【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医学生物检测，涉及circrnas作为分子标志物在胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断中的应用，尤其涉及circrnas中的circ_has_0119043在制备胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断试剂或试剂盒中的应用。
技术介绍
1、放射性肺损伤是胸部肿瘤接受放疗后最常见的严重并发症和剂量限制因素。研究显示，约40％的患者接受胸部放疗后会发生无症状放射性肺损伤，10％-30％会出现严重的放射性肺纤维化。放射性肺损伤是一个复杂的病理过程，包括各种分子和细胞相互作用，最终导致成纤维细胞大量增殖、积累和分化，从而导致细胞外基质过度沉积和肺纤维化。放射性肺损伤不仅在临床实践中限制了放疗剂量，而且严重威胁患者的生活质量。早期发现和干预有助于改善患者的临床预后。因此，迫切需要寻找新的方法来预测放射性肺损伤并采取有效的预防措施。
2、最近的研究表明，环状rna(circrnas)与放射性肺损伤的发病机制密切相关。circrnas是真核生物中一类封闭的环状rna分子。几十年前，circrna被认为是剪接体介导的剪接错误的副产物，或者是从内含子分支脱支中逃脱的中间产物。随着高通量测序技术和计算分析的发展，大量研究发现，circrna在正常情况和疾病发生中均发挥着重要作用，尤其是circrnas可以作为与放射抗性和放射敏感性相关的多种生物过程的调节剂。与原始细胞相比，辐射后的细胞中有多种circrnas出现差异表达，进一步强调了circrna在调节癌细胞对放疗的反应和保护正常细胞免受相关副作用方面的作用。另外，circrna具有
3、circ_has_0119043位于人类基因组上的2号染色体的212635948-212646260区域，全长10312，剪接后序列长度10312，最佳转录本是enst00000342788.4，基因名称是erbb4，具体信息参见图1。目前对于circ_has_0119043的研究远不够深入，在放射性肺损伤中的应用尚未见相关报道。因此，寻找胸部放疗患者发生放射性肺损伤早期circrnas标志物，进一步了解circrnas在胸部放疗患者发生放射性肺损伤中的生物学功能具有重要意义。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供胸部放疗患者发生放射性肺损伤的诊断标志物，本专利技术的目的也在于提供circrnas中的circ_has_0119043的新用途，即在制备胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断试剂盒中的应用。
2、本专利技术通过比较胸部肿瘤患者接受放疗后发生放射性肺损伤患者和不发生放射性肺损伤患者之间血浆样本中circ_has_0119043的表达水平，研究血浆circ_has_0119043与放射性肺损伤发病风险之间的关系，并为放射性肺损伤的预测和临床诊断提供生物标志物。
3、本专利技术的第一方面，提供了circ_has_0119043作为胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断标志物的应用。
4、本专利技术的第二方面，提供了circ_has_0119043在制备胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断试剂或诊断试剂盒中的应用。
5、其中，所述的诊断试剂为检测生物样品中circ_has_0119043含量的试剂，所述的诊断试剂盒，包含了检测生物样品中circ_has_0119043含量的试剂。
6、所述的检测生物样品中circ_has_0119043的含量的试剂，选自：对circ_has_0119043具有检测特异性的pcr引物。
7、所述的对circ_has_0119043具有检测特异性的pcr引物如下表1所示：
8、表1circ_has_0119043具有检测特异性的pcr引物
9、
10、所述的生物样品选自接受胸部常规放疗患者的外周血。
11、本专利技术的第三方面，提供了一种胸部放疗患者发生放射性肺损伤的诊断试剂盒，该试剂盒包含了检测生物样品中circ_has_0119043含量的试剂。
12、本专利技术所述的胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断试剂盒由逆转录系统、引物系统和扩增系统组成，所述的引物系统包括如seq id no:1～2所示的pcr引物。
13、本专利技术的第四方面，提供了一种利用上述诊断试剂盒进行胸部放疗患者发生放射性肺损伤检测的方法，如下：
14、a.将待检血液样本常温离心，获取血浆，提取血浆中的总rna并测定血浆纯度；
15、b.对步骤a中的总rna进行逆转录，得到cdna；
16、c.采用实时定量pcr技术对circ_has_0119043的拷贝数进行定量检测，检测过程中所用引物如seq id no:1～2所示。
17、数据均采用spss16.0处理，采用平均值±标准差的方式表示。
18、通过生物信息学分析，发现circ_has_0119043在胸部放疗患者发生放射性肺损伤中显著高表达，roc分析表明，血浆中circ_has_0119043水平相对表达水平<1.967的放疗患者具有较高的发病风险，敏感性是87.5％，特异性是92.31％，曲线下面积是0.9549。上述结果提示circ_has_0119043在胸部放疗患者发生放射性肺损伤细胞中的特异性和灵敏性高，可应用于胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断。
19、本专利技术的有益保障及效果如下：
20、就技术而言，circ_has_0119043的检测本质上是一种血液基因组的定量pcr检测，具有操作简便、检测灵敏、特异性好、重复性高等特点，现今已越来越多地被应用于临床检验技术中。
21、此外，本专利技术所涉及的指标circ_has_0119043在胸部放疗发生放射性肺损伤患者中的表达显著上调，且差异具有统计学意义(p<0.05)，其临床参考价值和可信度较高，不仅能够提高胸部放疗患者发生放射性肺损伤的检出率和准确率，对于其临床治疗有着重大的意义，而且只需要采集检测者的血液即可获得检测结果，也避免了采用影像学手段进行检查时，患者需根据检测设备的要求提前进行准备的麻烦以及受到仪器辐射危害的风险。
22、本专利技术提供了一种以定量pcr为基础的胸部放疗患者发生放射性肺损伤检测试剂盒，可以通过检测病人外周血基因组rna中circ_has_0119043的表达丰度来对胸部放疗患者发生放射性肺损伤做出诊断。其检测方法特别简便、周期短、灵敏度高，是现行检测试剂的有效补充。
23、此外，本专利技术首次发现同样接受常规胸部放疗后，发生放射性肺损伤的患者和不发生放射性肺损伤的患者血浆circ_has_0119043的表达水平不同，血浆中circ_has_0119043可作为一个独立的发病风险预测因子，为评估胸部放疗后发生放射性肺损伤的发病和临床防治提供参考。
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1.circ_has_0119043在制备胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断试剂或诊断试剂盒中的应用。
2.根据权利要求1所述的circ_has_0119043在制备胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断试剂或诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述的诊断试剂为检测生物样品中circ_has_0119043含量的试剂。
3.根据权利要求1所述的circ_has_0119043在制备胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断试剂或诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述的诊断试剂盒包含了检测生物样品中circ_has_0119043含量的试剂。
4.根据权利要求2或3所述的circ_has_0119043在制备胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断试剂或诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述的检测生物样品中circ_has_0119043含量的试剂选自：对circ_has_0119043具有检测特异性的PCR引物。
5.根据权利要求4所述的circ_has_0119043在制备胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断试剂或诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述的对circ_ha
6.根据权利要求2或3所述的circ_has_0119043在制备胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断试剂或诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述的生物样品获自对象的外周血。
7.一种胸部放疗患者发生放射性肺损伤的诊断试剂盒，该试剂盒包含了检测生物样品中circ_has_0119043含量的试剂。
8.根据权利要求7所述的一种胸部放疗患者发生放射性肺损伤的诊断试剂盒，其特征在于，所述的诊断试剂盒是由逆转录系统、引物系统和扩增系统组成，所述的引物系统包括如SEQ ID NO.1～2所示的PCR引物。
...【技术特征摘要】
1.circ_has_0119043在制备胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断试剂或诊断试剂盒中的应用。
2.根据权利要求1所述的circ_has_0119043在制备胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断试剂或诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述的诊断试剂为检测生物样品中circ_has_0119043含量的试剂。
3.根据权利要求1所述的circ_has_0119043在制备胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断试剂或诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述的诊断试剂盒包含了检测生物样品中circ_has_0119043含量的试剂。
4.根据权利要求2或3所述的circ_has_0119043在制备胸部放疗患者发生放射性肺损伤诊断试剂或诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述的检测生物样品中circ_has_0119043含量的试剂选自：对circ_has_0119043具有检...
【专利技术属性】
技术研发人员：秦宏冉，崔建国，高福，杨彦勇，尹基忠，徐孝华，蔡建明，徐鑫，
申请(专利权)人：上海市肺科医院上海市职业病防治院，
类型：发明
国别省市：
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