【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及核酸检测，特别涉及一种级联放大crispr-dx检测体系。
技术介绍
1、核酸检测技术(crispr-based diagnostics，crispr-dx)是基于crispr-cas12和crispr-cas13家族的反式切割特性开发的检测技术。
2、长期以来，聚合酶链式反应(pcr)及其衍生技术如常规pcr、荧光定量pcr、数字微滴pcr等一直是核酸检测金标准。但pcr反应需要变性、退火、延伸三个步骤，对设备和操作人员要求较高、需要高温条件、容易出现非特异性扩增、反应时间较长(1～2小时)，使其应用局限于医疗检验机构。重组酶聚合酶等温扩增技术(rpa)检测反应较快(20分钟)，可以在常温下反应，但其特异性较差，易出现非特异性扩增，易受环境核酸污染的影响而出现假阳性结果。crispr-dx可以在室温条件下快速反应，且拥有良好的特异性，但单独使用时灵敏度不足，在核酸浓度较低时易出现漏诊。
3、由于crispr-dx的灵敏度仍有待优化，有研究团队将其与rpa相结合，达到了显著提高了灵敏度的目的。可惜的...
【技术保护点】
1.一种级联放大CRISPR-Dx检测体系，其特征在于，包括底物片段、通用CrRNA和Lbcas12a，所述底物片段的核苷酸序列如SEQ ID No:1或SEQ ID No:2所示，所述通用CrRNA的核苷酸序列如SEQ ID No:3所示。
2.根据权利要求1所述检测体系，其特征在于，所述底物片段经退火处理后折叠形成具有茎状部分和环状部分的茎环结构，所述第一互补区和所述第二互补区互补配对形成双链的茎状部分，所述环形区的两端分别连接所述第一互补区和所述第二互补区连接形成单链的环状部分。
3.根据权利要求2所述检测体系，其特征在于，所述退火处理的...
【技术特征摘要】
1.一种级联放大crispr-dx检测体系，其特征在于，包括底物片段、通用crrna和lbcas12a，所述底物片段的核苷酸序列如seq id no:1或seq id no:2所示，所述通用crrna的核苷酸序列如seq id no:3所示。
2.根据权利要求1所述检测体系，其特征在于，所述底物片段经退火处理后折叠形成具有茎状部分和环状部分的茎环结构，所述第一互补区和所述第二互补区互补配对形成双链的茎状部分，所述环形区的两端分别连接所述第一互补区和所述第二互补区连接形成单链的环状部分。
3.根据权利要求2所述检测体系，其特征在于，所述退火处理的反应体系包括退火缓冲液、所述底物片段和无酶水。
4.根据权利要求3所述检测体系，其特征在于，所述退火处理的反应程序为：98℃，持续1分钟；以每分钟下降1℃的速率降至25℃；25℃保存。
5.根据权利要求1所述检测体系，其特征在于，还包括缓冲液、氯化镁溶液、rna酶抑制剂、检测crrna和探针。
【专利技术属性】
技术研发人员：刘家兴，周钟琪，刘航程，许美景，
申请(专利权)人：厦门腾基医疗科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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