System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种化学发光微阵列芯片的应用制造技术_技高网

一种化学发光微阵列芯片的应用制造技术

技术编号:41626972 阅读:15 留言:0更新日期:2024-06-13 02:26
本申请涉及一种化学发光微阵列芯片在制备用于同时检测多个心肌损伤标志物的试剂盒中的应用,化学发光阵列微阵列芯片包括固相支持物。利用化学发光阵列微芯片的均相检测方法可有效消除均相检测中的基质效应,提高了检测的灵敏度和准确性,且反应速度快,检测时间短,可应用到多种生物分子的测定,包括酶活性、受体配体反应、低亲和力的反应、第二信使水平、DNA、RNA、蛋白质、多肽、碳水化合物。同时该方法可同时检测多个待检分子,具有快速、高效、低成本等优点。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及化学发光分析,尤其涉及一种化学发光微阵列芯片在制备用于同时检测多个心肌损伤标志物的试剂盒中的应用。


技术介绍

1、心血管疾病包括心脏和血管系统疾病。由心血管疾病引起的死亡人数约占世界总死亡人数的1/4,被称为人类健康的“头号杀手”,严重威胁人类的生命和生活质量,造成巨大的人力和经济资源的浪费。

2、目前对心血管疾病的诊断和预测主要是利用化学发光免疫分析对心肌损伤的多个标志物进行检测。化学发光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,clia)是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析。根据测定过程中是否要将待测物质与反应体系分离,免疫分析可以分为非均相免疫分析和均相免疫分析;非均相免疫分析,是指在引入探针进行标记的操作过程中,各种相关试剂混合反应后需要进行分离,将待测物与反应体系分离后再进行检测,是现在免疫分析中的主流方向,如:酶促化学发光分析、磁微球化学发光免疫分析。均相免疫分析是指在测定过程中将待测物与反应体系中的相关试剂混合反应后直接测定,例如:光激化学发光分析、电化学发光分析。

3、利用均相免疫分析对心肌损伤标志物的检测虽然省去了分离洗涤步骤,但是血清或血浆中的一些物质却会干扰标记信号检测或干扰化学发光反应。同时,在均相标记免疫分析技术中涉及化学发光的领域,有的涉及氧化还原反应,如血液标本中含有一些氧化-还原药物(如维生素c)同样干扰光信号的产生过程,严重影响检测结果的准确性。另外,目前均相免疫分析的每次反应仅能针对一个指标进行检测,费时费力。


技术实现思路

1、

2、为解决或部分解决相关技术中存在的问题,本申请提供一种化学发光微阵列芯片在制备用于同时检测多个心肌损伤标志物的试剂盒中的应用,利用化学发光阵列微芯片的均相检测方法可同时检测多个心肌损伤标志物,反应速度快、检测时间短,且有效消除均相免疫检测中的基质效应,提高了检测的准确性。

3、为此,本申请第一方面提供了一种化学发光微阵列芯片在制备用于同时检测多个心肌损伤标志物的试剂盒中的应用,所述化学发光阵列微阵列芯片包括固相支持物,同时检测多个心肌损伤标志物的方法包括以下步骤:

4、步骤s1,将包含化学发光配对微球中的第一微球及疑似包含待测目标分子的待测物的液相反应物与固相支持物表面接触反应,其中所述固相支持物表面设置有化学发光配对微球中对应的第二微球;

5、步骤s2,利用能量或活性化合物激发化学发光配对微球中的一种微球生成活性氧,化学发光配对微球中的另一种微球与其接触到的活性氧反应产生化学发光信号;

6、步骤s3,检测步骤s2中所述化学发光信号的强度,分析待测物中是否存在待测目标分子和/或待测目标分子的浓度;

7、所述待测目标分子包括多个心肌损伤标志物。

8、在本申请的一些实施方式中,所述第二微球为供体微球。

9、在本申请的另一些实施方式中,所述第一微球为受体微球。

10、在本申请的一些实施方式中,所述固相支持物选自玻璃芯片、石英芯片、塑料芯片、高分子聚合物芯片、高分子微球、磁性微球、微孔板、nc膜和pdvf膜。

11、在本申请的一些优选的实施方式中,所述第二微球呈阵列式分布于固相支持物表面的不同区域。

12、在本申请的一些具体实施方式中,所述第二微球与磁性微球连接,所述磁性微球通过磁场固定在固相支持物的表面。

13、在本申请的另一些具体实施方式中,所述第二微球通过其表面修饰的分子与固相支持物表面修饰的化学基团的化学键作用固定在固相支持物的表面;优选地,所述化学键选自离子键、共价键、金属键和配位键;进一步优选为共价键。

14、在本申请的一些具体实施方式中,所述第二微球通过其表面修饰的分子与固相支持物表面修饰的分子之间的分子间作用力固定在固相支持物的表面;优选地,所述分子间的作用力选自氢键、范德华力、离子键、疏水作用力、芳环堆积作用和卤键;进一步优选为氢键。

15、在本申请的一些实施方式中,所述固相支持物表面阵列分布4-200个反应孔。

16、在本申请的另一些实施方式中,所述固相支持物表面阵列分布4-200个微孔,每个微孔中设置至少1个反应孔。

17、在本申请的一些实施方式中,所述反应孔的直径小于第二微球的粒径。

18、在本申请的一些具体实施方式中,所述第二微球凹陷在所述反应孔中。

19、在本申请的一些实施方式中,所述第一微球和/或第二微球表面包被有葡聚糖,所述葡聚糖表面修饰有化学基团,所述化学基团选自醛基、羧基、巯基、氨基和羟基。

20、在本申请的另一些实施方式中,所述固相支持物表面还设置有一个定位基准点。

21、在本申请的一些实施方式中,所述第二微球表面直接或间接连接有第一特异结合物,所述第一特异性结合物为能够与待测目标分子特异性结合的抗体ⅰ。

22、在本申请的另一些实施方式中,在步骤s1之前,首先将固相支持物与第一特异结合物接触反应,通过特异性配对物的相互作用将第一特异结合物连接至所述第二微球的表面。

23、在本申请的一些具体实施方式中,所述步骤s1包括以下步骤:

24、步骤s1-101,将疑似包含待测目标分子的待测物的液相反应物与固相支持物接触反应;

25、步骤s1-102,再将第二特异结合物与固相支持物表面接触反应;

26、步骤s1-103,最后将第一微球与固相支持物表面接触反应;

27、其中,所述第二特异结合物为能够与待测目标分子特异性结合的抗体ⅱ,且第二特异结合物能够与第一微球通过特异性配对物连接。

28、在本申请的另一些具体实施方式中,所述步骤s1包括以下步骤:

29、步骤s1-201,将包含第二特异结合物以及疑似含有待测目标分子的待测物的液相反应物与固相支持物表面接触反应;

30、步骤s1-202,再将第一微球与固相支持物表面接触反应;

31、其中,所述第二特异结合物为能够与待测目标分子特异性结合的抗体ⅱ,且第二特异结合物能够与第一微球通过特异性配对物连接。

32、在本申请的一些具体实施方式中,所述步骤s1包括以下步骤:

33、步骤s1-301,将疑似包含待测目标分子的待测物的液相反应物与固相支持物接触反应;

34、步骤s1-302,再将连接有第二特异结合物的第一微球与固相支持物表面接触反应;

35、其中,所述第二特异结合物与第一微球之间通过特异性配对物相连接,且所述第二特异结合物为能够与待测目标分子特异性结合的抗体ⅱ。

36、在本申请的另一些具体实施方式中,所述步骤s1包括以下步骤:

37、步骤s1-401,将疑似包含待测目标分子的待测物的液相反应物与固相支持物接触反应;

38、步骤s1-402,再将第二特异结合物与第一微球的混本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种化学发光免疫检测芯片作为制备用于诊断患者心血管疾病的化学发光免疫检测试剂盒中的用途,所述化学发光免疫检测芯片包括表面阵列设置有化学发光配对微球中任一微球的固相支持物;所述化学发光配对微球中的任一微球能够在能量或者活性化合物的激发下生成活性氧,所述活性氧能够与其接触到的所述化学发光配对微球中的另一种微球反应产生化学发光信号,用成像技术显示检测结果;其中,所述化学发光配对微球中的一种微球为供体微球,所述供体微球为填充有光敏剂的高分子微球;所述化学发光配对微球中的另一种微球为受体微球,所述受体微球包含发光组合物和基质,所述发光组合物填充于基质中和/或包被于基质表面;所述固相支持物表面阵列分布有反应孔,每个所述反应孔的直径小于所述供体微球的粒径,同时设置一个定位基准点;所述供体微球以合适的流速流经芯片表面的反应孔中,以凹陷在芯片表面的反应孔中,包含待测目标分子的待测物的液相反应物流过芯片的表面,以流动方式与反应孔中的供体微球接触反应,所述受体微球流经芯片的表面,以流动方式与固相支持物表面接触反应,检测信号值与待测物的浓度成线性关系;

2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述化学发光免疫检测试剂盒通过包含下列步骤的方法来诊断患者的心血管疾病:

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述第二微球表面直接或间接连接有第一特异结合物,所述第一特异性结合物为能够与待测目标分子特异性结合的抗体Ⅰ。

4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,在步骤S1之前,首先将固相支持物与第一特异结合物接触反应,通过特异性配对物的相互作用将第一特异结合物连接至所述第二微球的表面。

5.根据权利要求2~4中任意一项所述的应用,其特征在于,所述步骤S1包括以下步骤:

6.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述固相支持物表面阵列分布4-200个反应孔。

7.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述固相支持物表面阵列分布4-200个微孔,每个微孔中设置至少1个反应孔。

8.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述固相支持物表面还设置有一个定位基准点。

9.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述发光组合物能够与活性氧反应产生可检测的化学发光信号,其包含化学发光化合物和金属螯合物。

10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述化学发光化合物选自烯烃化合物,优选选自二甲基噻吩、双丁二酮化合物、二氧杂环己烯、烯醇醚、烯胺、9-亚烷基苍耳烷、9-亚烷基-N-9,10二氢化吖啶、芳基乙醚烯、芳基咪唑和光泽精以及它们的衍生物,更优选选自二甲基噻吩及其衍生物;和/或,所述金属螯合物的金属为稀土金属或VIII族金属,优选选自铕、铽、镝、钐、锇和钌,更优选选自铕。

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【技术特征摘要】

1.一种化学发光免疫检测芯片作为制备用于诊断患者心血管疾病的化学发光免疫检测试剂盒中的用途,所述化学发光免疫检测芯片包括表面阵列设置有化学发光配对微球中任一微球的固相支持物;所述化学发光配对微球中的任一微球能够在能量或者活性化合物的激发下生成活性氧,所述活性氧能够与其接触到的所述化学发光配对微球中的另一种微球反应产生化学发光信号,用成像技术显示检测结果;其中,所述化学发光配对微球中的一种微球为供体微球,所述供体微球为填充有光敏剂的高分子微球;所述化学发光配对微球中的另一种微球为受体微球,所述受体微球包含发光组合物和基质,所述发光组合物填充于基质中和/或包被于基质表面;所述固相支持物表面阵列分布有反应孔,每个所述反应孔的直径小于所述供体微球的粒径,同时设置一个定位基准点;所述供体微球以合适的流速流经芯片表面的反应孔中,以凹陷在芯片表面的反应孔中,包含待测目标分子的待测物的液相反应物流过芯片的表面,以流动方式与反应孔中的供体微球接触反应,所述受体微球流经芯片的表面,以流动方式与固相支持物表面接触反应,检测信号值与待测物的浓度成线性关系;

2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述化学发光免疫检测试剂盒通过包含下列步骤的方法来诊断患者的心血管疾病:

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述第二微球表面直接或间接连接有第一特异结合物,所述第一特异性...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘宇卉杨阳李临
申请(专利权)人:上海索昕生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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