【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于细胞生物学，具体涉及一种提高脐带间充质干细胞免疫调节能力的方法。
技术介绍
1、自身免疫性疾病是一种由于免疫系统应答紊乱而攻击自身正常组织和器官，造成组织器官损伤和功能障碍的炎症性疾病。免疫应答紊乱主要表现为免疫细胞的异常激活、免疫系统的失调、免疫蛋白及抗体的分泌异常。淋巴细胞、免疫细胞以及间充质干细胞都在自身免疫性疾病中发挥着重要作用。且已有研究发现，靶向抑制淋巴细胞的药物无法有效治疗自身免疫性疾病，间充质干细胞却能够缓解自身免疫性疾病的症状。
2、间充质干细胞是一类能够从脐带、脂肪、骨髓等组织中分离获得，具有免疫调节能力的多能干细胞。其中，脐带间充质干细胞是一种从脐带华通氏胶分离出来的一种间充质干细胞，此类细胞具有间充质干细胞的生物学特性，且具有多向分化潜能，能够分化为多种细胞类型。脐带间充质干细胞由于取材方便，免疫原性低、且无伦理学争议，以及在临床试验中高增殖能力被广泛研究。临床研究发现，脐带间充质干细胞能够通过抑制免疫细胞的增殖能力，调控淋巴细胞的分化能力以及淋巴细胞分泌抗体的能力等来缓解自身免疫性疾病，进而维持免疫系统的平衡。目前，脐带间充质干细胞已被应用于临床治疗自身免疫性疾病的治疗方法中。然而，现有技术获得的脐带间充质干细胞免疫能力差的技术问题。因此，亟需提供一种提高脐带间充质干细胞免疫能力的方法。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种提高脐带间充质干细胞免疫调节能力的方法，该方法能够提高脐带间充质干细胞的免疫调节能力。
2、为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是：
3、一种提高脐带间充质干细胞免疫调节能力的方法，包括以下步骤：
4、（1）将原代培养得到的脐带间充质干细胞接种在添加京尼平苷酸、fbs的培养基中，当细胞融合度达到80%~90%后进行传代，持续传代2~3次；
5、（2）收集步骤（1）培养得到的脐带间充质干细胞，将其接种在添加fbs的培养基中，培养20h~30h后向培养基中添加gm-csf、贝母辛，继续培养40h~60h，收获细胞。
6、进一步地，所述步骤（1）、步骤（2）中的培养基为dmem/f12培养基。
7、进一步地，所述步骤（1）京尼平苷酸在培养基中的含量为32~50ng/ml。
8、进一步地，所述步骤（1）、步骤（2）添加fbs的培养基中，fbs的体积分数为1%~5%。
9、进一步地，所述步骤（2）gm-csf、贝母辛在培养基中的含量为：gm-csf 63~85ng/ml、贝母辛9~24ng/ml。
10、进一步地，所述步骤（1）、（2）脐带间充质干细胞在培养基中的接种密度为1×104~3×104个/ml。
11、进一步地，所述步骤（2）培养的温度为37℃，co2浓度为5%。
12、与现有技术相比，本专利技术的有益效果主要在于：
13、（1）本专利技术对于脐带间充质干细胞培养过程中的培养基成分进行了改进，首先是将原代培养得到的脐带间充质干细胞接种在添加了京尼平苷酸等成分的培养基中，细胞融合度达到80%~90%后进行传代，传代后将其接种在添加fbs的培养基中培养20h~30h后又向培养基中添加了贝母辛等成分。
14、（2）实验例的结果说明：本专利技术提供的方法适用于脐带间充质干细胞的培养；京尼平苷酸、贝母辛成分的使用显著提升了脐带间充质干细胞对淋巴细胞增殖的抑制作用，显著降低了t淋巴细胞亚群th1、th17的占比。由上可知，本专利技术提供的方法能够提高脐带间充质干细胞的免疫调节能力。
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1.一种提高脐带间充质干细胞免疫调节能力的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的提高脐带间充质干细胞免疫调节能力的方法，其特征在于，所述步骤（1）、步骤（2）中的培养基为DMEM/F12培养基。
3.根据权利要求1所述的提高脐带间充质干细胞免疫调节能力的方法，其特征在于，所述步骤（1）京尼平苷酸在培养基中的含量为32~50ng/mL。
4.根据权利要求1所述的提高脐带间充质干细胞免疫调节能力的方法，其特征在于，所述步骤（1）、步骤（2）添加FBS的培养基中，FBS的体积分数为1%~5%。
5. 根据权利要求1所述的提高脐带间充质干细胞免疫调节能力的方法，其特征在于，所述步骤（2）GM-CSF、贝母辛在培养基中的含量为：GM-CSF 63~85ng/mL、贝母辛9~24ng/mL。
6.根据权利要求1所述的提高脐带间充质干细胞免疫调节能力的方法，其特征在于，所述步骤（1）、（2）脐带间充质干细胞在培养基中的接种密度为1×104~3×104个/mL。
7.根据权利要求1所述的提高脐带间充质干细
...【技术特征摘要】
1.一种提高脐带间充质干细胞免疫调节能力的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的提高脐带间充质干细胞免疫调节能力的方法，其特征在于，所述步骤（1）、步骤（2）中的培养基为dmem/f12培养基。
3.根据权利要求1所述的提高脐带间充质干细胞免疫调节能力的方法，其特征在于，所述步骤（1）京尼平苷酸在培养基中的含量为32~50ng/ml。
4.根据权利要求1所述的提高脐带间充质干细胞免疫调节能力的方法，其特征在于，所述步骤（1）、步骤（2）添加fbs的培养基中，fbs的体积分数为1%...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈志华，
申请(专利权)人：青岛宝迈得生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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