一种基于HPLC法测定右旋糖酐20和蔗糖含量的分析方法技术

本申请涉及生物化学领域，公开了一种基于HPLC法测定右旋糖酐20和蔗糖含量的分析方法，包括S1、制备右旋糖酐20和蔗糖梯度标准溶液：右旋糖酐20对照品及蔗糖对照品溶于CaCl<subgt;2</subgt;·2H<subgt;2</subgt;O水溶液得到标准贮备液，稀释标准贮备液得到一系列右旋糖酐20和蔗糖梯度标准溶液；S2、制备供试品溶液：供试品溶于CaCl<subgt;2</subgt;·2H<subgt;2</subgt;O水溶液，即得；S3、设置色谱条件：采用离子交换色谱柱，示差折光检测器（RID），以CaCl<subgt;2</subgt;·2H<subgt;2</subgt;O水溶液为流动相进行等度洗脱；S4、供试品分析：进样右旋糖酐20和蔗糖梯度标准溶液及供试品溶液，采用外标法计算供试品溶液中右旋糖酐20和蔗糖含量。本发明专利技术提供的分析方法简单易操作，右旋糖酐20和蔗糖峰形尖锐对称，分离度高，适用于分析右旋糖酐20和蔗糖的含量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物化学领域，具体为一种基于hplc法测定右旋糖酐20和蔗糖含量的分析方法。

技术介绍

1、右旋糖酐与蔗糖的混合物常作为冻干保护剂添加至蛋白质类药物中，以防止蛋白质类药物在冷冻干燥及储存过程中发生变性。经研究表明，该冻干保护剂的保护作用依赖于其浓度，低浓度时，保护作用与浓度呈正相关，当达到最佳保护浓度后，随着浓度的增大，保护作用不再增加，甚至下降，且过高的保护剂浓度对人体亦会产生影响，右旋糖酐与蔗糖的最佳保护浓度为5%，在此浓度下，右旋糖酐能最大程度的提高蛋白质的储藏质量，蔗糖能最大程度的通过氢键与失去水分子的蛋白质分子相连，从而防止蛋白质分子氢键连接位置直接暴露进而引起蛋白质变性。故检测蛋白质类药物（冻干保护剂：蔗糖、右旋糖酐）中的右旋糖酐与蔗糖含量至关重要。

2、目前，蔗糖含量测定多采用高效液相色谱-示差折光检测器法（high-performanceliquid chromatography-refractive index detector，hplc-rid）、高效液相色谱-蒸发光散射检测器法（high-performanc本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于HPLC法测定右旋糖酐20和蔗糖含量的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种基于HPLC法测定右旋糖酐20和蔗糖含量的分析方法，其特征在于，所述S1步骤中，所述右旋糖酐20干燥至恒重的温度为55～105℃。

3.根据权利要求1所述的一种基于HPLC法测定右旋糖酐20和蔗糖含量的分析方法，其特征在于，所述S1步骤中，所述右旋糖酐20和蔗糖标准贮备液的浓度为10mg/ml，右旋糖酐20和蔗糖梯度标准溶液的浓度分别为：1mg/ml、1.5mg/ml、2mg/ml、2.5mg/ml及3mg/ml。

4.根据权利要求1所述...

【技术特征摘要】

1.一种基于hplc法测定右旋糖酐20和蔗糖含量的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种基于hplc法测定右旋糖酐20和蔗糖含量的分析方法，其特征在于，所述s1步骤中，所述右旋糖酐20干燥至恒重的温度为55～105℃。

3.根据权利要求1所述的一种基于hplc法测定右旋糖酐20和蔗糖含量的分析方法，其特征在于，所述s1步骤中，所述右旋糖酐20和蔗糖标准贮备液的浓度为10mg/ml，右旋糖酐20和蔗糖梯度标准溶液的浓度分别为：1mg/ml、1.5mg/ml、2mg/ml、2.5mg/ml及3mg/ml。

4.根据权利要求1所述的一种基于hplc法测定右旋糖酐...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁姗，李小娟，王爱秀，朱衍志，张锦波，
申请(专利权)人：兰州生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：