【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于中药制剂检测，具体涉及一种构建双苓止泻颗粒的指纹图谱并进行质量检测的方法。
技术介绍
1、双苓止泻颗粒是由双苓止泻口服液改良而来，其成分包括黄芩、白术、茯苓、猪苓、贯众、半夏、陈皮、地榆、肉桂共计9味中药，具有清热化湿、健脾止泻的功效。该产品主要用于湿热内蕴、脾虚失健所致的小儿腹泻，对轮状病毒性肠炎引起的腹泻具有很好的疗效。
2、双苓止泻口服液的现行质量标准中，采用薄层色谱法分别对黄芩、白术、陈皮、肉桂四味药材及主要组分进行鉴别，采用高效液相色谱法测定了黄芩苷的含量。现有技术中，王建永在《双苓止泻颗粒质量控制方法研究》中对双苓止泻颗粒的质量控制方法进行了探讨，其采用薄层色谱法对双苓止泻颗粒中黄芩、白术、肉桂和陈皮等进行定性鉴别，采用高效液相色谱法对黄芩中的黄芩苷进行了含量测定。然而该方法难以实现双苓止泻颗粒中地榆、茯苓、猪苓、半夏等其他成分的有效控制。中药多成分的复杂性决定了单一成分难以准确表达中药的内在质量。
3、中药指纹图谱是一种综合的、可量化的鉴别手段，是当前符合中药特色的评价中药真实性、稳定性和一致性的质量控制模式之一。指纹图谱能全面反映中药所含成分，可从整体上表征中药产品的质量。而以中药色谱指纹图谱作为双苓止泻颗粒的质量控制方法，目前尚未见报道。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术基于超高效液相色谱(uplc)，提出了一种双苓止泻颗粒指纹图谱检测方法，可以更全面有效地控制双苓止泻颗粒的质量，并为进一步探索和研究双苓止泻颗粒的质量提
2、本专利技术的目的之一在于提供一种利用超高效液相色谱法检测双苓止泻颗粒指纹图谱的方法，该方法专属性强、重复性好，为双苓止泻颗粒的质量评价提供了技术支持。
3、为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
4、利用超高效液相色谱法检测双苓止泻颗粒指纹图谱的方法，所述超高效液相色谱法是采用十八烷基硅烷键合硅胶作为色谱柱填充剂，以流动相a和流动相b为流动相进行梯度洗脱，利用紫外检测器进行检测并获得色谱图；采用指纹图谱软件处理所述色图谱，得到双苓止泻颗粒指纹图谱；所述流动相a为乙腈，流动相b为磷酸溶液；所述紫外检测器的检测波长为200-205nm。
5、进一步，所述双苓止泻颗粒的组分包括黄芩、白术、茯苓、猪苓、贯众、半夏、陈皮、地榆和肉桂。
6、进一步，所述磷酸溶液的浓度为0.03vol％-0.08vol％，优选为0.05vol％。
7、进一步，洗脱时间为78分钟。
8、进一步，梯度洗脱程序为：
9、0-60min，设置流动相a的体积分数为0-26％，流动相b的体积分数为100％-74％；
10、60-68min，设置流动相a的体积分数为26％-50％，流动相b的体积分数为74％-50％；
11、68-75min，设置流动相a的体积分数为50％-90％，流动相b的体积分数为50％-10％；
12、75-78min，设置流动相a的体积分数为90％，流动相b的体积分数为10％。
13、进一步，所述流动相的流速为0.1-0.3ml/min；柱温为40±2℃。
14、作为优选，所述流动相的流速为0.2ml/min；柱温为40℃。
15、作为优选，进样量为1μl。
16、作为优选，色谱柱采用t3c18色谱柱。
17、作为优选，色谱柱长度为100mm，内径为2.1mm，填料粒径为1.6μm。
18、作为优选，检测波长为203nm。
19、进一步，所述指纹图谱软件为中药色谱指纹图谱相似度评价系统。
20、进一步，将待测产品溶液的指纹图谱，导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，经多点校正后进行mark峰匹配，得到待测产品溶液的指纹图谱。
21、进一步，在进行高效液相色谱分析之前，采用浓度为70vol％的甲醇作为溶剂配制待测样品。
22、进一步，所述指纹图谱包括18个特征峰，以峰11为参照峰，峰1与参照峰的相对保留时间为0.063～0.077，峰2与参照峰的相对保留时间为0.081～0.099，峰3与参照峰的相对保留时间为0.162～0.198，峰4与参照峰的相对保留时间为0.261～0.319，峰5与参照峰的相对保留时间为0.522～0.638，峰6与参照峰的相对保留时间为0.693～0.847，峰7与参照峰的相对保留时间为0.729～0.891，峰8与参照峰的相对保留时间为0.747～0.913，峰9与参照峰的相对保留时间为0.765～0.935，峰10与参照峰的相对保留时间为0.819～1.001，峰11与参照峰的相对保留时间为1.00，峰12与参照峰的相对保留时间为1.008～1.232，峰13与参照峰的相对保留时间为1.026～1.254，峰14与参照峰的相对保留时间为1.062～1.298，峰15与参照峰的相对保留时间为1.161～1.419，峰16与参照峰的相对保留时间为1.269～1.551，峰17与参照峰的相对保留时间为1.287～1.573，峰18与参照峰的相对保留时间为1.422～1.738；其中，峰2为没食子酸，峰8为芸香柚皮苷、峰9为山奈苷、峰10为橙皮苷、峰11为黄芩苷、峰14为汉黄芩苷、峰15为黄芩素、峰16为汉黄芩素、峰18为柠檬烯。
23、可以根据18个特征峰的相对保留时间对双苓止泻颗粒中各组分进行定性。同时，利用前述方法可以对双苓止泻颗粒中18个特征峰进行分离；同时分离以上18个特征峰的分离时间为78分钟。
24、进一步，根据检测品与对照指纹图谱中18个特征峰色谱相对保留行为的一致性来判断产品是否含有18个特征峰，包括其中已指认的9个色谱峰，分别为：峰2为没食子酸，峰8为芸香柚皮苷、峰9为山奈苷、峰10为橙皮苷、峰11为黄芩苷、峰14为汉黄芩苷、峰15为黄芩素、峰16为汉黄芩素、峰18为柠檬烯。
25、本专利技术的目的之二在于提供一种基于前述方法对双苓止泻颗粒进行质量检测的方法。
26、为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
27、基于前述方法对双苓止泻颗粒进行质量检测的方法，所述方法包括如下步骤：
28、(1)利用前述方法对双苓止泻颗粒样品及对照品进行检测，得到指纹图谱；
29、(2)将检测品的指纹图谱与对照指纹图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统中并计算相似度；通过相似度判断双苓止泻颗粒的质量稳定性。
30、进一步，若相似度≥0.90，表明双苓止泻颗粒样品质量合格；若相似度＜0.90，表明样品质量不合格。
31、进一步，对照指纹图谱是通过将多个批次的待测产品溶液导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，经多点校正后进行mark峰匹配，利用平均数法生成；所述平均数法采用的时间窗为0.1min。
32、作为优选的技术方案，所述方法包括如下步骤：
33、步本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.利用超高效液相色谱法检测双苓止泻颗粒指纹图谱的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱法是采用十八烷基硅烷键合硅胶作为色谱柱填充剂，以流动相A和流动相B为流动相进行梯度洗脱，利用紫外检测器进行检测并获得色谱图；采用指纹图谱软件处理所述色图谱，得到双苓止泻颗粒指纹图谱；所述流动相A为乙腈，流动相B为磷酸溶液；所述紫外检测器的检测波长为200-205nm。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述磷酸溶液的浓度为0.03vol％-0.08vol％。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，梯度洗脱程序为：
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相的流速为0.1-0.3mL/min；柱温为40±2℃。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述指纹图谱软件为中药色谱指纹图谱相似度评价系统。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在进行高效液相色谱分析之前，采用浓度为70vol％的甲醇作为溶剂配制待测样品。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述指纹图谱包括18个特征峰，以峰11为
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，根据检测品与对照指纹图中18个特征峰相对保留行为的一致性来判断产品是否含有18个特征峰。
9.基于权利要求1所述的方法对双苓止泻颗粒进行质量检测的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，若相似度≥0.90，表明双苓止泻颗粒样品质量稳定；
...【技术特征摘要】
1.利用超高效液相色谱法检测双苓止泻颗粒指纹图谱的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱法是采用十八烷基硅烷键合硅胶作为色谱柱填充剂，以流动相a和流动相b为流动相进行梯度洗脱，利用紫外检测器进行检测并获得色谱图；采用指纹图谱软件处理所述色图谱，得到双苓止泻颗粒指纹图谱；所述流动相a为乙腈，流动相b为磷酸溶液；所述紫外检测器的检测波长为200-205nm。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述磷酸溶液的浓度为0.03vol％-0.08vol％。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，梯度洗脱程序为：
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相的流速为0.1-0.3ml/min；柱温为40±2℃。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述指纹图谱软件为中药色谱指纹图谱相似度评价系统。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在进行高效液相色谱分析之前，采用浓度为70vol％的甲醇作为溶剂配制待测样品。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述指纹图谱包括18个特征峰，以峰11为参照峰，峰1与参照峰的相对保留时间为0.063～0.077，峰2与参照峰的相对保留时间为0.081～0.099，峰3与参照峰的相对保留时间为0.162～0.198，峰4与参照峰的相对保留时间为0.261～0.319，峰5与参照峰的相对保...
【专利技术属性】
技术研发人员：安太勇，禹奇男，罗诗遂，万荣国，彭涛，官柳，冉亚东，刘世琪，董自亮，原欢欢，龙欣妤，
申请(专利权)人：太极集团重庆涪陵制药厂有限公司，
类型：发明
国别省市：
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