【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医学检测，尤其是涉及一种人类免疫缺陷病毒i型p24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒及应用。
技术介绍
1、人类免疫缺陷病毒，又称艾滋病病毒，艾滋病是人类免疫缺陷病毒感染的最后阶段。进入艾滋病期，艾滋病病毒感染会引起各种机会性感染和肿瘤的发生，这些并发症会对人的健康生活带来影响，甚至可能会威胁生命。
2、现有的技术中，如公开号为cn116539876a的中国专利，其公开了一种基于乳胶法检测人类免疫缺陷病毒p24抗原及抗体的试剂盒及其制备方法，一种基于乳胶法检测人类免疫缺陷病毒p24抗原及抗体的试纸条，试纸条包括底板、样品垫、乳胶垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，样品垫、乳胶垫、硝酸纤维素膜和吸水垫按层析方向顺次搭接粘贴在底板上，硝酸纤维素膜上包被有一条质控线以及三条检测线，质控线包被有羊抗鼠igg，三条检测线分别包被有gp36抗原、gp41抗原、p24单克隆抗体2；乳胶垫上包被有乳胶标记的gp41、gp36、gp120混合抗原和p24单克隆抗体1；本申请提供的人类免疫缺陷病毒p24抗原及抗体检测试纸条，可实现1份样本同时检测hiv抗体和p24抗原，并可区分hiv抗体为1型或2型。
3、上述中的现有技术方案存在以下缺陷：虽然上述的基于乳胶法检测人类免疫缺陷病毒p24抗原及抗体的试剂盒及其制备方法，能够区分hiv-1型/hiv-2型感染，但是操作步骤复杂、耗时长，并且检测的结果不准确。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的是提供一
2、本专利技术的上述专利技术目的是通过以下技术方案得以实现的：
3、一种人类免疫缺陷病毒i型p24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒，包括试纸条，所述试纸条包括底板、样品垫、胶体金结合垫、保护膜和吸水垫，所述保护膜、所述样品垫、所述胶体金结合垫以及所述吸水垫按层析方向顺次搭接粘贴在所述底板上，所述试纸条上设置有质控线、p24抗原线以及抗体线。
4、作为本专利技术的进一步的技术方案：所述检测试剂盒的工作液包括0.2mol/lk2co3、0.1mol/l pb(1l，ph6.8)、包被液、胶体金复溶液(1l，ph8.0)、结合垫处理液、样品垫处理液。
5、作为本专利技术的进一步的技术方案：所述0.2mol/lk2co3的配制包括以下步骤：k2co32.76g，加纯化水100ml溶解；
6、所述0.1mol/l pb(1l，ph6.8)的配制包括以下步骤：na2hpo4·12h2o20.665g及nah2po4·2h2o 6.599g，先用800ml纯化水将其充分溶解，后定容至1000ml；
7、所述包被液由0.1mol/l pb+2％蔗糖(1l，ph6.8)组成。
8、作为本专利技术的进一步的技术方案：所述胶体金复溶液(1l，ph8.0)的配制包括以下步骤：称取tris 2.42g、bsa 10g、proclin300 0.05ml、蔗糖200g及海藻糖50g，sds-l0.5％，先用800ml纯化水将其充分溶解，调整ph值至8.0，最后定容至1000m；
9、所述结合垫处理液由tris 2.42g、bsa 10g、proclin300 0.05ml、蔗糖100g，吐温20 0.5％组成；
10、所述样品垫处理液由tris 2.42g、聚乙烯吡咯烷酮10g、edta5.8g、bsa 10g、s170.5g、s9 0.5g、酪蛋白5g、吐温20 0.5％、sds-l 3％组成。
11、作为本专利技术的进一步的技术方案：所述检测试剂盒中胶体金的制备包括以下步骤：
12、步骤1、量取100ml纯化水倒入烧杯中，加入搅拌子后，在磁力搅拌器上加热至约40℃；
13、步骤2、加入0.2-0.6％的阿拉伯树胶粉和2m的peg，搅拌均匀；
14、步骤3、加入0.2m的亚硒酸和0.8m的抗坏血酸，至溶液由淡黄色变为橘红色。
15、作为本专利技术的进一步的技术方案：其中，硒标抗体的制备包括以下步骤：利用p24抗体进行标记，抗体标记方法为：用0.2mk2co3将胶体金溶液(100ml)调至ph8.2；
16、制备的胶体金分别加入终浓度为10-30ug/ml的抗体，立即快速混匀，静置10min；
17、然后加入10％bsa约10ml作为稳定剂，使其终浓度为1％，制备的硒标抗体10000rpm，离心10min，弃上清，硒沉淀用复溶液重悬。
18、作为本专利技术的进一步的技术方案：所述胶体金结合垫的制备方法包括以下步骤：用结合垫处理液，处理玻璃纤维，30～37℃条件下干燥18～24小时，干燥保存备用；
19、将制备的硒标抗体铺到胶体金结合垫上，30～37℃条件下干燥6～8小时。
20、作为本专利技术的进一步的技术方案：所述样品垫的制备方法包括以下步骤：用样品垫处理液，处理血清样品垫30～37℃条件下干燥18～24小时，干燥保存备用；
21、组装试纸条，测试国家参考品最低检测限参考品。
22、本专利技术还公开了一种如上述的人类免疫缺陷病毒i型p24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒在化学发光分析仪上的应用。
23、综上所述，本专利技术包括以下至少一种有益技术效果：
24、本专利技术公开了一种人类免疫缺陷病毒i型p24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒及应用，此胶体金检测试剂盒能检测p24抗原，缩短窗口期，比传统检测更早一步，更有利于及早检测，及早发现。比传统检测具备更高的敏感度。其操作步骤简单，耗时短，在20分钟内即可快速获得准确的结果，通过更早地快速准确识别hiv阳性患者，增加病人被发现机会，便于提供快速、恰当的护理。
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1.一种人类免疫缺陷病毒I型P24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒，其特征在于，包括试纸条，所述试纸条包括底板、样品垫、胶体金结合垫、保护膜和吸水垫，所述保护膜、所述样品垫、所述胶体金结合垫以及所述吸水垫按层析方向顺次搭接粘贴在所述底板上，所述试纸条上设置有质控线、P24抗原线以及抗体线。
2.根据权利要求1所述的一种人类免疫缺陷病毒I型P24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒的工作液包括0.2mol/L K2CO3、0.1mol/L PB(1L，pH6.8)、包被液、胶体金复溶液(1L，pH8.0)、结合垫处理液、样品垫处理液。
3.根据权利要求2所述的一种人类免疫缺陷病毒I型P24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒，其特征在于，所述0.2mol/L K2CO3的配制包括以下步骤：K2CO3 2.76g，加纯化水100ml溶解；
4.根据权利要求2所述的一种人类免疫缺陷病毒I型P24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒，其特征在于，所述胶体金复溶液(1L，pH8.0)的配制包括以下步骤：称取Tris2.42g、BS
5.根据权利要求1-4任一项所述的一种人类免疫缺陷病毒I型P24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒中胶体金的制备包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的一种人类免疫缺陷病毒I型P24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒，其特征在于，其中，硒标抗体的制备包括以下步骤：利用P24抗体进行标记，抗体标记方法为：用0.2M K2CO3将胶体金溶液(100ml)调至pH8.2；
7.根据权利要求6所述的一种人类免疫缺陷病毒I型P24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒，其特征在于，所述胶体金结合垫的制备方法包括以下步骤：用结合垫处理液，处理玻璃纤维，30～37℃条件下干燥18～24小时，干燥保存备用；
8.根据权利要求7所述的一种人类免疫缺陷病毒I型P24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒，其特征在于，所述样品垫的制备方法包括以下步骤：用样品垫处理液，处理血清样品垫30～37℃条件下干燥18～24小时，干燥保存备用；
9.一种如权利要求1-8任一项所述的人类免疫缺陷病毒I型P24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒在化学发光分析仪上的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种人类免疫缺陷病毒i型p24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒，其特征在于，包括试纸条，所述试纸条包括底板、样品垫、胶体金结合垫、保护膜和吸水垫，所述保护膜、所述样品垫、所述胶体金结合垫以及所述吸水垫按层析方向顺次搭接粘贴在所述底板上，所述试纸条上设置有质控线、p24抗原线以及抗体线。
2.根据权利要求1所述的一种人类免疫缺陷病毒i型p24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒的工作液包括0.2mol/l k2co3、0.1mol/l pb(1l，ph6.8)、包被液、胶体金复溶液(1l，ph8.0)、结合垫处理液、样品垫处理液。
3.根据权利要求2所述的一种人类免疫缺陷病毒i型p24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒，其特征在于，所述0.2mol/l k2co3的配制包括以下步骤：k2co3 2.76g，加纯化水100ml溶解；
4.根据权利要求2所述的一种人类免疫缺陷病毒i型p24抗原检测用抗体及其胶体金检测试剂盒，其特征在于，所述胶体金复溶液(1l，ph8.0)的配制包括以下步骤：称取tris2.42g、bsa 10g、proclin300 0.05ml、蔗糖200g及海藻糖50g，sds-l 0.5％，先用8...
【专利技术属性】
技术研发人员：王倩倩，王哲，耿禹，
申请(专利权)人：安徽贝金基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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