一种受调控的多巴胺能神经细胞及其制备方法与应用技术

技术编号:41328230 阅读:21 留言:0更新日期:2024-05-13 15:06
本发明专利技术涉及一种受调控的多巴胺能神经细胞及其制备方法与应用,该制备方法包括对诱导神经干细胞进行基因编辑,使其表达兴奋性受体hM3Dq或抑制性受体hM4Di,得到编辑后的诱导神经干细胞;对所述编辑后的诱导神经干细胞进行分化培养,使其表达多巴胺能神经细胞的标志物,即制备得到受调控的多巴胺能神经细胞。通过该制备方法可在体外高效率定向分化得到多巴胺能神经细胞,且CNO可调控其细胞功能;将该细胞移植入帕金森病小鼠模型中可在脑内分化为中脑A9区域多巴胺能神经元,改善帕金森病小鼠行为学,并且受到CNO远程调控。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医学,具体涉及一种受调控的多巴胺能神经细胞及其制备方法与应用


技术介绍

1、帕金森病(parkinson’s disease, pd)是全球第二大发病率的神经退行性疾病,具有庞大的发病人群。pd的发病病理是中脑黑质多巴胺能细胞的减少。因此,利用干细胞的替代治疗pd是目前研究治疗方案的重点。

2、在神经系统干细胞领域内,干细胞向多巴胺能(dopamine,da)神经元分化能力、分化效率、体内存活率、临床安全性、供体组织的可用性和伦理问题等一直是研究者们关心的重点。研究者们已经研究出各种不同类型的细胞,如胎脑细胞、胚胎干细胞(esc)、诱导多能干细胞(ipsc)、间充质干细胞(msc)等。其中esc、ipsc是目前神经系统应用最广泛的干细胞。他们可以分化为多种细胞类型,其中包括多巴胺能神经元前体细胞(dap),为应用于帕金森病的干细胞治疗提供了基础。但esc、ipsc的应用可能会增加肿瘤发生的风险。

3、近日来,诱导神经干细胞来源的多巴胺能前体细胞(induced neural stem cell-derived d本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种受调控的多巴胺能神经细胞的制备方法,其特征在于,包括对诱导神经干细胞进行基因编辑,使其表达兴奋性受体hM3Dq或抑制性受体hM4Di,得到编辑后的诱导神经干细胞;对所述编辑后的诱导神经干细胞进行分化培养,使其表达多巴胺能神经细胞的标志物,即制备得到受调控的多巴胺能神经细胞。

2.如权利要求1所述的受调控的多巴胺能神经细胞的制备方法,其特征在于,所述标志物包括FoxA2、NURR1、TH、Tuj1中的至少一种。

3.如权利要求1所述的受调控的多巴胺能神经细胞的制备方法,其特征在于,所述分化培养的步骤包括:对所述编辑后的诱导神经干细胞依次进行以下培养:

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【技术特征摘要】

1.一种受调控的多巴胺能神经细胞的制备方法,其特征在于,包括对诱导神经干细胞进行基因编辑,使其表达兴奋性受体hm3dq或抑制性受体hm4di,得到编辑后的诱导神经干细胞;对所述编辑后的诱导神经干细胞进行分化培养,使其表达多巴胺能神经细胞的标志物,即制备得到受调控的多巴胺能神经细胞。

2.如权利要求1所述的受调控的多巴胺能神经细胞的制备方法,其特征在于,所述标志物包括foxa2、nurr1、th、tuj1中的至少一种。

3.如权利要求1所述的受调控的多巴胺能神经细胞的制备方法,其特征在于,所述分化培养的步骤包括:对所述编辑后的诱导神经干细胞依次进行以下培养:

4.如权利要求1所述的受调控的多巴胺能神经细胞的制备方法,其特征在于,所述基因编辑的方法包括:采用crispr/cas9技术向所述诱导神经干细胞的aavs1位点敲入表达兴奋性受体hm3dq或抑制性受体hm4di;

5.如权利要求4所述的受调控的多巴胺能神经细胞的制备方法,其特征在于,所述抑制性受体hm...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈志国韩德强王雪瑶
申请(专利权)人:首都医科大学宣武医院
类型:发明
国别省市:

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