分析蛋白-DCVSH加合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，尤其涉及一种分析蛋白‑DCVSH加合物及其制备方法和应用。制备方法为：构建慢病毒表达载体，载体包括pCIpCDH‑Puro表达载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点序列、启动子序列和分析蛋白序列；分析蛋白序列包括BamHI酶切位点、用于表达分析蛋白的分析蛋白基因编码序列和NotI酶切位点将所述慢病毒表达载体转入真核细胞，表达所述分析蛋白，将1，2‑二氯乙烯硫酮与所述分析蛋白形成二硫键，制得分析蛋白‑DCVSH加合物。本发明专利技术提供的分析蛋白‑DCVSH加合物，通过其加合水平评估环境污染物暴露可能诱导的自身免疫性疾病。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，尤其涉及一种分析蛋白-dcvsh加合物及其制备方法和应用。

技术介绍

1、tce(三氯乙烯)的gsh偶联物s-(1，2-二氯乙烯基)谷胱甘肽(dcvg)降解为半胱氨酸偶联物s-(1，2-二氯乙烯基)-1-半胱氨酸(dcvc)。

2、s-1，2二氯乙烯酮-l-半胱氨酸(s-(1，2-dichlorovinyl)-l-cysteine，dcvc)是三氯乙烯的诱变性和肾毒性代谢物，分别通过半胱氨酸偶联物s-氧化酶(s-氧化酶)和半胱氨酸偶联物β-裂解酶(β-裂解酶)生物活化为s-(1，2-二氯乙烯基)-l-半胱氨酸亚砜(dcvcs)和氯硫酮和或2-氯硫代乙酰氯。二氯乙酰氯(dcac)作为tce的反应性代谢物之一，具有很强的酰化能力，可以在雌性mrl+/+小鼠中以较低剂量的tce引发自身免疫反应。

3、目前，卤代烃类化合物诱导的自身免疫性肝炎，无法明确其抗原的作用机制。卤代烃类化合物诱导的自身免疫性肝炎的发病机制和抗原作用可能存在多样性和异质性。不同个体对卤代烃类化合物的反应可能不同，而且疾病的表现形式和进展也可能存在差本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种分析蛋白-DCVSH加合物的制备方法，其特征在于，其包括以下步骤：

2.如权利要求1所述分析蛋白加合物的制备方法，其特征在于：其还包括步骤S3，将所述分析蛋白-DCVSH加合物经过胰蛋白酶酶解后，通过质谱分析检测确定所述分析蛋白-DCVSH加合物的加合水平。

3.如权利要求1所述分析蛋白加合物的制备方法，其特征在于：所述分析蛋白包括：ENO1、ALDH1A1、ADH1A中的一种或两种以上的组合。

4.如权利要求1所述分析蛋白加合物的制备方法，其特征在于：若所述分析蛋白为ENO1；

5.一种如权利要求1-4任一项所述制备方法制得的分析...

【技术特征摘要】

1.一种分析蛋白-dcvsh加合物的制备方法，其特征在于，其包括以下步骤：

2.如权利要求1所述分析蛋白加合物的制备方法，其特征在于：其还包括步骤s3，将所述分析蛋白-dcvsh加合物经过胰蛋白酶酶解后，通过质谱分析检测确定所述分析蛋白-dcvsh加合物的加合水平。

3.如权利要求1所述分析蛋白加合物的制备方法，其特征在于：所述分析蛋白包括：eno1、aldh1a1、adh1a中的一种或两种以上的组合。

4.如权利要求1所述分析蛋白加合物的制备方法，其特征在于：若所述分析蛋白为eno1；

【专利技术属性】
技术研发人员：任晓虎，黄海燕，刘建军，杨晨，林玲玲，李国威，林泽群，
申请(专利权)人：深圳市疾病预防控制中心深圳市卫生检验中心，深圳市预防医学研究所，
类型：发明
国别省市：