一种用于B型肉毒神经毒素的检测方法及应用技术

本发明专利技术公开一种用于B型肉毒神经毒素的检测方法及应用。本发明专利技术的方法检测时间短，作为定性检测法灵敏度高，达到皮克级，对于微量毒素样品检测优势明显。相对于使用抗血清检测的动物法，采用单克隆抗体对检测特异性高，不论是用于科研检测和食品卫生检验均有利于准确决策，且相对于动物法误差小。此外，本发明专利技术产生的肉毒神经毒素双抗体夹心反应特征峰可用于肉毒神经毒素的稳定性检测，对于肉毒毒素产品生产、质量控制、新品研发、检定用标准品的质控和监测及市场监督起到其它方法无法替代的作用。因此，本发明专利技术可用于指导建立毒素免疫检测标准物质，推动毛细管免疫检测技术成为新的肉毒毒素检测标准方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微量蛋白免疫学定性检测领域，特别是涉及一种用于b型肉毒神经毒素的检测方法及应用。

技术介绍

1、肉毒毒素是由肉毒梭状芽胞杆菌生长、繁殖过程中产生的细菌外毒素，根据抗原性分为7个型，即a、b、c、d、e、f、g。肉毒毒素具有强烈毒性，肉毒毒素污染的食品可致食物中毒，严重者可致命，造成人类肉毒中毒的型别主要有a、b、e、f型，因此肉毒毒素检验是食品卫生检验的重要内容，进行肉毒毒素的防治研究对国家生物安全、社会卫生安全都具有重要意义。免疫学检测是肉毒毒素检测的主要方法。

2、临床上肉毒中毒抢救的关键是及早做出正确诊断，这关系到能否挽救生命，对症状的诊断仅为参考，决定性的诊断是中毒食物的定性检测，对中毒食物的定性检测是诊断的关键，对中毒食物中毒素的型别鉴定是做出治疗方案的关键。在毒素的实验室研究领域除需对样品的定性检测和鉴别检测外还需纯度、稳定性等方面检测。

3、现有的常规技术首先为免疫中和毒素基础上的实验动物法，该方法的缺陷是：1)检测时间长，通常2-4天；2)使用实验动物，在实验伦理方面面临压力，势必淘汰；3)动物存在个体本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于B型肉毒神经毒素的检测方法，其特征在于，包括在毛细管中以捕获抗体、待测样本和检测抗体形成夹心复合物并催化检测液产生能够被检测器捕捉的信号，从而确定B型肉毒神经毒素的存在和/或进行B型肉毒神经毒素的定量，其中，所述捕获抗体能够靶向B型肉毒神经毒素，所述捕获抗体包含氨基酸序列分别如GFAFSSYD、ISSGGSST和ARQAFYTYDGTAMDY所示的重链CDR1-3，和/或氨基酸序列分别如QSIVHNNGDTY、KVS和FQGSHIPWT所示的轻链CDR1-3。

2.根据权利要求1所述的用于B型肉毒神经毒素的检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

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【技术特征摘要】

1.一种用于b型肉毒神经毒素的检测方法，其特征在于，包括在毛细管中以捕获抗体、待测样本和检测抗体形成夹心复合物并催化检测液产生能够被检测器捕捉的信号，从而确定b型肉毒神经毒素的存在和/或进行b型肉毒神经毒素的定量，其中，所述捕获抗体能够靶向b型肉毒神经毒素，所述捕获抗体包含氨基酸序列分别如gfafssyd、issggsst和arqafytydgtamdy所示的重链cdr1-3，和/或氨基酸序列分别如qsivhnngdty、kvs和fqgshipwt所示的轻链cdr1-3。

2.根据权利要求1所述的用于b型肉毒神经毒素的检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

3.根据权利要求1所述的用于b型肉毒神经毒素的检测方法，其特征在于，所述检测抗体具有(i)-(iii)所示的任意一种氨基酸序列：

4.根据权利要求1所述的用于b型肉毒神经毒素的检测方法，其特征在于，所述检测抗体为酶标抗体，用于标记的酶包括辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶或β-半乳糖苷酶。

5.根据权利要求4所述的用于b型肉毒神经毒素的检测方法，其特征在于，所述检测液包括化学发光剂或显色剂，所述辣根过氧化物酶对应的检测液包括鲁米诺、邻苯二...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆俭，周易，王怡之，张若晖，马亚峰，张政，朱俐，
申请(专利权)人：兰州生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：