【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本公开总体涉及3d细胞培养技术。更具体地，本公开涉及用于用细胞快速浸润3d支架的方法。
技术介绍
1、3d细胞培养通常涉及使用3d支架培养细胞。3d细胞培养在诸如制药、医疗器械、化妆品和食品行业的许多不同行业具有各种用途。
2、关于食品行业，3d细胞培养可用于生产通常被称为“实验室生长的”或“培养的”肉制品的那些食品。常规地，使用与生产用于组织工程化应用的培养的生物材料支架所使用的那些相同的标准工艺来生产用于肉制品的3d细胞培养物。然而，此类工艺不太适合用于食品工业并且存在许多缺点。例如，用于将干细胞增殖到肌肉或脂肪组织中的细胞培养基含有胎牛血清(fbs)。而且，为了持续的细胞增殖，必须每天对细胞培养基进行更新。因此，此类工艺消耗了大量的fbs，其生产成本很高，并且存在伦理问题。
3、此外，除了每天更新含有fbs的细胞培养基外，为了持续的细胞增殖，必须每两周将支架移入新板中，持续长达十二周。因此，用于使用3d支架生产肉制品的常规工艺是非常劳动密集型的，这也可以增加所产生的培养的肉制品的成本。
4、此外...
【技术保护点】
1.一种制备接种的生物材料支架的方法，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中，通过使用一个或多个注射器混合所述生物材料支架和所述多个细胞或通过使用混合方法来施加正压，所述混合方法诸如搅拌、敲打、共混、切入、搅动、折叠或乳化。
3.根据权利要求1所述的方法，其中，施加减压，其中，在低于大气压0至101.3kPa之间进行减压，以将所述多个细胞均质分布在整个所述支架中。
4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述减压进一步将调味剂和/或着色剂分布在整个所述支架中。
5.根据权利要求2所述的方法，其中，施加0.001至...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种制备接种的生物材料支架的方法，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中，通过使用一个或多个注射器混合所述生物材料支架和所述多个细胞或通过使用混合方法来施加正压，所述混合方法诸如搅拌、敲打、共混、切入、搅动、折叠或乳化。
3.根据权利要求1所述的方法，其中，施加减压，其中，在低于大气压0至101.3kpa之间进行减压，以将所述多个细胞均质分布在整个所述支架中。
4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述减压进一步将调味剂和/或着色剂分布在整个所述支架中。
5.根据权利要求2所述的方法，其中，施加0.001至900mpa的所述正压。
6.根据权利要求1所述的方法，其中，相对于大气压以0至100kpa进行减压。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中，所述多个细胞包括同质或异质细胞群。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述同质或异质细胞群包括肌肉细胞、脂肪细胞、结缔组织细胞、软骨细胞、骨细胞、上皮细胞或内皮细胞或其任意组合。
9.根据权利要求3、4或6所述的方法，其中，将所述混合物真空密封30分钟至约7天。
10.根据权利要求3、4、6或9所述的方法，其中，在约0℃至约100℃的温度下将所述混合物保持在真空下和/或在约30℃至150℃的温度下对所述混合物进行热处理。
11.根据权利要求10所述的方法，其中，在约0℃至约10℃的温度下将所述混合物保持在真空下。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中，所述生物材料支架包含一种或多种可交联组分。
13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述一种或多种可交联组分包括纤维素，纤维素衍生物诸如甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基甲基纤维素、乙基纤维素和溶解或再生的纤维素，豆科蛋白质(诸如大豆蛋白质、绿豆蛋白质、豌豆蛋白质、肾豆蛋白质、羽扇豆蛋白质和鹰嘴豆蛋白质)、谷类蛋白质(诸如小麦蛋白质、大米蛋白质和玉米蛋白质)、油性种子蛋白质(诸如花生蛋白质、向日葵蛋白质、油菜籽蛋白质、亚麻种子蛋白质、芝麻蛋白质)，真菌蛋白质(诸如菌蛋白、酵母、蘑菇)和菜籽油蛋白质，不同类别的包含一种或多种可交联组分的食品水胶体诸如植物源性水胶体(包括但不限于植物渗出物；诸如阿拉伯胶、阿拉伯树胶、黄芪胶、卡亚胶、刺梧桐胶、茄替胶、果胶、菊粉、糖胶树胶、魔芋葡甘聚糖；种子胶诸如瓜尔胶、罗望子胶、胡芦巴胶、决明子胶、罗勒种子胶、牧豆种子胶、燕麦胶、雷克斯勒、芬德勒胶、黑麦胶、车前草、premcem胶、淀粉、淀粉酶、纤维素、罗望子种子胶、海藻-琼脂-琼脂、卡拉胶、藻酸、藻酸钠、叉红藻胶、石莼胶聚糖、岩藻多糖、海带多糖、红藻、木聚糖)，动物源性水胶体(包括但不限于明胶、甲壳素和壳聚糖)，来自微生物来源-发酵的水胶体(微生物渗出物-黄原胶、右旋糖酐、凝胶多糖、硬葡聚糖、结冷胶、普鲁兰多糖、他拉胶、云杉胶和面包酵母聚糖)，以及经化学修饰的植物源性水胶体-合成胶(包括但不限于改性淀粉-羟乙基淀粉、淀粉醋酸酯、淀粉磷酸酯)，透明质酸，弹性蛋白，纤维蛋白，纤维蛋白原等，或其任意组合，上述组分(包括蛋白质)可以使用化学、物理或酶促技术进行交联，例如，使用：戊二醛，乙二醛，京尼平，二酰亚胺基酯-二甲基辛二亚氨酸酯，3,3’-二硫代双丙亚氨酸酯，山梨醇，甘油，六亚甲基二异氰酸酯(hmdc)，氯化钙，氢氧化钙，单价离子诸如h+、na+、k+、cs+、rb+和i-，多价离子诸如mg2+、ca2+、ba2+、fe2+、cu2+、zn2+、fe3+和al3+，二价离子盐，酸诸如柠檬酸、单宁酸、苹果酸和谷氨酸，酶诸如转谷氨酰胺酶、氧化还原酶，酚酸，类黄酮，葡萄糖酸-δ-内酯，高压，照射，光辐射，电离辐射等。
14.根据权利要求12或13所述的方法，其中，所述生物材料支架是交联的。
15.根据权利要求12或13所述的方法，还包括用交联剂对所述混合物进行交联，所述交联剂选自转谷氨酰胺酶、戊二醛、核黄素、福尔马林、甲醛、转谷氨酰胺酶、edc(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐)、氯化钙、氯化镁、柠檬酸、甘氨酸、二乙烯基砜、pva、eva、乙二醛、卡拉胶。
16.根据权利要求15所述的方法，其中，所述混合物的交联在施加压力之前进行。
17.根据权利要求15所述的方法，其中，所述混合物的交联在施加压力之后进行。
18.根据权利要求15所述的方法，其中，所述混合物的交联与施加压力同时进行。
19.根据权利要求1至18中任一项所述的方法，其中，在细胞培养基中提供所述多个细胞。
20.根据权利要求19所述的方法，其中，所述细胞培养基是dulbecco改良eagle培养基(dmem)。
21.根据权利要求19或20所述的方法，其中，所述细胞培养基包含至少一种生长因子。
22.根据权利要求21所述的方法，其中，所述生长因子包含胎牛血清(fbs)。
23.根据权利要求1至22中任一项所述的方法，其中，所述细胞培养基包含抗生素。
24.根据权利要求23所述的方法，其中，所述抗生素包括青霉素-链霉素。
25.根据权利要求1至24中任一项所述的方法，其中，所述细胞培养基包含抗真菌剂。
26.根据权利要求25所述的方法，其中，所述抗真菌剂包括两性霉素b。...
【专利技术属性】
技术研发人员：A·E·佩林，A·坎托，M·洛伦索，P·C·德苏萨菲利亚蒂舍尔，J·萨拉蒙，R·希基，C·拉塞尔，
申请(专利权)人：紫露草公司，
类型：发明
国别省市：
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