肝癌甲基化检测试剂盒及其检测肝癌的方法技术

本发明专利技术公开了肝癌甲基化检测试剂盒及其检测肝癌的方法，试剂盒内包括甲基化PCR反应液，阳性对照品，阴性对照品；甲基化PCR反应液中含有针对目标基因TRPV1、CACNA1D、BMPR1A、PLAC8设计的引物和探针，用于检测受测样本中TRPV1、CACNA1D、BMPR1A、PLAC8基因的甲基化程度，根据受测样本DNA甲基化程度来判断受测样本是否发生癌变，为临床提供操作简便又精准的肝癌筛查方式，对肝癌的检测具有十分积极的意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医学检验，具体涉及一种肝癌甲基化检测试剂盒及其检测肝癌的方法。

技术介绍

1、原发性肝癌（primary liver cancer，plc）是全球常见的恶性肿瘤之一。根据2020年世界卫生组织国际癌症研究机构（iacr）发布的2020年全球最新癌症负担数据，全世界每年新发肝癌91万例，因肝癌死亡83万例，肝癌已经成为全球发病率第6，死亡率第3的癌症。由于肝癌起病隐匿，绝大多数患者在确诊时就已经处于中晚期，肝癌的五年总生存率目前仅为14.1%，如果肝癌能够早期发现，患者将可以得到更有效的手术治疗，据统计早期肝癌的5年生存率可高达90%。

2、在临床，肝癌早筛通常联合afp检测（血清甲胎蛋白，为诊断原发性肝癌的特异性指标）和肝脏超声检测对肝癌高危人群进行定期筛查，发现异常再进一步考虑ct或者核磁共振检查。现有技术对早期肝癌的诊断灵敏度不足，而且影像学检测只能发现直径为1-50px以上的肿块，其敏感性和特异性也存在一定的局限，同时医生的临床经验和主观判断以及仪器性能等因素都会对检测结果造成影响。近年来，随着液体活检技术的发展，一些新本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 一种肝癌甲基化检测试剂盒，其特征在于，试剂盒内含有甲基化 PCR反应液，阳性对照品，阴性对照品；所述甲基化PCR反应液中含有针对目标基因TRPV1、CACNA1D、BMPR1A、PLAC8设计的引物和探针，用于检测受测样本中TRPV1基因、CACNA1D基因、BMPR1A基因和PLAC8基因启动子区域中至少一个靶区域内的甲基化程度，所述启动子区域并非严格限定为位于启动子片段内的区域，而是启动子附近区域的基因片段。

2.根据权利要求1所述的一种肝癌甲基化检测试剂盒，其特征在于，所述TRPV1、CACNA1D、BMPR1A和PLAC8基因的甲基化待检区域均包含多个CpG，其...

【技术特征摘要】

1. 一种肝癌甲基化检测试剂盒，其特征在于，试剂盒内含有甲基化 pcr反应液，阳性对照品，阴性对照品；所述甲基化pcr反应液中含有针对目标基因trpv1、cacna1d、bmpr1a、plac8设计的引物和探针，用于检测受测样本中trpv1基因、cacna1d基因、bmpr1a基因和plac8基因启动子区域中至少一个靶区域内的甲基化程度，所述启动子区域并非严格限定为位于启动子片段内的区域，而是启动子附近区域的基因片段。

2.根据权利要求1所述的一种肝癌甲基化检测试剂盒，其特征在于，所述trpv1、cacna1d、bmpr1a和plac8基因的甲基化待检区域均包含多个cpg，其中，所述trpv1基因的甲基化待检区域的核苷酸序列为

3. 根据权利要求1所述的一种肝癌甲基化检测试剂盒，其特征在于，所述的甲基化pcr反应液含有的引物和探针具体为：trpv1正、反向引物，trpv1探针；cacna1d正、反向引物，cacna1d探针；bmpr1a正、反向引物，bmpr1a探针；plac8正、反向引物，plac8探针；内参actb正、反向引物，内参actb探针；

4.根据权利要求3所述的一种肝癌甲基化检测试剂盒，其特征在于，所述trpv1探针、cacna1d探针、bmpr1a探针、plac8探针、actb探针的两端分别标记有荧光报告基团和荧光淬灭基团，所述荧光报告基团选自fam、hex、rox、joe、vic、tet、ned、fitc、cy...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈梦梦，周阳，栾延松，张炳强，于俊梅，赵毅，侯雪含，付学奇，孙允东，王福斌，孙国龙，
申请(专利权)人：青岛瑞思德医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：