一种适应于盐碱地耐高温复合微生物菌剂的制备方法及应用技术

本发明专利技术涉及农业生物技术领域，具体涉及一种适应于盐碱地耐高温复合微生物菌剂的制备方法及应用，包括以下步骤：S1：获取提高微生物抗逆性的基因序列；S2：对S1步骤中克隆的枸杞LbVP基因序列进行密码子优化；S3：合成S2步骤中优化后的LbVP基因序列；S4：采用同源重组技术将S3步骤中构建好的含有优化LbVP基因的pET28a载体转化到枯草芽孢杆菌感受态细胞中；S5：培养转化后的枯草芽孢杆菌，以产生含有LbVP基因的种子液。本发明专利技术，通过改良盐碱土壤、减少化学肥料和农药的使用，以及提高作物产量和品质，为实现农业生产的环境友好、高效率和可持续性提供了一种创新解决方案。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及农业生物，尤其涉及一种适应于盐碱地耐高温复合微生物菌剂的制备方法及应用。

技术介绍

1、盐碱土壤不仅影响作物的生长，降低土壤的肥力，还导致农业生产效率和作物品质的下降，此外，传统的农业生产方式过分依赖化学肥料和农药，虽然短期内能提高产量，但长期来看会造成土壤结构破坏、生态失衡，以及对环境的负面影响，因此，如何有效改良盐碱土壤、提高土壤肥力，同时减少化学肥料和农药的使用，成为农业可持续发展面临的重要技术难题。

2、当前，生物技术在农业生产中的应用为解决上述问题提供了新的思路，其中，利用微生物菌剂改良土壤性质、提高作物产量和抗逆性已成为研究的热点，然而，现有的微生物菌剂在盐碱地应用时面临诸多挑战，如菌种的耐盐碱性和高温稳定性不足，限制了其在广泛的盐碱土壤条件下的有效应用，此外，如何确保微生物菌剂的长期稳定性和生物活性，以及如何实现微生物菌剂的大规模生产和应用，也是当前技术需要解决的难题。

技术实现思路

1、基于上述目的，本专利技术提供了一种适应于盐碱地耐高温复合微生物菌剂的制备方法及应用本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种适应于盐碱地耐高温复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种适应于盐碱地耐高温复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述S1中夏枸杞LbVP基因的克隆包括使用具有15-25碱基长度的预设引物对目标基因进行PCR扩增，扩增温度为94-98℃进行变性，50-60℃退火，72-74℃延伸，测序准确率将达到99％以上，所述预设引物为前向引物和反向引物。

3.根据权利要求2所述的一种适应于盐碱地耐高温复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述S2进行密码子优化是用于提高基因在枯草芽孢杆菌中的表达效率至少20％，并通过改变优化后...

【技术特征摘要】

1.一种适应于盐碱地耐高温复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种适应于盐碱地耐高温复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述s1中夏枸杞lbvp基因的克隆包括使用具有15-25碱基长度的预设引物对目标基因进行pcr扩增，扩增温度为94-98℃进行变性，50-60℃退火，72-74℃延伸，测序准确率将达到99％以上，所述预设引物为前向引物和反向引物。

3.根据权利要求2所述的一种适应于盐碱地耐高温复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述s2进行密码子优化是用于提高基因在枯草芽孢杆菌中的表达效率至少20％，并通过改变优化后基因的gc含量至40％-60％以适应宿主的表达系统。

4.根据权利要求3所述的一种适应于盐碱地耐高温复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述s3中将优化后的lbvp基因构建到pet28a载体上的步骤，使用长度为20-30碱基的同源臂序列，将重组效率达到90％以上。

5.根据权利要求4所述的一种适应于盐...

【专利技术属性】
技术研发人员：林荣辉，林文全，
申请(专利权)人：昆明沃可农生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：