一种黄酮4’-O-甲基转移酶OsOMT突变体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种黄酮4’‑O‑甲基转移酶OsOMT突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明专利技术提供的4’‑O‑甲基转移酶能催化黄酮类化合物4’位羟基甲基化。通过多位点突变改造，其催化效率得到显著提升。本发明专利技术以催化解脂耶氏酵母底盘中8‑异戊二烯山柰酚转化为淫羊藿素为例，经过72h发酵，改造后的酶能使淫羊藿素的产量从出发菌的2.79mg/L增加到45.07mg/L，提高了约15.15倍，是目前报道的淫羊藿素最高产量。本发明专利技术提供的酶及其改造策略能极大地提高催化黄酮类化合物4’位羟基甲基化的能力，为黄酮4’‑O‑甲基化产物的高效生物合成奠定了基础，具有重大的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程，特别是涉及一种黄酮4’-o-甲基转移酶osomt突变体及其应用。

技术介绍

1、淫羊藿是一种具有多种医药保健功能的传统中草药，其中包括抗肿瘤、缓解糖尿病并发症、抗衰老、抗抑郁等作用。由于其广泛的医疗应用和市场需求，对淫羊藿及其活性成分的提取和合成方法的研究具有重要的意义。目前，淫羊藿素等植物天然产物的获取主要依赖于植物提取法。然而，这种方法受到植物生长周期和季节变化的限制，且提取效率相对较低，无法满足大规模生产和应用的需求。因此，寻找一种高效、环保的合成方法成为当前的研究重点。微生物法合成植物天然产物作为一种新兴的技术手段，具有不受季节影响、能耗低、污染少等优点，被认为是具有潜力的替代方案。通过基因工程技术改造微生物，使其能够合成特定的植物天然产物，是实现这一目标的有效途径。在淫羊藿素的合成中，4′位羟基的甲基化修饰是从山奈酚出发合成淫羊藿素的关键步骤之一。然而，目前缺乏能够高效专一地进行山奈酚4′位羟基甲基化反应的酶。因此，挖掘具有该生物学功能的氧甲基转移酶，并利用其实现淫羊藿素的高效合成，具有重要的科学意义和实际应用价值。...

【技术保护点】

1.一种黄酮4’-O-甲基转移酶OsOMT突变体，其特征在于，所述OsOMT突变体包括对SEQID NO：1所示序列的第79位、第144位、第158位、第163位、第197位和第221位进行多位点突变得到。

2.如权利要求1所述的黄酮4’-O-甲基转移酶OsOMT突变体，其特征在于，所述OsOMT突变体包括：

3.如权利要求1或2所述的黄酮4’-O-甲基转移酶OsOMT突变体的编码基因。

4.包含权利要求3所述的编码基因的重组载体。

5.包含权利要求4所述的重组载体的重组工程菌，其特征在于，所述重组工程菌的出发菌株为酵母菌。

6...

【技术特征摘要】

1.一种黄酮4’-o-甲基转移酶osomt突变体，其特征在于，所述osomt突变体包括对seqid no：1所示序列的第79位、第144位、第158位、第163位、第197位和第221位进行多位点突变得到。

2.如权利要求1所述的黄酮4’-o-甲基转移酶osomt突变体，其特征在于，所述osomt突变体包括：

3.如权利要求1或2所述的黄酮4’-o-甲基转移酶osomt突变体的编码基因。

4.包含权利要求3所述的编码基因的重组载体。

5.包含权利要求4所述的重组载体的重组工程菌，其特征在于，所述重组工程菌的出发菌株为酵母菌。

6.一种制备黄酮4’-o-甲基转移酶osomt突...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶邦策，刘卫兵，巩家宏，孙文卓，魏文平，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：