【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分子生物学检测领域，具体涉及一种用于检测高危型人乳头瘤病毒的组合物及试剂盒。
技术介绍
1、人乳头瘤病毒是一种嗜粘膜和皮肤上皮性病毒，是导致宫颈上皮增生和宫颈癌的主要因素，至今为止，已经鉴定的hpv病毒多达100余种，有30多种可以感染人的生殖道黏膜。宫颈癌的发生和人乳头瘤病毒(以下简称hpv)感染人体有密切的关系，世界卫生组织(who)的调查结果显示99.9％的宫颈癌患者可以检测到hpv感染；国际癌症研究协会(iarc)于1995年宣布：hpv感染是宫颈癌的主要原因。在目前发现的30多种可感染人生殖道黏膜的hpv中，一部分极易导致宫颈癌的发生，称为高危型hpv；who国际癌症研究中心按照致癌能力的大小将hpv各型别分为三类，其中确切致癌的hpv型别包括hpv16、18型。
2、目前，关于hpv感染的检测主要可分细胞学检测和hpv核酸检测。与细胞学检查相比，核酸检测具有敏感度高、对操作人员技术要求低、对hpv感染型别具体分型等特点。在中国，目前已有38家公司、75个hpv检测产品获得cfda注册证，其中有46个产品使用荧光pcr法，11个产品使用pcr-反向点杂交法(包括基因芯片法)，6个产品使用杂交捕获法，剩下的产品使用的方法为：酶切信号放大法、支链dna信号扩增法、恒温扩增荧光法、流式杂交法、表面等离子谐振法、半导体测序法等。现有的应用于高危型人乳头瘤病毒16型及18型的检测荧光信号弱，灵敏度不高。
技术实现思路
1、本专利技术提供一种用于检测高危型人
2、本专利技术的具体技术方案如下：
3、一种用于检测高危型人乳头瘤病毒的组合物，该组合物包括引物对和与其对应的探针，所述探针分别在5′端第1个碱基和第6个碱基进行荧光标记。
4、优选的，所述探针采用如下(1)或(2)中的方法进行标记：
5、(1)在5′端第1个碱基用rox标记，5′端第6个碱基上标记fam；
6、(2)分别在5′端第1个碱基和第6个碱基标记hex。
7、优选的，所述引物对和与其对应的探针用于扩增高危型人乳头瘤病毒的e1区。
8、优选的，所述探针包括hpv16型探针或/和hpv18型探针，hpv16型探针序列如seqid no.05所示：tggttttatgtagaggctgtag，hpv18型探针序列如seq id no.06所示：tgtaatgtatacaacaatcaggcag。
9、优选的，所述引物对包括hpv16型引物对或/和hpv18型引物对，hpv16型引物对如seq id no.01所示：tacgggatgtaatgg，seq id no.02所示：tcattatcatttactata；hpv18型引物对如seq id no.03所示：acagtagtgatactg，seq id no.04所示：ttcctccgcttcct。
10、一种用于检测高危型人乳头瘤病毒的试剂盒，包括前面所述的组合物。
11、进一步的，所述试剂盒还包括缓冲液、taq dna聚合酶、阳性对照品和阴性对照品；所述缓冲液包括如下组分：118.42mm tris-hcl、52.63mm kcl、6.58mm mgcl2、0.66mmdntps。
12、优选的，所述探针的浓度为0.04μm，引物对中每条引物的浓度为0.07～0.08μm。
13、本专利技术提供的组合物应用于高危型人乳头瘤病毒16型及18型的检测，具有荧光信号强，灵敏度高的特点，满足了对高危型人乳头瘤病毒16型、18型感染早期人群的检测，避免了因病毒浓度较低的漏检。采用本专利技术所述的组合物制成的试剂盒具有较强抗干扰能力。
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1.一种用于检测高危型人乳头瘤病毒的组合物，其特征在于该组合物包括引物对和与其对应的探针，所述探针分别在5′端第1个碱基和第6个碱基进行荧光标记。
2.根据权利要求1所述的用于检测高危型人乳头瘤病毒的组合物，其特征在于，所述探针采用如下(1)或(2)中的方法进行标记：
3.根据权利要求1所述的用于检测高危型人乳头瘤病毒的组合物，其特征在于，所述引物对和与其对应的探针用于扩增高危型人乳头瘤病毒的E1区。
4.根据权利要求1至3任一项所述的用于检测高危型人乳头瘤病毒的组合物，其特征在于，所述探针包括HPV16型探针或/和HPV18型探针，HPV16型探针序列如SEQ ID NO.05所示：TGGTTTTATGTAGAGGCTGTAG，HPV18型探针序列如SEQ ID NO.06所示：TGTAATGTATACAACAATCAGGCAG。
5.根据权利要求4所述的用于检测高危型人乳头瘤病毒的组合物，其特征在于，所述引物对包括HPV16型引物对或/和HPV18型引物对，HPV16型引物对如SEQ ID NO.01所示：TACGGGATGTA
6.一种用于检测高危型人乳头瘤病毒的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1至5任一项所述的组合物。
7.根据权利要求6所述的用于检测高危型人乳头瘤病毒的试剂盒，其特征在于，还包括缓冲液、Taq DNA聚合酶、阳性对照品和阴性对照品；所述缓冲液包括如下组分：118.42mMTris-HCl、52.63mM KCl、6.58mM MgCl2、0.66mM dNTPs。
8.根据权利要求6或7所述的用于检测高危型人乳头瘤病毒的试剂盒，其特征在于，所述探针的浓度为0.04μM，引物对中每条引物的浓度为0.07～0.08μM。
...【技术特征摘要】
1.一种用于检测高危型人乳头瘤病毒的组合物，其特征在于该组合物包括引物对和与其对应的探针，所述探针分别在5′端第1个碱基和第6个碱基进行荧光标记。
2.根据权利要求1所述的用于检测高危型人乳头瘤病毒的组合物，其特征在于，所述探针采用如下(1)或(2)中的方法进行标记：
3.根据权利要求1所述的用于检测高危型人乳头瘤病毒的组合物，其特征在于，所述引物对和与其对应的探针用于扩增高危型人乳头瘤病毒的e1区。
4.根据权利要求1至3任一项所述的用于检测高危型人乳头瘤病毒的组合物，其特征在于，所述探针包括hpv16型探针或/和hpv18型探针，hpv16型探针序列如seq id no.05所示：tggttttatgtagaggctgtag，hpv18型探针序列如seq id no.06所示：tgtaatgtatacaacaatcaggcag。
5.根据权利要求4所述的用于检测高危型人乳头瘤病毒的组合物，其特征在于，所述引物对包括hpv...
【专利技术属性】
技术研发人员：李翔，朱威，
申请(专利权)人：基蛋生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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