【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于纳米材料，具体涉及一种肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌纳米诊疗剂及其制备方法及其制备方法和应用。
技术介绍
1、三阴性乳腺癌以雌激素受体、孕酮受体和人表皮生长因子受体2表达缺乏为特征，是目前唯一缺乏靶向针对性治疗的乳腺癌亚型，具有发病年龄年轻，转移潜能大，复发率高，总生存率低的特点。目前，手术结合化疗、放疗辅助治疗是三阴性乳腺癌主要的治疗手段，存在机体创伤大、肿瘤耐药以及复发转移率高等问题，患者预后较差。因此，亟需发展安全、高效的针对三阴性乳腺癌的治疗新策略。
2、光动力治疗因其优异的时空可控性、无耐药性及低毒性，此外光动力治疗引发肿瘤免疫原性坏死激活免疫系统，是一种极具应用前景的肿瘤治疗手段。目前，三阴性乳腺癌光动力治疗面临的瓶颈问题在于三阴性乳腺癌普遍存在以胶原纤维增加为标志的高纤维化。肿瘤组织致密而僵硬的基质成分，包括细胞外基质、成纤维细胞、内皮细胞和其分泌的一些因子等构成了三阴性乳腺癌的物理屏障。高纤维化的肿瘤基质及高组织液渗透压致使光敏剂难以进入肿瘤深层组织，导致光动力治疗效果不理想。
3、另外，药物在复杂的肿瘤微环境中的作用过程缺乏可视化监控，对其作用机制无法精准判断。对肿瘤微环境响应性的准确成像可以在治疗过程中对肿瘤进行实时检测和无创评估，指导临床在光动力治疗过程中治疗时间、光功率、光照区域的选择，最终有效提高疗效。近年来，随诊纳米医学的快速发展，通过各种形式装载成像分子和/或抗肿瘤药物的纳米诊疗剂被开发出来，为精准诊疗带来了新的希望。因此，设计构建一种功能化的纳米诊疗剂，有效调节
技术实现思路
1、为解决上述问题，本专利技术公开了一种新型肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌纳米诊疗剂及其制备方法，可实现有效降低三阴性乳腺癌肿物理屏障抵抗，改善光敏剂在肿瘤深部的渗透，增强肿瘤光动力免疫疗效并实现肿瘤微环境响应性mr/近红外荧光双模态成像监测疗效。
2、为达到上述目的，本专利技术的技术方案如下：
3、本专利技术提供了一种新型肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌诊疗剂，所述诊疗剂包括含以可变形的介孔有机氧化硅/二氧化锰复合纳米颗粒作为载体，光敏剂ce6及盘状结构域受体1抑制剂ddr1-in-1以自组装的方式修饰到介孔有机氧化硅/二氧化锰复合纳米颗粒上；所述可变形的介孔有机氧化硅/二氧化锰复合纳米颗粒通过介孔有机氧化硅纳米颗粒与与高锰酸钾溶液反应制备；所述介孔有机氧化硅纳米颗粒是以表面活性剂和硅源通过溶胶凝胶法制备。
4、所述修饰了ce6及ddr1-in-1的介孔有机氧化硅/二氧化锰复合纳米颗粒缩写为cd-mmons，粒径约205nm±22nm；
5、所述可变形的介孔有机氧化硅/二氧化锰复合纳米颗粒缩写为mmons，粒径约200nm±15nm；
6、所述可变形的介孔有机氧化硅/二氧化锰复合纳米颗粒由介孔有机氧化硅纳米颗粒与高锰酸钾溶液混合制得，介孔有机氧化硅纳米颗粒(mesoporous organosilicananopaticles, mons)粒径约180nm±15nm；
7、本专利技术还提供了一种新型肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌诊疗剂的制备方法，包括以下步骤：
8、步骤（1）：介孔有机氧化硅纳米颗粒的制备，将表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵（ctab）、浓氨水加入到水和乙醇混合液中，在32～36℃水浴的条件下搅拌1～2 h至形成澄清的混合液；
9、步骤（2）：将四乙氧基硅烷（teos）和三乙氧基甲硅烷基（tets）混匀后迅速加入至步骤（1）中所得到的澄清的混合液中，继续反应20～36 h，离心收集白色沉淀，使用乙醇和水分别洗3次以去除残留的反应试剂，最后将得到的白色产物分散于乙醇溶液中，在50～65℃水浴条件下，搅拌3～12 h，离心并重复此过程3次以去除残留在孔道中的表面活性剂，即可得到介孔有机氧化硅纳米颗粒；
10、步骤（3）：介孔有机氧化硅/氧化锰纳米颗粒（mmons）的制备，将步骤（2）得到的的介孔有机氧化硅纳米颗粒分散至聚乙烯亚胺溶液中，5～35 ℃摇床反应2～6 h；将得到的白色产物离心并使用水清洗3次。
11、步骤（4）：将步骤（3）所得的白色产物与高锰酸钾共同分散至水溶液中，在33～36℃水浴条件下，温和搅拌24～36 h，得到棕色反应产物a，将棕色反应产物a再分散至水中，在33～36℃水浴搅拌的条件下，缓慢逐滴滴加油酸继续反应24～30 h。最终，通过离心收集得到的氧化锰掺杂的介孔有机氧化硅氧化锰复合纳米颗粒并使用乙醇和水各洗两次，即可得到介孔有机氧化硅/氧化锰复合颗粒悬液（manganese oxide hybridized mesoporousorganosilica nanoparticles，mmons）。
12、步骤（5）：修饰了ce6及ddr1-in-1的介孔有机氧化硅/二氧化锰复合纳米颗粒的制备，将ce6和ddr1-in-1共同溶解于n,n-二甲基甲酰胺(dmf)溶液中，超声的情况下缓慢滴入步骤（4）得到的介孔有机氧化硅/氧化锰复合颗粒（mmons）水溶液，通过自组装的方式将ce6及ddr1-in-1修饰到mmons纳米颗粒上，然后将混合溶液透析2～5 h，得到修饰了ce6和ddr1-in-1的介孔有机氧化硅氧化锰复合纳米颗粒（ce6&ddr1-in-1-modified mmons，cd-mmons），即最终的新型三阴性乳腺癌诊疗剂。
13、进一步地，步骤（1）中，所述ctab与浓氨水的摩尔比为1：20～50，ctab与四乙氧基硅烷的摩尔比为1：2～6；所述水、乙醇体积比为1：0.42～0.5。所述氨水所含nh3的质量百分浓度为23～29%。
14、进一步地，步骤（2）中，所述teos和所述tets摩尔比为1：（1.6～3.1）。
15、进一步地，步骤（3）中，所述所述聚乙烯亚胺溶液浓度为8～14 mg/ml。
16、进一步地，步骤（3）中，介孔有机氧化硅纳米颗粒与聚乙烯亚胺的质量比为1:0.5～1.2；摇床反应的温度为5～35℃，摇床反应的时间为1～8 h。
17、进一步地，步骤（4）中，所述高锰酸钾的浓度为1.8～2.2 mg/ml，高锰酸钾与步骤（3）中介孔有机氧化硅纳米颗粒的质量比为1:1.5～2；所述油酸的质量百分浓度90～99%；油酸与棕色反应物a的质量比为1：40~100。
18、进一步地，步骤（5）中，所述ce6和ddr1-in-1的摩尔比为1:（0.95～1.1）；有机氧化硅/氧化锰复合纳米颗粒与ce6的质量比为1：0.1～0.6；。
19、进一步地，步骤（2）、（3）、（4）中，所述各项产物离心转速均为10,000～12000rpm，时间为5～10min。
20、本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌纳米诊疗剂，其特征在于，以可变形介孔有机氧化硅/二氧化锰复合纳米颗粒作为载体， Ce6及DDR1-IN-1以自组装的方式修饰到介孔有机氧化硅/二氧化锰复合纳米颗粒上；
2.一种如权利要求1所述的一种新型肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取Ce6和DDR1抑制剂溶于N,N-二甲基甲酰胺中得到混合溶液，超声的情况下缓慢滴加可变形介孔有机氧化硅/氧化锰复合纳米颗粒水溶液，透析，得到修饰了Ce6和DDR1-IN-1的介孔有机氧化硅氧化锰复合纳米颗粒。
3.根据权利要求2所述的一种新型肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，Ce6和DDR1抑制剂的摩尔比为1:0.95～1；可变形介孔有机氧化硅/氧化锰复合纳米颗粒与 Ce6的质量比为1：0.1～0.6。
4.根据权利要求2所述的一种新型肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，可变形介孔有机氧化硅/氧化锰复合纳米颗粒的制备方法，包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的一种新型
6.根据权利要求4所述的一种新型肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，步骤S01中，高锰酸钾与介孔有机氧化硅纳米颗粒的质量比为1:1.5～2；高锰酸钾的浓度为1.8～2.2 mg/mL。
7.根据权利要求4所述的一种新型肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，步骤S02中，油酸与棕色反应物A的质量比为1：40~100。
8.根据权利要求4所述的一种新型肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，步骤S01中，介孔有机氧化硅纳米颗粒的制备方法，包括以下步骤：将十六烷基三甲基溴化铵、浓氨水加入到水和乙醇混合液中，32～36℃水浴条件下搅拌至形成澄清的混合液；将四乙氧基硅烷和三乙氧基甲硅烷基混匀后迅速加入至中所得到的澄清的混合液中反应，乙醇萃取后得到介孔有机氧化硅纳米颗粒。
9.根据权利要求8所述的一种新型肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，所述四乙氧基硅烷和三乙氧基甲硅烷基的摩尔比为1：1.6～3.1。
10.根据权利要求8所述的一种新型肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，所述十六烷基三甲基溴化铵与浓氨水的摩尔比为1：20～50；十六烷基三甲基溴化铵与四乙氧基硅烷的摩尔比为1：2～6。
...【技术特征摘要】
1.一种肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌纳米诊疗剂，其特征在于，以可变形介孔有机氧化硅/二氧化锰复合纳米颗粒作为载体， ce6及ddr1-in-1以自组装的方式修饰到介孔有机氧化硅/二氧化锰复合纳米颗粒上；
2.一种如权利要求1所述的一种新型肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取ce6和ddr1抑制剂溶于n,n-二甲基甲酰胺中得到混合溶液，超声的情况下缓慢滴加可变形介孔有机氧化硅/氧化锰复合纳米颗粒水溶液，透析，得到修饰了ce6和ddr1-in-1的介孔有机氧化硅氧化锰复合纳米颗粒。
3.根据权利要求2所述的一种新型肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，ce6和ddr1抑制剂的摩尔比为1:0.95～1；可变形介孔有机氧化硅/氧化锰复合纳米颗粒与 ce6的质量比为1：0.1～0.6。
4.根据权利要求2所述的一种新型肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，可变形介孔有机氧化硅/氧化锰复合纳米颗粒的制备方法，包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的一种新型肿瘤微环境触发的三阴性乳腺癌纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，步骤s01中，介孔有机氧化硅纳米颗粒与聚乙烯亚胺的质量比为1:0.5～1.2；摇床反应的温度为5～35℃，摇床反应的时间为1～...
【专利技术属性】
技术研发人员：辛小燕，张冰，彭昕，陈昆，孙艺，苏彤，闫安，张艳秋，邹超，
申请(专利权)人：南京鼓楼医院，
类型：发明
国别省市：
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