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一种海绵细胞团的再生培养方法技术

技术编号:41561337 阅读:26 留言:0更新日期:2024-06-06 23:45
本发明专利技术公开了一种海绵细胞团的再生培养方法,包括如下步骤:(1)将海绵细胞悬液经浓度调整后,接种于添加1900‑2100mg/L庆大霉素的无菌天然海水中,根据海绵细胞悬液的来源海绵的差异,于20‑30℃下35‑45rpm摇培至其中的细胞形成致密的细胞团;(2)将上述细胞团转移至不添加任何抗生素的无菌海水中,根据上述来源海绵的差异,于20‑30℃下35‑45rpm摇培1‑4周。本发明专利技术能够实现离散海绵细胞‑细胞团‑完整功能性个体的全身再生,系统而简单,实验耗材易于获取,具有普适性,为海洋天然产物的开发、海绵的规模化养殖等提供思路,为海绵再生生物学、进化生物学、生态学领域提供了一种能替代海绵幼体的实验材料。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于海洋生物,具体涉及一种海绵细胞团的再生培养方法


技术介绍

1、海绵是最简单低等的多细胞动物,最原始的后生动物之一,具有区别于其他动物的组织结构以及细胞分化的高度可塑性,其体内的细胞能够根据生物体需求进行脱分化、再分化、迁移、凋亡。这种慢性形态发生有助于海绵的生长与再生。其中,最典型的表现是海绵修复损失的身体部位,甚至能够由离散细胞聚集形成细胞团并进一步发育出水沟系统,最终重塑完整的功能性个体。而细胞团的形成与后续再生伴随着细胞自我识别、聚集、脱分化、再分化、凋亡、迁移与重排等过程,不仅是研究海绵再生和多细胞动物起源的良好模型,在生态学和共生微生物学领域中也是一种能替代海绵幼体和离散细胞的具有前景的实验材料。

2、尽管不少文章以细胞团为研究材料,由于技术限制,绝大部分文章停留在对细胞团形态学或骨针的简单描述,难以进行机制层面的探究和后续的应用开发。一方面,行业关于细胞团前期制备和后续培养中技术细节并未进行深层次探究,方法缺乏统一标准;另一方面,海绵的物种特异性及其生命周期的差异性,也使得同一方法学在不同海绵种属甚至不同生长发育时期本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种海绵细胞团的再生培养方法,其特征在于:包括如下步骤:

2.如权利要求1所述的再生培养方法,其特征在于:所述海绵细胞悬液的制备方法包括:将原料海绵用无菌海水进行冲洗,接着去除表面附着生物,然后制成0.8-1.2cm3的组织块;将该组织块浸泡于无钙镁离子的人工海水中静置后,挤压释放该组织块中的海绵细胞;将这些海绵细胞依次经筛网过滤、离心富集和在上述无钙镁离子的人工海水中的清洗后,重悬获得海绵细胞悬液。

3.如权利要求2所述的再生培养方法,其特征在于:所述筛网过滤采用500目筛网进行。

4.如权利要求2所述的再生培养方法,其特征在于:所述离心富集的转...

【技术特征摘要】

1.一种海绵细胞团的再生培养方法,其特征在于:包括如下步骤:

2.如权利要求1所述的再生培养方法,其特征在于:所述海绵细胞悬液的制备方法包括:将原料海绵用无菌海水进行冲洗,接着去除表面附着生物,然后制成0.8-1.2cm3的组织块;将该组织块浸泡于无钙镁离子的人工海水中静置后,挤压释放该组织块中的海绵细胞;将这些海绵细胞依次经筛网过滤、离心富集和在上述无钙镁离子的人工海水中的清洗后,重悬获得海绵细胞悬液。

3.如权利要求2所述的再生培养方法,其特征在于:所述筛网过滤采用500目筛网进行。

4.如权利要求2所述的再生培养方法,其特征在于:所述离心富集的转速为100-400g。

5.如权利要求4所述的再生培养方法,其特征在于:所述离心富集的时间为10-30min,温度为3-4℃。

6.如权利要求2所述的再生培养方法,...

【专利技术属性】
技术研发人员:赵晶贾宸政
申请(专利权)人:厦门大学
类型:发明
国别省市:

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