核酸序列特异性的靶标切割等温指数扩增方法技术

本发明专利技术公开了用于靶核酸片段扩增的试剂盒及其应用。该试剂盒包括正向gDNA、反向gDNA、正向扩增引物、反向扩增引物、Tthargonaute核酸内切酶和聚合酶，所述正向gDNA和所述反向gDNA特异性结合于靶核酸片段的相对链，且两者3’端指向彼此，能够指导所述Tthargonaute核酸内切酶切割包含所述靶核酸片段的核酸分子，所述正向gDNA和所述反向gDNA不能完全互补；正向扩增引物的序列含有与所述正向gDNA相同的序列，反向扩增引物的序列含有与所述反向gDNA相同的序列，所述正向扩增引物和反向扩增引物能够在所述聚合酶作用下扩增所述靶核酸片段。该试剂盒可以用于核酸扩增、实时的荧光检测等。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及用于靶核酸片段特异性指数级扩增的试剂盒及其应用。

技术介绍

1、核酸分子体外扩增技术是开展分子生物学研究的基础。随着生物技术的发展,建立一套灵敏、快速和高特异性的核酸扩增技术一直是研究工作者探讨的问题。在聚合酶链式反应(pcr)以其灵敏性和特异性而广泛应用的基础上，新的核酸扩增模式也不断涌现。现有核酸扩增技术根据其特点可分为两类：第一类是靶核酸的直接扩增，另一类是信号放大扩增。根据是否需要温度循环也可分为两类：一类是非等温扩增，另一类是等温扩增体系。

2、目前本专业研究工作者熟知的扩增技术有：pcr、lamp、rpa等。这些技术各有自己的优缺点，如pcr扩增技术灵敏度高、特异性好，且检测时间越来越短，但仍然需要昂贵的专业设备进行扩增与检测。而lamp扩增技术与rpa扩增技术则是在等温扩增技术种类中，产业转化应用率最高，表现较为优异的技术。其中lamp扩增技术最大的特点是可以兼顾灵敏度、特异性和检测速度的同时，实现一种无需专业设备的简易检测，但lamp引物的设计难度远高于pcr和rpa等扩增技术，且对设计引物的靶标核酸本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.用于靶核酸片段扩增的试剂盒，其特征在于：包括正向gDNA、反向gDNA、正向扩增引物、反向扩增引物、Tth argonaute核酸内切酶和聚合酶，

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：

4.根据权利要求1-3任一所述的试剂盒，其特征在于：所述正向gDNA特异性结合于靶核酸片段的结合区域和所述反向gDNA特异性结合于靶核酸片段的结合区域不重叠。

5.根据权利要求1-4任一所述的试剂盒，其特征在于：所述聚合酶为Bst DNA聚合酶。

6.权利要求1-5任一所述的试剂盒在如...

【技术特征摘要】

1.用于靶核酸片段扩增的试剂盒，其特征在于：包括正向gdna、反向gdna、正向扩增引物、反向扩增引物、tth argonaute核酸内切酶和聚合酶，

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：

4.根据权利要求1-3任一所述的试剂盒，其特征在于：所述正向gdna特异性结合于靶核酸片段的结合区域和所述反向gdna特异性结合于靶核酸片段的结合区域不重叠。

5.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈燕旌，张岩，边素莹，张诚，董镇赫，李光辉，周志雄，
申请(专利权)人：首都体育学院，
类型：发明
国别省市：