一种罗非鱼湖病毒检测试剂及其应用制造技术

本申请公开了一种罗非鱼湖病毒检测试剂及其应用。本申请检测试剂包括特异性检测罗非鱼湖病毒的引物对、crRNA和ssDNA报告分子；引物对上下游引物分别为Seq ID No.1和2所示序列；crRNA为Seq ID No.3所示序列，ssDNA报告分子为Seq ID No.4所示序列，ssDNA报告分子5’端和3’端分别修饰有荧光基团和淬灭基团。本申请检测试剂，创造性将RT‑RAA技术与CRISPR/Cas12a反应体系相结合，为罗非鱼湖病毒提供了一种新的速度快、方便携带、特异性强、灵敏性高的检测试剂，能够在现场实现快筛式的罗非鱼湖病毒检测，为保障水产养殖安全以及水生动物产品流通安全提供了保障。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及罗非鱼湖病毒检测，特别是涉及一种罗非鱼湖病毒检测试剂及其应用。

技术介绍

1、罗非鱼湖病毒（tilv）是水产养殖中一种新出现的具有高度传染性的病原体，据报道在多个大洲的16个国家影响养殖罗非鱼的养殖，尼罗罗非鱼（ oreochromis niloticus）的累积死亡率高达90%。尼罗罗非鱼（ oreochromis niloticus）是亚洲和非洲最重要的养殖鱼类之一，2020年，产量达600万吨。罗非鱼湖病毒病(tilvd)是由罗非鱼病毒感染引起的死亡率高达90%的疾病，给罗非鱼养殖场造成了巨大损失。早期发现这种病毒在促进早期治疗方面有着巨大的作用，能够有效的减少养殖业的经济损失。

2、传统的用于检测tilv的方法依赖多聚酶链式反应的核酸检测方法包括常规单重和多重的 pcr，实时荧光定量 rt-pcr 和等温扩增检测等，这些方法需要仪器精密度高、操作易发生污染等弊端。难以在临床现场检测中实践，近年来，一些等温扩增方法，如重组酶聚合酶扩增（rpa），由于其本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种罗非鱼湖病毒检测试剂，其特征在于：包括用于特异性检测罗非鱼湖病毒的引物对、crRNA和ssDNA报告分子；

2.根据权利要求1所述的罗非鱼湖病毒检测试剂，其特征在于：所述荧光基团包括但不仅限于FAM、TET、HEX、5-TAMRA、ROX、Texas Red-X、Cy3、Cy5、JOE和VIC中的至少一种。

3.根据权利要求1或2所述的罗非鱼湖病毒检测试剂，其特征在于：所述淬灭基团包括但不仅限于BHO-1、BHQ-2、BHQ-3和Dabcyl中的至少一种。

4.权利要求1-3任一项所述的罗非鱼湖病毒检测试剂在制备罗非鱼湖病毒检测的试剂盒或者罗非...

【技术特征摘要】

1.一种罗非鱼湖病毒检测试剂，其特征在于：包括用于特异性检测罗非鱼湖病毒的引物对、crrna和ssdna报告分子；

2.根据权利要求1所述的罗非鱼湖病毒检测试剂，其特征在于：所述荧光基团包括但不仅限于fam、tet、hex、5-tamra、rox、texas red-x、cy3、cy5、joe和vic中的至少一种。

3.根据权利要求1或2所述的罗非鱼湖病毒检测试剂，其特征在于：所述淬灭基团包括但不仅限于bho-1、bhq-2、bhq-3和dabcyl中的至少一种。

4.权利要求1-3任一项所述的罗非鱼湖病毒检测试剂在制备罗非鱼湖病毒检测的试剂盒或者罗非鱼湖病毒病检测的试剂盒中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：包括先采用seq id no.1和seq id no.2所示序列的引物对，对待测样本进行重组酶介导链置换核酸扩增...

【专利技术属性】
技术研发人员：高帅，郑晓聪，徐浩，黄韫，陈孝宇，朱崧琪，韦信贤，刘光亮，
申请(专利权)人：海南省农业科学院三亚研究院海南省实验动物研究中心，
类型：发明
国别省市：