具体涉及一种黄颡鱼sumo化修饰体系及其构建方法和应用。

技术介绍

1、锌在鱼类体内扮演着关键的角色，分布于生物体各个组织中，在鱼类的生长、骨骼发育、免疫系统、内分泌平衡以及核酸与蛋白质的合成等多个生理活动中都起着至关重要的作用，是其不可或缺的微量元素之一。在鱼类养殖中，锌的合理供应具有重要意义。锌缺乏会引发多种症状，如食欲不振、蛋白质和碳水化合物的消化率降低、生长受抑制、dna损伤以及氧化应激、机体抵抗能力下降、死亡率上升等。然而，过量的锌积累也是有害的，可导致神经和免疫功能受损，最终导致溶血性贫血。饲料中锌含量的不足或过剩都会直接影响鱼类的生长和饲料利用效率。此外，需要注意的是锌是一种重金属元素，其过量排放不仅可能对水体生态系统产生负面影响，还对环境污染构成潜在威胁。因此，深入研究锌的供应和代谢并为水产养殖和饲料生产提供科学有据的精准营养数据，有利于鱼类的健康以及养殖业和饲料行业的生态良好可持续性发展。

2、不论是海水鱼还是淡水鱼，它们都能够从环境中通过鳃和胃肠道系统吸收锌。饲料被认为是鱼类获本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种黄颡鱼SUMO化修饰体系，其特征在于：所述修饰体系以真核表达质粒载体pcDNA3.1(+)为模板，在Hind III和Xho I两个酶切位点之间插入有融合蛋白基因；所述融合蛋白基因为携带标签蛋白基因的SUMO化修饰相关蛋白基因。

2.根据权利要求1所述的黄颡鱼SUMO化修饰体系，其特征在于：所述SUMO化修饰相关蛋白基因为sumo1、sumo2、sumo3、sae1、uba2、ubc9、pias1、zip8中的任意一种；所述标签蛋白基因为表达以下任意一种标签蛋白的碱基序列：His标签、Flag标签、Myc标签、HA标签、EGFP标签。

3.一种权利要求1所...

【技术特征摘要】

1.一种黄颡鱼sumo化修饰体系，其特征在于：所述修饰体系以真核表达质粒载体pcdna3.1(+)为模板，在hind iii和xho i两个酶切位点之间插入有融合蛋白基因；所述融合蛋白基因为携带标签蛋白基因的sumo化修饰相关蛋白基因。

2.根据权利要求1所述的黄颡鱼sumo化修饰体系，其特征在于：所述sumo化修饰相关蛋白基因为sumo1、sumo2、sumo3、sae1、uba2、ubc9、pias1、zip8中的任意一种；所述标签蛋白基因为表达以下任意一种标签蛋白的碱基序列：his标签、flag标签、myc标签、ha标签、egfp标签。

3.一种权利要求1所述黄颡鱼sumo化修饰体系的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于：

5.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗智，刘涛，谭肖英，宋长春，段芙萱，余岸艮，宋玉峰，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：