基因编辑家蚕BmRPA2在制备丝胶茧品系中的应用制造技术

本发明专利技术公开了基因编辑家蚕BmRPA2在制备丝胶茧品系中的应用，通过利用CRISPR/Cas9技术，在家蚕后部丝腺对BmRPA2进行基因编辑，制备只生产丝胶的家蚕品系，可以简化生产工序、降低成本、显著提高生产效率，而且能确保产品质量的稳定性。后续在该品系中增量表达高附加值外源蛋白，也可极大简化纯化过程，这一突破将有助于推动丝胶蛋白在化妆品、生物、医学等多个领域的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及基因编辑家蚕bmrpa2在制备丝胶茧品系中的应用。

技术介绍

1、蚕茧主要由丝素和丝胶构成，丝胶占比约20%-30%，丝素占比约70%-80%。丝胶作为一种天然材料，具有优良的性能，如生物相容性、可降解性和独特的生物学特性。通过在家蚕丝胶中特异性表达高附加值的外援蛋白，应用于组织修复、再生医学、手术粘合等多个生物医学领域。

2、蚕丝蛋白主要是由内层丝素蛋白和外层丝胶蛋白构成。为了去除丝素获取丝胶蛋白，缫丝行业的传统做法是，先通过碱法对蚕丝进行脱胶处理，然后通过酸析法回收丝胶。该过程不但程序复杂、对设备的要求高，而且存在回收效率低、回收产物质量差等问题。创制生产丝胶同时不生产丝素（即丝胶茧）的新型家蚕素材，可以有效解决以上问题，将为丝胶蛋白及丝胶中表达外源蛋白的提取和纯化带来革命性变化。复制蛋白a2（rpa2）是rpa的一个重要组成部分，在维持基因组稳定性和细胞正常生理功能中发挥重要作用，我们通过基因编辑技术，靶向rpa2制备生产丝胶茧的家蚕品系，可为开发新型生物医学材料提供理论基础和技术支持。p>

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【技术保护点】

1.基因编辑家蚕BmRPA2在制备丝胶茧品系中的应用，其特征在于：所述BmRPA2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述对BmRPA2基因编辑的方法是使用CRISPR/Cas9技术。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述对BmRPA2基因编辑的方法是构建BmRPA2的sgRNA转基因载体，得到的sgRNA品系与后部丝腺特异性表达Cas9品系PSG-Cas9杂交，筛选双光敲除个体。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述BmRPA2的sgRNA转基因载体由以下方法制得将SEQ ID...

【技术特征摘要】

1.基因编辑家蚕bmrpa2在制备丝胶茧品系中的应用，其特征在于：所述bmrpa2基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述对bmrpa2基因编辑的方法是使用crispr/cas9技术。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述对bmrpa2基因编辑的方法是构建bmrpa2的sgrna转基因载体，得到的sgrna...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋亮，鞠聂旺，夏庆友，郭慧珍，
申请(专利权)人：西部重庆科学城种质创制大科学中心，
类型：发明
国别省市：