一种宫颈细胞基因甲基化检测试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种宫颈细胞基因甲基化检测试剂盒及检测方法，试剂盒中提供的MTHFR PCR反应液、PAX1 PCR反应液、SGSH PCR反应液中含有检测目标基因MTHFR、PAX1、SGSH的特异性引物和探针，检测灵敏度高，特异性好。基于荧光定量PCR技术，使用本发明专利技术检测试剂对检测样本中三个目标基因MTHFR、PAX1、SGSH进行甲基化联合检测，据此判断样本是否癌变，有效补充了可能由于位点选择以及反应体系所引起的差异，提高了宫颈癌筛查的准确性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医学检验，具体涉及一种基于荧光定量pcr技术的宫颈细胞基因甲基化检测试剂盒及检测方法。

技术介绍

1、在我国，子宫颈癌是威胁女性健康常见的恶性肿瘤之一，发病率和死亡率居于第二位。我国子宫颈癌死亡分布情况总体上农村略高于城市，中西部地区约为东部地区的两倍。我国子宫颈癌患者中位发病年龄是51岁，但主要好发于2个年龄段，以40～50岁为最多，60～70岁又有一高峰出现，20岁以前少见。然而值得关注的是近年来子宫颈癌的平均发病年龄在逐渐降低，有年轻化趋势。因此，十分有必要在全国范围内规范宫颈癌的诊断与治疗。另一方面，宫颈癌的发生可通过对癌前病变的检查和处理得以有效控制。

2、目前临床上所用的细胞学tct及病毒学hpv检测存在局限性，无法完全满足临床需求。宫颈癌基因甲基化检测具有高灵敏度、高特异性和高准确性，能有效弥补当前临床空白，为临床医生提供更有价值的参考，从而更好的服务临床、服务大众。

技术实现思路

1、为解决现有技术的问题，本专利技术的目的是提供了一种基于荧光定量pcr技术的宫颈细本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 本专利技术提供了一种宫颈细胞基因甲基化检测试剂盒，其特征在于，试剂盒内含有的检测试剂包括：用于检测MTHFR基因启动子区域中至少一个靶区域内的甲基化程度的MTHFRPCR反应液；用于检测PAX1基因启动子区域中至少一个靶区域内的甲基化程度的PAX1 PCR反应液；用于检测SGSH基因启动子区域中至少一个靶区域内的甲基化程度的SGSH PCR反应液； 还包括阳性对照品和阴性对照品；所述启动子区域并非严格限定为位于启动子片段内的区域，而是启动子附近区域的基因片段。

2.根据权利要求1所述的一种宫颈细胞基因甲基化检测试剂盒，其特征在于，所述MTHFR PCR反应液的构成组分包...

【技术特征摘要】

1. 本发明提供了一种宫颈细胞基因甲基化检测试剂盒，其特征在于，试剂盒内含有的检测试剂包括：用于检测mthfr基因启动子区域中至少一个靶区域内的甲基化程度的mthfrpcr反应液；用于检测pax1基因启动子区域中至少一个靶区域内的甲基化程度的pax1 pcr反应液；用于检测sgsh基因启动子区域中至少一个靶区域内的甲基化程度的sgsh pcr反应液； 还包括阳性对照品和阴性对照品；所述启动子区域并非严格限定为位于启动子片段内的区域，而是启动子附近区域的基因片段。

2.根据权利要求1所述的一种宫颈细胞基因甲基化检测试剂盒，其特征在于，所述mthfr pcr反应液的构成组分包括mthfr正、反向引物，mthfr探针，内参actb正、反向引物，内参actb探针，10×缓冲液，dntp，taq酶和ung酶；所述mthfr正、反向引物和mthfr探针的摩尔浓度比为4：4：2；

3.根据权利要求2所述的一种宫颈细胞基因甲基化检测试剂盒，其特征在于， 所述的mthfr pcr反应液，各构成组分的含量如下：mthfr正向引物200nm，mthfr反向引物200nm，mthfr探针100nm，内参actb正向引物200nm，内参actb反向引物200nm，内参actb探针100nm，10×缓冲液，10mm dntp混合液2μl,taq酶200u/ml和ung酶4u/ml。

4. 根据权利要求1所述的一种宫颈细胞基因甲基化检测试剂盒，其特征在于，所述pax1 pcr反应液的构成组分包括pax1正、反向引物，pax1探针，内参actb正、反向引物，内参actb探针，10...

【专利技术属性】
技术研发人员：张炳强，陈梦梦，于俊梅，朱柏扬，栾延松，周阳，张高峰，马永超，刘贺，江鑫，孙国龙，
申请(专利权)人：青岛瑞思德医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：