一种简单、经济、高效的猪卵母细胞体外成熟方法技术

一种简单、经济、高效的猪卵母细胞体外成熟方法，包括采集卵巢步骤，从卵巢中采集卵母细胞步骤，卵母细胞的筛选步骤和体外成熟培养步骤，其特征在于，卵母细胞体外成熟培养的整个过程都是在人工呼出肺气环境中进行的，具体是将筛选的卵丘－卵母细胞复合体，平均４０个卵丘－卵母细胞复合体一个孔，移入四孔板中，将四孔板移入充气袋中，封口机封住袋口，试验人员进行呼吸气体交换，用吹气针将肺部气体吹入充气袋中，把充气袋中空气排完，将充气袋吹满肺气并封口，将该充气袋置于３８℃的恒温箱培养，成熟培养４２－４４ｈ。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞生物学领域，特别涉及一种简单、经济、高效的猪卵母细胞体外成熟新方法。
技术介绍
中国专利申请200810218336. X公开了《一种猪卵母细胞体外培养成熟方法》，包 括采集卵巢步骤，从卵巢中采集卵母细胞步骤，卵母细胞筛选步骤和成熟培养步骤，其特征 在于，在卵母细胞采集步骤之前，采集的卵巢存放于盛装有生理盐水的容器内保存，且容 器内温度保持在32 34°C ;卵母细胞筛选步骤采用的洗卵液中含有1 10包括采集卵 巢步骤，从卵巢中采集卵母细胞步骤，卵母细胞筛选步骤和成熟培养步骤，其特征在于，在 卵母细胞采集步骤之前，采集的卵巢存放于盛装有生理盐水的容器内保存，且容器内温度 保持在32 34°C ;卵母细胞筛选步骤采用的洗卵液中含有1 10 i！ g/mL的两性霉素B， 2% 20% v/v的血清；卵母细胞成熟培养步骤采用的成熟培养液中含有50 90% v/v 的TCM-199[1幻基础液，5 25IU/mL的hCG(人绒毛膜促性腺激素)和5 20IU/mL的 PMSG(孕马血清促性腺激素)。 该专利申请存在以下不足。首先，卵母细胞采集之前，卵巢采集时将卵巢置于含 有本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种猪卵母细胞体外成熟方法，包括采集卵巢步骤，从卵巢中采集卵母细胞步骤，卵母细胞的筛选步骤和体外成熟培养步骤，其特征在于，卵母细胞体外成熟培养的整个过程都是在人工呼出肺气环境中进行的，即采用人体肺部气体实现体外成熟卵母细胞。

【技术特征摘要】
一种猪卵母细胞体外成熟方法，包括采集卵巢步骤，从卵巢中采集卵母细胞步骤，卵母细胞的筛选步骤和体外成熟培养步骤，其特征在于，卵母细胞体外成熟培养的整个过程都是在人工呼出肺气环境中进行的，即采用人体肺部气体实现体外成熟卵母细胞。2. 如权利要求1所述的猪卵母细胞体外成熟方法，其特征在于，所述的采集卵巢步骤 包括以下步骤，从屠宰场取猪卵巢，放入盛有青霉素G和硫酸链霉素的28 35t:生理盐水 的保温瓶中，2h内运回实验室。3. 如权利要求1所述的猪卵母细胞体外成熟方法，其特征在于，所述的从卵巢采集卵 母细胞步骤包括以下步骤，用无菌注射器抽吸卵巢上3 6mm的卵泡，将抽取液注入置于 3『C恒温水浴锅的离心杯中，使卵丘卵母细胞合体自然沉降。4. 如权利要求1所述的猪卵母细胞体外成熟方法，其特征在于，所述的卵母细胞的筛 选步骤包括以下步骤，卵泡液沉降13-1...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹祖兵，随刘才，李运生，章孝荣，张运海，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：34[中国|安徽]