一种提高蛋白在原核表达系统中表达水平的方法及优化的广谱抗病毒蛋白PA基因技术方案

技术编号:41261113 阅读:11 留言:0更新日期:2024-05-11 09:19
本发明专利技术提供了一种提高蛋白在原核表达系统中表达水平的方法及优化的广谱抗病毒蛋白PA基因,属于蛋白制备技术领域。本发明专利技术利用密码子优化的策略,在不改变氨基酸序列的前提下,对蛋白的基因序列进行优化后测定其在大肠杆菌中的表达水平,结果表明高比例的密码子优化能有效提高蛋白的表达水平;进一步对翻译起始区(TIR)二级结构预测和定点突变验证,结果表明自由能的高低与表达水平高低呈正相关。因此,本发明专利技术开发的方法可以促进目标蛋白在原核系统中的高效表达,为实现蛋白药物在原核系统中的大规模生产,提供了新的优化思路,同时也有助于满足蛋白在医疗和临床中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于蛋白制备,具体涉及一种提高蛋白在原核表达系统中表达水平的方法及优化的广谱抗病毒蛋白pa基因。


技术介绍

1、人类面临着众多不同疾病的困扰,病毒等引起的传染性疾病仍然是严重威胁全球生命健康的重要因素[1]。气候变化、全球化的进程加快等为病毒从自然环境中的溢出甚至在人间大规模传播,创造了有利的条件。与其他微生物相比,病毒往往能够迅速适应新宿主并且传染性强,变异快[2],流感、埃博拉以及严重急性呼吸系统综合征冠状病毒等不同病毒感染引起的疾病,在世界不同的地区频繁发生并蔓延,使得全球公共卫生体系面临着严峻的挑战[1]。rider等通过对宿主抗病毒先天免疫机制的研究,设计构建了一种双链rna(double-stranded rna,dsrna)激活的半胱天冬酶寡聚体(double-stranded rnaactivated caspase oligomerizer,draco),draco由dsrna检测域、凋亡诱导域和转导标签三部分组成。几乎所有的病毒感染细胞以后,病毒在转录和基因组复制过程中都会产生长的dsrna,而未受感染的细胞一般不产生长dsr本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种提高蛋白在原核表达系统中表达水平的方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述密码子优化的方法根据原核表达系统密码子偏好性,在不改变氨基酸种类的情况下,优化基因序列中的碱基种类。

3.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述优化基因序列中的优化碱基种类的数量百分比为25%以上;

4.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述对所述密码子优化后的基因序列的翻译起始区进行改造,提高自由能的方法,包括利用密码子的兼并性对所述翻译起始区的碱基进行同义突变,使所述翻译起始区的二级结构变得更加松散,提高预测自由能数值。...

【技术特征摘要】

1.一种提高蛋白在原核表达系统中表达水平的方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述密码子优化的方法根据原核表达系统密码子偏好性,在不改变氨基酸种类的情况下,优化基因序列中的碱基种类。

3.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述优化基因序列中的优化碱基种类的数量百分比为25%以上;

4.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述对所述密码子优化后的基因序列的翻译起始区进行改造,提高自由能的方法,包括利用密码子的兼并性对所述翻译起始区的碱基进行同义突变,使所述翻译起始区的二级结构变得更加松散,提高预测自由能数值。

5.根据权利要求1~4中任意一项所述方法,其特征在于,所述蛋白的来源包括以下至少一种:...

【专利技术属性】
技术研发人员:赵志虎李秋烨谢德健史姝
申请(专利权)人:中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1