一种用于均相化学发光分析的供体颗粒及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种用于均相化学发光分析的供体颗粒及其应用，所述供体颗粒能够在激发状态下生成活性氧，其特征在于，所述供体颗粒包括第一载体，所述第一载体的内部填充有敏化剂，所述第一载体的表面没有包被或连接有多糖物质，其直接化学键合特异性结合配对成员中的一员；所述供体颗粒在供体试剂中的粒径分布变异系数C.V值为5％～40％。该供体颗粒产生活性氧的效率高，且能够在供体试剂中稳定存在。当将包括上述供体试剂的试剂盒应用于均相化学发光分析检测时，既有超高的灵敏度，又具有很宽的检测量程。宽的检测量程。

【技术实现步骤摘要】
一种用于均相化学发光分析的供体颗粒及其应用


[0001]本专利技术属于化学发光分析领域，具体涉及一种用于均相化学发光分析的供体颗粒及其应用。

技术介绍

[0002]免疫分析经过半个多世纪的发展，已经发展出了很多种类。根据测定过程中是否要将待测物质与反应体系分离可以分为非均相(Heterogenous)免疫分析和均相(Homogeneous)免疫分析。非均相免疫分析，是指引入探针进行标记的操作过程中，各种相关试剂混合反应后需要进行分离，将待测物与反应体系分离后再进行检测，是现在免疫分析中的主流方法。如广为人们熟知的酶联免疫吸附法(ELISA法)和磁微粒化学发光法等。均相免疫分析则是指在测定过程中将待测物与反应体系中的相关试剂混合反应后直接测定，而没有多余的分离或清洗的步骤。截止目前，多种灵敏的检测方法被应用于均相免疫分析，比如光学检测方法、电化学检测方法等。
[0003]例如，光激化学发光检测(Light Initiated Chemiluminescent Assay，LiCA)就是一种典型的均相免疫分析方法。它是基于两种微球表面包被的抗原或抗体，在液相中形成免疫复合物而将两种微球拉近。在激光的激发下，发生微球之间的单线态氧的转移，进而产生高能级的红光，通过单光子计数器和数学拟合将光子数换算为靶分子浓度。而当样本不含靶分子时，两种微球间无法形成免疫复合物，两种微球的间距超出单线态氧传播范围，单线态氧在液相中迅速淬灭，检测时则无高能级红光信号产生。它具有快速、均相(免冲洗)、高灵敏和操作简单的特点。光激化学发光技术已经在很多检测项目上得到应用。
[0004]光激化学发光检测以“双球”为基本特征，“双球”指系统由“发光微球”和“感光微球”组成，且两种微球的在液相中有很好悬浮特性。微球在液相中和抗原或抗体相遇完全符合液态动力学特征。感光微球产生单线态氧的效率及时间、感光微球本身的稳定性、感光微球的生产成本、感光微球使用的便捷性均影响光激化学发光产品最终的检测结果。
[0005]随着检测行业的进步，对超敏试剂的需求越来越多，不但对灵敏度要求极高，而且检测量程又要求非常宽，现有的均相化学发光检测方法就很难满足上述检测条件。因此，亟需开发一种既能满足灵敏度要求、又能满足线性范围要求的用于均相化学发光分析的试剂盒。

技术实现思路

[0006]本专利技术所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种用于均相化学发光分析的供体颗粒，该供体颗粒产生活性氧的效率高，且能够在供体试剂中稳定存在。当将包括上述供体试剂的试剂盒应用于均相化学发光分析检测时，既有超高的灵敏度，又具有很宽的检测量程。
[0007]为此，本专利技术第一方面提供了一种用于均相化学发光检测的供体颗粒，所述供体颗粒能够在激发状态下生成活性氧，其特征在于，所述供体颗粒包括第一载体，所述第一载
体的内部填充有敏化剂，所述第一载体的表面化学键合特异性结合配对成员中的一员。
[0008]在本专利技术的一些实施方式中，所述第一载体的表面没有包被或连接有多糖物质，其直接化学键合特异性结合配对成员中的一员。
[0009]在本专利技术的一些实施方式中，所述第一载体的表面带有键合官能团，所述键合官能团用于将特异性结合配对成员中的一员化学键合在所述第一载体的表面。
[0010]在本专利技术的另一些实施方式中，所述键合官能团选自胺基、酰胺基、羟基、醛基、羧基、马来酰亚胺基和巯基；优选选自醛基和/或羧基。
[0011]在本专利技术的一些实施方式中，所述第一载体表面的键合官能团的含量为100～500nmol/mg，优选为200～400nmol/mg。
[0012]在本专利技术的另一些实施方式中，所述第一载体的表面包被至少两个连续多糖层的涂层，其中第一多糖层与第二多糖层自发关联。
[0013]在本专利技术的一些实施方式中，所述连续多糖层中的每一层自发地与前一多糖层中的每一层相关联。
[0014]在本专利技术的另一些实施方式中，所述多糖具有侧基官能团，所述连续多糖层的所述官能团与所述前一多糖层的所述官能团所带电荷相反。
[0015]在本专利技术的一些实施方式中，所述多糖具有侧基官能团，并且所述连续多糖层通过所述官能团与所述前一多糖层的所述官能团之间的反应与所述前一多糖层共价连接。
[0016]在本专利技术的另一些实施方式中，所述连续多糖层的所述官能团在胺官能团和胺反应性官能团之间交替。
[0017]在本专利技术的一些实施方式中，所述胺反应性官能团是醛基或羧基。
[0018]在本专利技术的另一些实施方式中，所述第一多糖层自发地与所述第一载体相关联。
[0019]在本专利技术的一些实施方式中，所述涂层的最外一层多糖层具有至少一个侧基官能团。
[0020]在本专利技术的另一些实施方式中，所述涂层的最外一层多糖层的侧基官能团选自醛基、羧基、巯基、氨基、羟基和马来胺基中的至少一种；优选选自醛基和/或羧基。
[0021]在本专利技术的一些实施方式中，所述涂层的最外一层多糖层的侧基官能团直接地或间接地化学键合特异性结合配对成员中的一员结合。
[0022]在本专利技术的一些具体实施方式中，所述多糖选自含有三个或更多个未修饰或修饰的单糖单元的碳水化合物；优选选自葡聚糖、淀粉、糖原、菊粉、果聚糖、甘露聚糖、琼脂糖、半乳聚糖、羧基葡聚糖和氨基葡聚糖；更优选选自葡聚糖、淀粉、糖原和聚核糖。
[0023]在本专利技术的一些实施方式中，所述第一载体的粒径选自100～400nm，优选为150～350nm，更优选为180～220nm。
[0024]在本专利技术的另一些实施方式中，所述第一载体为磁性或非磁性的，优选为非磁性的。
[0025]在本专利技术的一些实施方式中，所述第一载体的形状选自带、片、棒、管、孔、微滴定板、珠子、粒子和微球；优选为微球。
[0026]在本专利技术的另一些实施方式中，所述第一载体的材质选自天然的、人工合成的或改性天然存在的聚合物；优选为人工合成的聚合物。
[0027]在本专利技术的一些具体实施方式中，所述第一载体的材质选自琼脂糖、纤维素、硝化
纤维素、醋酸纤维素、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚乙烯、聚丙烯、聚(4
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甲基丁烯)、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、尼龙、聚丁酸乙烯或聚丙烯酸酯；优选选自聚苯乙烯、聚丙烯、聚(4
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甲基丁烯)、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯或聚丙烯酸酯。
[0028]在本专利技术的一些实施方式中，所述第一载体为聚苯乙烯乳胶微球。
[0029]在本专利技术的另一些实施方式中，所述敏化剂是光活化的光敏剂和/或化学活化的引发剂，优选为光活化的光敏剂。
[0030]在本专利技术的一些实施方式中，所述敏化剂选自亚甲基蓝、玫瑰红、卟啉、酞菁和叶绿素。
[0031]在本专利技术的另一些实施方式中，所述特异性结合配对成员选自抗体、抗体片段、配体、寡核苷酸、寡核苷酸结合蛋白、凝集素、半抗原、抗原、免疫球蛋白结合蛋白、抗生物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于均相化学发光分析的供体颗粒，所述供体颗粒能够在激发状态下生成活性氧，其特征在于，所述供体颗粒包括第一载体，所述第一载体的内部填充有敏化剂，所述第一载体的表面没有包被或连接有多糖物质，其直接化学键合特异性结合配对成员中的一员；所述供体颗粒在供体试剂中的粒径分布变异系数C.V值为5％～40％。2.根据权利要求1所述的供体颗粒，其特征在于，所述第一载体的表面带有键合官能团，所述键合官能团用于将特异性结合配对成员中的一员化学键合在所述第一载体的表面，其中，所述键合官能团选自胺基、酰胺基、羟基、醛基、羧基、马来酰亚胺基和巯基；优选选自醛基和/或羧基。3.根据权利要求1或2所述的供体颗粒，其特征在于，所述第一载体表面的键合官能团的含量为100～500nmol/mg，优选为200～400nmol/mg。4.根据权利要求1～3中任意一项所述的供体颗粒，其特征在于，所述供体颗粒在所述供体试剂中的粒径分布变异系数C.V值为5％～20％；优选地，C.V值为8％～20％；和/或所述第一载体的粒径选自100～400nm，优选为150～350nm，更优选为180～220nm。5.根据权利要求1～4中任意一项所述的供体颗粒，其特征在于，所述第一载体的材质选自琼脂糖、纤维素、硝化纤维素、醋酸纤维素、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚乙烯、聚丙烯、聚(4
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甲基丁烯)、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、尼龙、聚丁酸乙烯或聚丙烯酸酯；优选选自聚苯乙烯、聚丙烯、聚(4
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甲基丁烯)、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯或聚丙烯酸酯；优选第一载体为聚苯乙烯乳胶微球。6.一种用于均相化学发光分析的供体试剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：康蔡俊，吴晨，刘宇卉，李临，
申请(专利权)人：上海索昕生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：