一种包含口蹄疫抗原的重组大肠杆菌检测培养基及其方法技术

本发明专利技术属于微生物定量检测领域，具体涉及一种包含口蹄疫抗原的重组大肠杆菌检测培养基及其方法。利用本发明专利技术的检测培养基，可在短期内提高菌体的生长速度，可用于重组菌发酵生产过程中活菌数量的快速半定量检测，扩大了活菌检测的范围，提升了检测的能力。利用该半定量检测方法，在保证试验结果准确、稳定的基础上，节省了检测时间，将传统活菌数检测的时间由1～2天缩短为3h左右，通过快速测定活菌浓度，可以尽快了解菌体的生长状态，以便及时调整并控制后期发酵的工艺参数，提高目标物的转化收率，减少发酵过程中依据经验调控参数的盲目性；并避免了因检测周期长而导致发酵失败的情况，节约了实验成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物定量检测领域，具体涉及一种包含口蹄疫抗原的重组大肠杆菌检测培养基及其方法。

技术介绍

1、大肠杆菌具有生长快速、培养成本低、遗传背景清楚等特点，已被广泛地应用于重组蛋白类药物的表达和生产。近年来，几种基于大肠杆菌表达的基因工程疫苗已投入市场或进入临床研究，显示了大肠杆菌表达系统在疫苗研发中良好的应用前景。大肠杆菌基因工程疫苗的制备工艺是由许多相对独立的工艺单元构成的，其中良好的发酵过程对外源蛋白至关重要，直接影响到产品的质量和生产成本。在发酵过程中活菌数的准确测定，是对产品进行质量控制、评价以及工艺改进的基础。目前，国内外检测菌体数量最常用的方法是平板菌落计数法，该方法通常需在37℃恒温培养24～48h获得结果，难以满足发酵过程中菌体数量快速检测的需求。因此，为克服这一缺陷，需开发一种新的大肠杆菌活菌数快速检验的方法。

2、亚甲基蓝是一种暗绿色并略带金属光泽的粉末状有机物，作为一种氧化还原指示剂，在溶液中通过一步双电子转移历程改变自身结构而使溶液呈现颜色变化。在细菌培养液中，由于好氧性细菌的活动使溶解氧含量逐渐下降，好氧性细本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组大肠杆菌培养基，其特征在于，包括如下组分：胰蛋白胨8～20g/L、酵母浸粉8～20g/L、葡萄糖8～20g/L、磷酸盐5.3～7.7g/L、KCl 0.4～0.8g/L、钠盐4～6.0g/L、镁盐0.3～0.7g/L、NH4Cl 0.3～0.7g/L和卡那霉素50μg/mL。

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的磷酸盐包括Na2HPO4、KH2PO4、K2HPO4中的任意一种或几种的组合，优选地，所述的磷酸盐为Na2HPO4和KH2PO4；优选地，所述的钠盐包括NaCl、Na2CO3、NaHCO3中的任意一种或几种的组合，更优选地，所述钠盐为NaCl...

【技术特征摘要】

1.一种重组大肠杆菌培养基，其特征在于，包括如下组分：胰蛋白胨8～20g/l、酵母浸粉8～20g/l、葡萄糖8～20g/l、磷酸盐5.3～7.7g/l、kcl 0.4～0.8g/l、钠盐4～6.0g/l、镁盐0.3～0.7g/l、nh4cl 0.3～0.7g/l和卡那霉素50μg/ml。

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的磷酸盐包括na2hpo4、kh2po4、k2hpo4中的任意一种或几种的组合，优选地，所述的磷酸盐为na2hpo4和kh2po4；优选地，所述的钠盐包括nacl、na2co3、nahco3中的任意一种或几种的组合，更优选地，所述钠盐为nacl；

3.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，培养基为：胰蛋白胨15g/l、酵母浸粉15g/l、葡萄糖15g/l、na2hpo4 6g/l、kh2po4 0.5g/l、kcl 0.6g/l、nacl 5g/l、mgso4 0.5g/l、nh4cl 0.5g/l。

4.根据权利要求1-3任一项所述的培养基，其特征在于，所述培养基ph值为6.8～7.2；优选地，所述培养基ph值为7.0。

5.一种重组大肠杆菌检测培养基，其特征在于，所述培养基包含权利要求1-4中任一项所述的培养基和亚甲基蓝；优选地，所述亚甲基蓝的质量体积浓度范围为：0.00625‰～0.025‰；更优选地，所述亚甲基蓝的质量体积浓度为：0.0125‰。

6.一种重组大肠杆菌活...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺笋，任方，赵毅，杨红霞，刘帆，
申请(专利权)人：天康生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：