Ang-2及其基因在制药中的应用制造技术

本发明专利技术涉及Ａｎｇ－２的用途，尤其涉及在制药领域中的应用。本发明专利技术技术方案如下：Ａｎｇ－２及其基因在制备治疗或预防体内外炎性淋巴管生长疾病药物中的应用。Ａｎｇ－２及其基因在制备治疗或预防机体淋巴管及周围组织炎症疾病药物中的应用。该发明专利技术的优点表现在：对Ａｎｇ－２及其基因发掘了新的医疗用途，开拓了一个新的应用领域。

The application of Ang-2 and its gene in pharmaceutical industry

The present invention relates to the use of Ang2, used especially in the pharmaceutical field. The technical proposal of the invention is as follows: the application of Ang 2 and its gene in preparing medicine for curing or preventing inflammatory lymphatic vessel disease in vivo and in vitro. Ang2 and its gene in preparation for treating or preventing drug use of body lymphatic and surrounding tissue in inflammation. The invention has the advantages of Ang2 gene discovery and a new medical application, and develops a new application field.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及Ang-2的用途，尤其涉及在制药领域中的应用。
技术介绍
淋巴管的新生或再生是一种常见的病理改变，见于多种疾病，如慢性 淋巴水肿，组织创伤，器官移植及胂瘤生长和转移。由于淋巴管的再生机 理至今不明，目前对于病理性淋巴管生长相关的病症几乎没有治疗和控制 手段。因此，阐明淋巴管的生长机理是临床须待解决的难题。血管生成素Angiopoietins (Ang-1和Ang-2)/Tie2是新近发现的生 长因子家族，它与VEGFs/VEGFRs家族共同调节血管的发育和再生。Tie2 受体分布在内皮细胞表面。Ang-l和Ang-2与Tie2受体酪氨酸激酶结合。 Ang-1是Tie2的激动剂， 一般情况下Ang-2是Tie2的阻抗剂，但是在某 些情况下(如VEGFs存在时)Ang2启动血管再生，也参与新生血管的再 塑形(remodel ing )。过去IO年来有关炎性血管生长的研究有大量的报道，包括炎症诱导 血管生长的机理和可能的抑制手段。新近发现Ang-2在炎症的发生中起 关键的催生作用，Ang-2增加血管内细胞(Blood Endothelial Cells, BECs) 对炎性因子的敏感性。与血管相邻的淋巴管的生长与炎症的关系却没有受3到应有的关注，Ang-2在其中的作用更是空白。实际上淋巴系统参与了炎 症发生发展的全过程，包括炎症的启动，水肺的消退，白细胞的游走等。 从这个意义上说，炎症需要淋巴管生长。那些有淋巴管新生或再生等病理 改变的疾病，如慢性淋巴水肿，组织创伤以及肿瘤等都伴有不同程度的炎 症。临床上淋巴管扩张型淋巴水肿肢体多伴有频发的组织感染，病程发展 快,致残类高。炎症通过何种机制诱导或激发淋巴管生长还不清楚。
技术实现思路
本专利技术的目的在于(1) 提供Ang-2在制备治疗或预防体内外炎性淋巴管生长疾病药 物中的应用。(2) 提供Ang-2基因在制备治疗或预防体内外炎性淋巴管生长疾 病药物中的应用。(3) 提供Ang-2在制备治疗或预防机体淋巴管及周围组织炎症疾 病药物中的应用。(4) 提供Ang-2基因在制备治疗或预防机体淋巴管及周围组织炎 症疾病药物中的应用。本专利技术的目的是通过以下技术方法来实现的对慢性肢体淋巴水肺组 织作相关基因的检测，发现在淋巴管增生型病变组织中Ang-2的mRNA异 常增高，原位杂交显示Ang-2转录子在扩张淋巴管管腔表面大量表达。但 是Ang-l的表达则与正常组织无差异。Ang-2对病变组织中淋巴管的增生起作用，引发或促进了淋巴管的增生和扩张。用人皮肤毛细淋巴管内皮细胞(LECs )和淋巴管缺损动物模型进行实 验,发现Ang-2单独作用时对LEC的增殖和体内淋巴管的生长并没有直接 促进作用。Ang-2对淋巴管生长的影响是间接的，或者还有其他因素介入。淋巴管扩张性病变与Ang-2的表达增高和组织中的炎症之间可能存 在关联，并用实验进行验证。结果如下细胞增殖实验我们先单用炎性 因子处理人皮肤LECs和BECs，结果BECs的显著增殖，LECs的生长却受 到明显抑制。随之我们将Ang-2重组蛋白与炎性因子共同加入处理液，得 到结果LECs的增殖不仅未受抑制，反而显著提高，而BECs的增长却受 到抑制。以VEGF-C为对照的结果显示，VEGF-C单独使用时对LEC和BEC 的增殖均有明显的促进，但是VEGF-C与炎性因子联合使用则没有增殖作 用。细胞迁移试验Ang2单独作用时对LECs迁移其没有直接促进作用. 在炎性因子(TNFoc )介导下Ang2能够促进LECs的迁移，VEGF-C对LECs 和BECs有明显的促进迁移作用，而Ang2对其没有直接促进迁移作用。在 炎性因子(TNFa )介导下Ang2促进LECs毛细管的形成的数量和速度。 体内研究发现在炎性因子存在时，Ang2基因能促i^j部淋巴管生长，数 目增多并扩张。关于Ang-2及其基因在制药中的应用技术方案如下 Ang-2在制备治疗或预防体内外炎性淋巴管生长疾病药物中的应 用。所述的疾病是淋巴水肿或肿瘤淋巴道转移或器官移植后的排斥性疾 病。Ang-2基因在制备治疗或预防体内外炎性淋巴管生长疾病药物中的应 用。所述的疾病是淋巴水肺或肺瘤淋巴道转移或器官移植后的排斥性疾病。Ang-2在制备治疗或预防机体淋巴管及周围组织炎症疾病药物中的应 用。所述的疾病是淋巴循环障碍相关的感染或细菌，霉菌和其它微生物引 发的淋巴系统及周围组织炎症疾病。Ang-2基因在制备治疗或预防机体淋 巴管及周围组织炎症疾病药物中的应用。所述的疾病是淋巴循环障碍相关 的感染或细菌，霉菌和其它微生物引发的淋巴系统及周围组织炎症疾病。 本专利技术所公开Ang-2及其基因在制药中的应用，其优点表现在(1) 本专利技术对Ang-2发掘了新的医疗用途，开拓了一个新的应用领域。(2) 本专利技术首次提出淋巴管生长不是单一因素决定，是多种因子综 合作用的结果，VEGF-C, Ang-l和Ang-2都参与其中，但作用不同。首次 证实Ang-2与其它的生长因子(特别是VEFD-C)不同，它不是淋巴管内 皮细胞增殖和淋巴管生长的直接作用因子，而是间接的作用因子。首次证 实Ang-2能激发或扭转LECs对炎性因子的反应，改变炎性因子 对LEC的抑制作用，转而促其增殖。提出和验证了 Ang-2是病理性炎性淋 巴管生长的关4定调节因子这一新论断。(3) 本专利技术中淋巴管生长是常见的病理表现，与多种重大疑难疾病， 如淋巴水肿，肿瘤淋巴道转移，器官移植等密切相关，因此探明和调控淋 巴管的生长对于治疗淋巴循环障碍疾病，减少肺瘤死亡率，降低器官移植 的排斥等重大医学课题均有不可估量的影响。Ang-2作为病理性淋巴生长 的重要调控因子在淋巴管生长相关疾病的发生和发展中起关键的调节作 用。根据此理论，用任何手段(抗体，拮抗剂，短链RM，多肽制剂等) 降低或抑制Ang-2的表ii/人而达到减轻或控制由淋巴循环障碍相关的感6染或细菌，霉菌和其它微生物引发的淋巴系统及周围组织炎症；控制和调 节与炎症相关的淋巴管生长，如淋巴水肿，肿瘤淋巴道转移，器官移植后 的排斥；治疗淋巴管缺损性病变，促进淋巴管生长，减轻或消除淋巴性水 肺。因此，其社会效益和经济效益是巨大的。附图说明图1显示RT-PCR检测淋巴管扩张型肢体淋巴水胂皮肤病理组织和 正常人皮肤组织中Ang2和VEGF-C的表达。淋巴管扩张型肢体淋巴水胂 皮肤病理组织中Ang2和VEGF-C的表达较正常人皮肤组织明显增高，统计 学检验有显著差异(* p<0. 05 )。图2显示Western Blot检测人皮肤组织中Ang2和VEGF-C蛋白的 表达。淋巴管扩张型病人的病变皮肤组织表达Ang2和VEGF-C较正常人下 肢皮肤组织明显增高。1, 2:淋巴管扩张型病人的病变皮肤组织；3, 4: 正常人下肢皮肤组织。图3显示细胞增殖实验(MTT)显示不同的因子对LECs的增殖具 有不同的作用。其中FGF、 VEGFs和PDGFbb具有显著的促LECs增殖作用， 而缺氧条件和Ang2对LECs没有促增殖作用。图4显示小鼠尾部慢性阻塞性淋巴水肺模型手术方法建立。图5显示转基因治疗鼠尾淋巴水肿后质粒注射部位皮肤组织免疫 组化结果。各个实验小鼠尾部的本文档来自技高网...

【技术保护点】
Ａｎｇ－２在制备治疗或预防体内外炎性淋巴管生长疾病药物中的应用。

【技术特征摘要】
1、Ang-2在制备治疗或预防体内外炎性淋巴管生长疾病药物中的应用。2、 根据权利要求1所述的应用，所述的疾病是淋巴水肿或胂瘤淋巴道 转移或器官移植后的排斥性疾病。3 、 Ang-2基因在制备治疗或预防体内外炎性淋巴管生长疾病药物中的应用。4、 根据权利要求3所述的应用，所述的疾病是淋巴水肺或肿瘤淋巴道 转移或器官移植后的排斥性疾病。5、 Ang-2在制备治疗或预防机...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘宁飞，胡学庆，蒋朝华，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属第九人民医院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]