【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种异丁香酚氧甲基转移酶突变体及其全细胞催化合成橙皮素二氢查耳酮的方法，属于生物。
技术介绍
1、随着人们对饮食中糖的需求的不断变化，对健康天然的甜味剂的研究逐渐引起研究人员的兴趣。新橙皮苷二氢查尔酮是目前市售的一种常见的天然甜味剂，经检测其甜度约为蔗糖的1800倍，但该甜味剂有类似甘草的不良后苦味等缺点，限制了它的广泛使用。橙皮素二氢查耳酮是一种新型的甜味剂，其甜度与新橙皮苷二氢查耳酮相当，风味更佳纯正，而且不包含糖苷，更加符合健康饮食的需求。橙皮苷二氢查耳酮的合成工艺极少。cn110950747a曾公布了一种以新橙皮素为原料，在无水乙醇环境中，通过铂-铁镍三元催化剂的制得橙皮素二氢查耳酮的方法。其中需要经历碱液开环、加氢还原和酸水解三步反应。因此，仍需要探索更环保的方式来合成该物质。但是目前生物催化合成橙皮素二氢查耳酮的方法很少，故探索该物质的生物合成方法具有重要意义。
2、在植物的合成途径中，以根皮素为前体，经过p450单加氧酶修饰可以得到3-羟基根皮素。理论上，o-甲基转移酶(omts)对3-羟基根皮素...
【技术保护点】
1.异丁香酚氧甲基转移酶突变体，其特征在于，在出发序列对应于SEQ ID NO.2的基础上进行了如下任一位点的突变：
2.编码权利要求1所述突变体的基因。
3.含有权利要求2所述基因的表达载体。
4.表达权利要求1所述异丁香酚氧甲基转移酶突变体的基因工程菌。
5.一种大肠杆菌基因工程菌，其特征在于，以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主，以pET Duet1为载体，共表达了4-羟基苯乙酸3-单加氧酶和权利要求1所述的异丁香酚氧甲基转移酶突变体；所述4-羟基苯乙酸3-单加氧酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
<...【技术特征摘要】
1.异丁香酚氧甲基转移酶突变体，其特征在于，在出发序列对应于seq id no.2的基础上进行了如下任一位点的突变：
2.编码权利要求1所述突变体的基因。
3.含有权利要求2所述基因的表达载体。
4.表达权利要求1所述异丁香酚氧甲基转移酶突变体的基因工程菌。
5.一种大肠杆菌基因工程菌，其特征在于，以大肠杆菌bl21(de3)为宿主，以pet duet1为载体，共表达了4-羟基苯乙酸3-单加氧酶和权利要求1所述的异丁香酚氧甲基转移酶突变体；所述4-羟基苯乙酸3-单加氧酶的氨基酸序列如seq id no.4所示。
6.一种大肠杆菌基因工程菌，其特征在于，以大肠杆菌bl21(de3)为宿主，以pet28a为载体，表达权利要求1所述的异丁香酚氧甲基转移酶突变体。
7.一种细胞催...
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