一种O-甲基转移酶突变体及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及一种O‑甲基转移酶突变体，所述转氨酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO：6所示氨基酸序列发生突变的氨基酸序列；其中，所述发生突变的氨基酸序列具有以下至少1个突变位点：第30、54、56、109、121、162、164、187、188、207、214、246、249、250、253、255、389位；所述O‑甲基转移酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：12～30所示，其中氨基酸序列如SEQ ID NO：30所示的突变体具有较高热稳定，且对底物为对甲氧基苯甲酸的生产6S‑5‑甲基四氢叶酸反应具有较高的催化活性，产物浓度可达40g/L以上，远高于国内外报道的采用合成生物学生产6S‑5‑甲基四氢叶酸结果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物转化，具体涉及一种用于催化制备6s-5-甲基四氢叶酸的o-甲基转移酶突变体及其制备方法与应用。

技术介绍

1、o-甲基转移酶是一类催化甲基转移反应、使底物的羟基取代为甲氧基的酶，这类酶在生物体内起到了多种方面的作用。o-甲基转移酶可作用的底物范围十分广泛，包括激素合成修饰、蛋白质修饰以及植物类黄酮的合成等。例如儿茶酚胺o-甲基转移酶存在于人体内，起到代谢儿茶酚类神经递质的作用；其功能是在镁离子的辅助下，以腺苷甲硫氨酸为提供活性甲基的辅酶，在儿茶酚胺苯环的c-3位的羟基上甲基化。经过o-甲基化修饰的多巴胺则会进一步在体内分解失活；由于多巴胺与精神活动及躯体运动相关，因此儿茶酚胺o-甲基转移酶对帕金森症、精神分裂症等神经疾病和运动障碍性疾病具有研究意义。

2、叶酸(维生素b9)是一种水溶性维生素，是蝶酰基单谷氨酸和具有叶酸生物活性相关化合物的统称。活性叶酸，即本身具有生理活性的叶酸，可以直接被吸收利用，指的是一组物质，包含二氢叶酸、四氢叶酸、5,10-亚甲基四氢叶酸、10-甲酰基叶酸以及6s-5-甲基四氢叶酸等。6s-5-甲基四氢本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种O-甲基转移酶突变体，其特征在于，所述O-甲基转移酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO：6所示氨基酸序列发生突变的获得的突变体；其中，所述发生突变的氨基酸序列具有以下至少1个突变位点：第30位、第54位、第56位、第109位、第121位、第162位、第164位、第187位、第188位、第207位、第214位、第246位、第249位、第250位、第253位、第255位、第389位。

2.根据权利要求1所述的O-甲基转移酶突变体突变体，其特征在于，所述O-甲基转移酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：12～30所示。

3.一种O-甲基转移酶突变体基因...

【技术特征摘要】

1.一种o-甲基转移酶突变体，其特征在于，所述o-甲基转移酶突变体的氨基酸序列是由seq id no：6所示氨基酸序列发生突变的获得的突变体；其中，所述发生突变的氨基酸序列具有以下至少1个突变位点：第30位、第54位、第56位、第109位、第121位、第162位、第164位、第187位、第188位、第207位、第214位、第246位、第249位、第250位、第253位、第255位、第389位。

2.根据权利要求1所述的o-甲基转移酶突变体突变体，其特征在于，所述o-甲基转移酶突变体的氨基酸序列如seq id no：12～30所示。

3.一种o-甲基转移酶突变体基因，其特征在于，所述o-甲基转移酶突变体基因用于编码权利要求2所述的转氨酶突变体。

4.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包含权利要求3所述的o-甲基转移酶突变体基因。

5.根据权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：马向辉，程晓志，魏顺新，于青柳，薛洪泽，
申请(专利权)人：天津法莫西生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：