【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于大豆肽综合利用，尤其涉及一种大豆肽的制备及其应用。
技术介绍
1、多种应激与导致氧化损伤的自由基生成增强有关，例如仔猪断奶，饮酒和食物中毒。当活性氧(ros)的产生超过细胞的抗氧化能力时，就会发生氧化应激，从而导致脂质、dna和蛋白质等生物大分子损伤并导致疾病。因此，人们对产生具有抗氧化特性的蛋白质水解产物产生了极大的兴趣。
2、目前，已经研究了许多蛋白质水解产物和肽，包括来自牛奶、蛋清、谷物和鱼类的蛋白质水解产物。大豆是世界上重要的农田作物，能够提供营养价值高、功能性好、成本低的优质蛋白质。特定的大豆蛋白水解物和肽已被证明具有各种抗氧化特性，如自由基清除活性、金属离子螯合活性和对脂质过氧化的抑制作用。takenaka等人以wistar大鼠为模型，发现大豆肽能有效抑制大鼠氧化应激，清除活性氧和自由基。wang等人表明，天贝中的活性肽增加了大鼠肝脏中的超氧化物歧化酶(sod)和过氧化氢酶(cat)活性，而肾脏中的sod和谷胱甘肽过氧化物酶(gsh-px)活性也增加了。song等通过添加不同水平的大豆肽(相对分子量主要在3-5kda范围内)，提高了幼年大比目鱼的gsh-px活性，发现其血清总抗氧化能力(t-aoc)和sod活性显著增强。
3、尽管大豆肽(sbp)被证明对一些细胞的氧化应激具有保护作用，但关于sbp对仔猪肠上皮细胞的保护作用的研究数量有限。ipec-j2细胞系是一种非转化、非致瘤性的小肠上皮细胞系，分泌粘蛋白，产生细胞因子/趋化因子，并表达与来源组织相似的toll样受体，利用ipe
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种大豆肽在制备缓解猪肠上皮细胞氧化损伤产品中的应用，能够减轻氧化损伤对猪肠上皮细胞的细胞毒性、细胞凋亡，修复屏障功能损伤，增强抗氧化能力，从而有效缓解猪肠上皮细胞氧化损伤。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种大豆肽在制备缓解猪肠上皮细胞氧化损伤产品中的应用。
4、优选的，所述大豆肽通过减少细胞凋亡、改善肠道屏障功能、提高抗氧化能力来缓解猪肠上皮细胞氧化损伤。
5、优选的，所述大豆肽通过调节细胞凋亡相关基因、紧密连接蛋白基因、nrf2相关基因的mrna和/或蛋白表达水平来缓解猪肠上皮细胞氧化损伤。
6、优选的，所述细胞凋亡相关基因包括bax、bcl-2、caspase3；所述紧密连接蛋白基因包括zo-1、claudin-1、occludin；所述nrf2相关基因包括cat、gpx1、sod1、ho-1、nqo1、nrf2。
7、优选的，所述大豆肽的制备方法包括：以重量/体积比为1:3～5将豆粕与蒸馏水混合，用碱性蛋白酶以蛋白酶活性2000～3000u/ml在50～60℃、ph＝8.5～9.5的条件下水解4～5h，得大豆肽。
8、优选的，所述水解后调节ph至4.5～5.5，煮沸20～40min灭酶。
9、优选的，所述制备方法还包括，所述灭酶后向上清液中加入活性炭，所述活性炭质量为上清液体积的5～15％，所述活性炭作用时间为0.5～1.5h。
10、优选的，所述制备方法还包括，加入活性炭后采用孔径为0.4～0.5μm滤膜去除不溶性物质。
11、优选的，所述产品包括药品、饲料或饲料添加剂。
12、本专利技术的有益效果：
13、大豆肽能够缓解氧化损伤造成的ipec-j2细胞中bax、caspase-3等细胞凋亡相关基因mrna相对表达量的下降程度，以减少细胞凋亡；大豆肽能够提高ipec-j2细胞中zo-1、claudin-1和occludin等紧密连接蛋白基因mrna和/或蛋白相对表达量，增加肠道紧密性，以改善肠道屏障功能；大豆肽能够抑制氧化损伤诱导的ipec-j2细胞中cat、sod1、ho-1和nrf2等nrf2相关基因mrna和/或蛋白相对表达量的下降，提高gpx1基因mrna相对表达量，以提高猪肠上皮细胞的抗氧化能力，从而实现缓解猪肠上皮细胞氧化损伤。本专利技术扩展了大豆肽应用范围，提升了大豆肽的应用价值。
14、本专利技术通过对大豆肽制备工艺条件的优化，得到的大豆肽95.76％的分子量小于3000da，肽分子量小，且分子量小的肽含量高，生物活性高，能够提高猪肠上皮细胞活力和抗氧化酶活性，减少h2o2引发的细胞毒性和细胞凋亡，增加肠道紧密性，修复屏障功能损伤，增强细胞抗氧化能力，从而实现有效缓解猪肠上皮细胞氧化损伤的功能。
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1.一种大豆肽在制备缓解猪肠上皮细胞氧化损伤产品中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述大豆肽通过减少细胞凋亡、改善肠道屏障功能、提高抗氧化能力来缓解猪肠上皮细胞氧化损伤。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述大豆肽通过调节细胞凋亡相关基因、紧密连接蛋白基因、Nrf2相关基因的mRNA和/或蛋白表达水平来缓解猪肠上皮细胞氧化损伤。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述细胞凋亡相关基因包括Bax、Bcl-2、Caspase3；所述紧密连接蛋白基因包括ZO-1、Claudin-1、Occludin；所述Nrf2相关基因包括CAT、GPX1、SOD1、HO-1、NQO1、Nrf2。
5.根据权利要求1～4任意一项所述应用，其特征在于，所述大豆肽的制备方法包括：以重量/体积比为1:3～5将豆粕与蒸馏水混合，用碱性蛋白酶以蛋白酶活性2000～3000U/mL在50～60℃、pH＝8.5～9.5的条件下水解4～5h，得大豆肽。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述水解后调节pH至4.5
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述制备方法还包括，所述灭酶后向上清液中加入活性炭，所述活性炭质量为上清液体积的5～15％，所述活性炭作用时间为0.5～1.5h。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述制备方法还包括，加入活性炭后采用孔径为0.4～0.5μm滤膜去除不溶性物质。
9.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括药品、饲料或饲料添加剂。
...【技术特征摘要】
1.一种大豆肽在制备缓解猪肠上皮细胞氧化损伤产品中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述大豆肽通过减少细胞凋亡、改善肠道屏障功能、提高抗氧化能力来缓解猪肠上皮细胞氧化损伤。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述大豆肽通过调节细胞凋亡相关基因、紧密连接蛋白基因、nrf2相关基因的mrna和/或蛋白表达水平来缓解猪肠上皮细胞氧化损伤。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述细胞凋亡相关基因包括bax、bcl-2、caspase3；所述紧密连接蛋白基因包括zo-1、claudin-1、occludin；所述nrf2相关基因包括cat、gpx1、sod1、ho-1、nqo1、nrf2。
5.根据权利要求1～4任意一项所述应用，其特征在于，...
【专利技术属性】
技术研发人员：卢富山，尹清强，王潇，张建松，徐李娟，常娟，王平，刘超齐，王利军，金三俊，李新新，
申请(专利权)人：河南普爱饲料股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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