【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分析检测，具体涉及一种农产品中不同结构生物活性物质的定性和定量检测方法。
技术介绍
1、食品的营养、健康和安全逐渐受到消费者的重视，消费者更加注重食物品质，并将其与生产系统、成分使用、食物来源(特定区域)以及产品真实性紧密联系起来。国标对食品的营养特征的关注主要是常量成分(如碳水化合物、蛋白质和脂质)以及部分微量化合物(如酚酸、萜烯和类黄酮)。然而不同农产品的物理性状，生物组分差异各不相同，对高效快速的前处理方法开发提出了较高的挑战。目前，蔬菜中活性物质的提取和分离仍然聚焦于某一种或一类化合物，不能满足快速挖掘优质蔬菜的特征性营养成分，不利于农产品的市场推广。
2、为了精准定位农产品中的营养特征和关键组分，针对不同结构的化合物，已经开发了众多的检测分析方法。常用的检测技术包括分光光度法、核磁共振技术、高效液相色谱、色谱-质谱联用技术等。分光光度法操作简单、成本低、分析速度快及高选择性，但对溶剂要求较高，需空白对照；定性准确性差，易受杂质干扰，适用于总黄酮、总酚酸、总生物碱的测定；核磁共振法速度快，无损，高通量，无需复杂的预处理，高重复性和再现性，其缺点仅限于检测最丰富的代谢物(≥1μm)，且灵敏度不高，成本高，适用于农产品中脂肪、多元醇类、有机酸、糖类等高丰度极性营养代谢物；高效液相色谱-质谱联用法降低了基质干扰，样品用量少，可检测代谢物覆盖面广，分析时间短、灵敏度高且重复性好，其缺点是离子抑制作用明显，不能电离的化合物就无法检测代谢物，不适用于易挥发的成分，适合测定低丰度非极性或中等极性代谢物。目前，
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种农产品中不同结构生物活性物质的定性和定量检测方法。本专利技术的检测方法能够同时检测不同结构的化合物。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种农产品中不同结构生物活性物质的定性检测方法，包括以下步骤：
4、将待测农产品和提取溶剂混合进行超声提取，得到待测液；所述提取溶剂包括甲醇或水；
5、将所述待测液进行液相色谱-高分辨质谱检测，根据检测结果和预定的指纹图谱数据库，确定待测农产品中含有的生物活性物质的种类；
6、所述不同结构生物活性物质包括黄酮类、酚酸类、酚类、生物碱类、多糖与皂甙类、维生素类和其他功能因子中的一种或多种；
7、所述黄酮类包括大豆黄素、异鼠李素-3-o-葡萄糖苷、异鼠李素-芸香糖苷、山奈酚-3-o-芸香糖苷、槲皮苷、木犀草素、豆苷、染料木素、染料木苷、(-)-表没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、大豆黄苷、(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯、木犀草苷、山奈酚、高良姜素、柚皮苷、苛因、松属素、芹菜素、槲皮素、杨梅酮、根皮苷、金丝桃苷、橙皮素、芦丁、柚皮素、原花青素b1、原花青素b2、槲皮素-木糖苷、异数李素-3-β-d-半乳糖苷、桑色素、原花青素b3、原花青素c1、鹰嘴豆芽素、橘皮素、川皮苷、甜橙黄酮、圆柚酮、4',5,7,8-四甲氧基黄酮、(+)-儿茶素、芹菜苷、丁香亭、金合欢素、杨梅苷、3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮、5-去甲基川陈皮素、异甘草素、没食子儿茶素没食子酸酯和芒柄花素7-o-葡萄糖苷中的一种或多种；
8、所述酚酸类包括反式-邻香豆酸、绿原酸、鬼臼毒素、新绿原酸、牛磺酸、龙胆酸、阿魏酸、异阿魏酸、香草酸、咖啡酸、反式-对香豆酸、香兰素、3,5-二羟基苯甲酸和佛手柑素中的一种或多种；
9、所述酚类包括丁香酸、熊果苷、没食子酸、儿茶素、原儿茶酸、白藜芦醇、芥子酸、3-羟基肉桂酸、水杨酸和鞣花酸中的一种或多种；
10、所述生物碱类包括咖啡因、毛果芸香碱、千里光宁、次乌头碱、东莨菪碱、倒千里光碱、(-)-番木鳖碱、阿托品、胡椒碱、新乌头碱、千里光非灵、野百合碱、乌头碱、喜树碱、秋水仙碱和(-)-可替宁中的一种或多种；
11、所述多糖与皂甙类包括人参皂甙rg2、人参皂苷rb1、人参皂甙rd、柠檬苦素、人参皂苷rg3、人参皂苷rb2、人参皂苷rc和虾青素中的一种或多种；
12、所述维生素类包括吡哆胺、吡哆醇、吡哆醛、泛酸、烟酰胺、烟酸和维生素b2中的一种或多种；
13、所述其他功能因子包括根皮素、人参皂苷re、10-羟基-2-葵烯酸、茶氨酸、l-羟脯氨酸、5'-肌苷酸、原儿茶酸乙酯、双氢麦角汀和地衣酸中的一种或多种；
14、所述液相色谱-高分辨质谱检测的液相色谱条件包括：流动相a为体积分数0.05～0.2％甲酸水溶液，流动相b为体积分数0～0.1％甲酸乙腈溶液；流速：0.3ml/min；梯度洗脱程序：0-1.5min，流动相b为2％；1.5-18min，流动相b由2％升至98％；18-23min，流动相b为100％；23～25min，流动相b由100％降至2％；25-30min，流动相b保持2％；柱温：35～50℃；进样量：5～10μl；
15、所述液相色谱-高分辨质谱检测的高分辨质谱条件包括：离子源：加热电喷雾离子源；全扫描-数据依赖性二级扫描模式，扫描质量范围100～1500m/z；气帘气：30～45psi；喷雾气：45～55psi，辅助加热气：45～55psi；喷雾电压：5000v(+):4800v(-)；毛细管温度：300～350(+)℃,280～320(-)℃；碰撞能量：40±20ev；鞘气流速：25～35arb；辅助气体流速：8～12arb。
16、优选的，所述待测农产品包括蔬菜、水果或其他可食用植物，所述其他可食用植物包括番红花瓣、菊花或百合花等。
17、优选的，当所述待测农产品为蔬菜时，所述提取溶剂为甲醇。
18、优选的，所述蔬菜与甲醇的用量比为1～2g:10ml。
19、优选的，当所述述待测农产品为其他可食用植物时，所述提取溶剂为水。
20、优选的，所述其他可食用植物与水的用量比为0.1g:3～5ml。
21、优选的，所述超声提取的温度为50～60℃，时间为30～50min。
22、优选的，所述流动相a为体积分数0.1％甲酸水溶液，流动相b为乙腈。
23、优选的，所述液相色谱-高分辨质谱检测使用的色谱柱为syncronis c18，规格为2.1mm×100mm。
24、本专利技术还提供了一种农产品中不同结构生物活性物质的定量检测方法，根据上述技术方案所述的定性检测方法确定待测农产品中含有的生物活性物质的种类后，采用外标法定量，得到待测农产品中含有的生物活性物质的含量。
25、与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
26、本专利技术提供了一种农产品中不同结构生物活性物质的定性检测方法，包括以下步骤：将待测农产品和提取溶剂混合进行超声提取，得到待测液；所述提取溶剂包括甲醇或水；将所述待测液进行液相色谱-高分辨质谱检测，根据检测结果本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种农产品中不同结构生物活性物质的定性检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的定性检测方法，其特征在于，所述待测农产品包括蔬菜、水果或其他可食用植物，所述其他可食用植物包括番红花瓣、菊花或百合花。
3.根据权利要求2所述的定性检测方法，其特征在于，当所述待测农产品为蔬菜时，所述提取溶剂为甲醇。
4.根据权利要求3所述的定性检测方法，其特征在于，所述蔬菜与甲醇的用量比为1～2g:10mL。
5.根据权利要求2所述的定性检测方法，其特征在于，当所述待测农产品为其他可食用植物时，所述提取溶剂为水。
6.根据权利要求5所述的定性检测方法，其特征在于，所述其他可食用植物与水的用量比为0.1g:3～5mL。
7.根据权利要求1所述的定性检测方法，其特征在于，所述超声提取的温度为50～60℃，时间为30～50min。
8.根据权利要求1所述的定性检测方法，其特征在于，所述流动相A为体积分数0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈。
9.根据权利要求1所述的定性检测方法，其特征在于
10.一种农产品中不同结构生物活性物质的定量检测方法，根据权利要求1～9任一项所述的定性检测方法确定待测农产品中含有的生物活性物质的种类后，采用外标法定量，得到待测农产品中含有的生物活性物质的含量。
...【技术特征摘要】
1.一种农产品中不同结构生物活性物质的定性检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的定性检测方法，其特征在于，所述待测农产品包括蔬菜、水果或其他可食用植物，所述其他可食用植物包括番红花瓣、菊花或百合花。
3.根据权利要求2所述的定性检测方法，其特征在于，当所述待测农产品为蔬菜时，所述提取溶剂为甲醇。
4.根据权利要求3所述的定性检测方法，其特征在于，所述蔬菜与甲醇的用量比为1～2g:10ml。
5.根据权利要求2所述的定性检测方法，其特征在于，当所述待测农产品为其他可食用植物时，所述提取溶剂为水。
6.根据权利要求5所述的定性检测方法，其特征在于，所述其他可食用植物与...
【专利技术属性】
技术研发人员：王守英，司文帅，陈淼淼，周昌艳，白冰，杨海锋，吴楠，霍凯旋，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，
类型：发明
国别省市：
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